比较各种动物在实验中的优缺点

1、医学实验动物学创伤修复动物模型的建立创伤修复是创伤学乃至整个医学中最重要又是最基本的问题之 一。随着人们对创伤研究层次的不断加深以及研究范围的不断扩展， 相关的动物实验也在不断向纵深发展。其中，建立理想稳定的创伤动 物模型是现代创伤外科领域在基础与应用研究中的一个极为重要的 实验方法和手段，一个符合临床发病过程和符合影响创面修复主要 因素的动物模型将有助于更科学、更准确地认识创伤后机体各系统 及局部创面的演变规律，为临床针对性地治疗、护理创伤病人提供 基础资料。笔者根据自己建立创伤动物模型的实践，并结合国内外有 关报道，对几种实用的创伤修复动物模型的建立综述如下。1 创伤修复动物的选择实验动物

2、的选择主要根据动物的解剖生理特点，以最大限度地 满足实验目的为原则。选择的原则应注意4点1. 1注意选择与人相似的实验动物 如猪、狗、羊、兔、大 鼠和豚鼠。观察药物的作用与创面愈合进展情况常选择与人皮肤组织 结构相似的猪、狗和豚鼠，它们也同样适宜于有关创伤休克的研究。 鼠由于对一般炎症反应敏感，故适合用于创面脓毒症和创面用药的 研究。1.2意动物的种类、品系特点不同种类的动物对接受致敏物质的 反应程度是不一样的，如豚鼠 兔 狗 小鼠。热原反应宜选用 兔和豚鼠，不宜选用大鼠和小鼠。做心功能测压宜选用狗、兔，其次 是大鼠。在放射、烧伤复合伤的实验研究中常选用狗、大鼠和小鼠 而不选兔，因为兔照射后常

3、引起休克而死亡。1.3意动物实验的重复性与可靠性 为了增强动物模型的重复 性，必须严格控制动物品种、品系、年龄、性别、体重、健康 状况等方面的差异，同时还要在饲养管理、实验与环境条件、季节、 消毒情况、实验步骤、药品的规格、药物剂量、给药途径以及实 验者操作技术熟练程度等方面要保持一致，才能保证重复的可靠性。注意实验动物的一般要求和特殊性 在选用动物时除需要 遵守实验动物的一般原则外，还应考虑到不同研究项目对动物的特 殊要求，在实验中应尽量排除实验动物的个体差异对结果的影响。为 保证结果的可靠性和易于重复，通常应选用成年、健康动物进行实 验。对创伤研究而言，一般首选雄性动物。如果考虑到性别差异

4、对结 果的影响，也可采用雌雄各半做实验。2 建立创伤修复动物模型的方法在建立创伤动物模型的全过程中必须遵守保护实验动物国际 条款，人道地对待实验动物。动物若麻醉不成功不得进行实验。2.1全层皮肤切除伤模型 首先采用戊巴比妥麻醉动物(30mg/ kg)，麻醉成功后再进行制模。此模型一般是在动物背部脊柱两侧 旁开2 cm，用特制打孔器或利刀全层切除皮肤，若在实验的过程中需要监测生命体征，特别是要进行动脉插管监测平均动脉压时，则可 在动物腹部制作创面。创面形状一般选择圆形或方形，直径大小可根 据需要自行设计，深至皮下，但不要伤及脊柱旁或腹部肌肉上的脂肪 和筋膜36。据付小兵等7研究认为，选择直径1.

5、 8 cm、面积2. 54 cm2的圆形全层皮肤切除创面，可观察到在14 d左右创面愈合的 自然过程，与临床该类创面愈合时间一致。此模型制作适用于大鼠、 小鼠、大型猪、兔等多种动物，可用于评价药物疗效和观察创伤愈 合的自然过程。用于护理评估的指标：创面收缩的大小及潜行深度， 创面渗出液的量和形态，创面周围组织硬度及肿胀情况，肉芽组织和 上皮组织增生情况（占创面容积的百分比）以及局部炎症情况等。2.2 皮肤线型切割伤模型 此类模型切口可选在动物背部脊柱 两侧或腹部，用利刀切割动物皮肤，产生线型切口，可深达筋膜，长 度以2 cm4 cm为宜7。根据不同的实验要求和目的可采取不同的 后续处理，若观察

6、皮肤及组织的抗张力强度，可给予缝合；若要定量 测创面肉芽组织生成总量，则在伤腔内植入一种多孔的硅胶管，然后 再封闭创面。一定时间后取出该管，测定长入其中的肉芽组织3。此 模型不适宜作为组织学与生化学指标观测。2. 3 烧伤创面愈合模型 55 C以上温度作用于动物体表组织 一定时间后即可引起实验性烧伤1。其损伤程度决定于温度的高低、 持续时间的长短和组织本身，以及实验动物机体的反应性。常用的火 焰烧伤法包括凝固汽油法、混合燃烧法和闪光粉法，其中常用的凝 固汽油法，就是在动物已脱毛的背部迅速均匀的涂上3 %凝固汽油 8 ml ,立即点火燃烧10 s，然后用湿布灭火，这样可制成浅II度烧 伤，燃烧1

7、5 s可制成深II度烧伤。此类模型虽接近于实战情况， 具有一定的实际意义，但烧伤时的温度与均匀程度不易控制，因而不 适应创面修复的研究9。此外还有电光源法，就是利用2 kW溴钨灯的焦点热源致伤，若距犬背部70 cm、光照15 s30 s可制成深III 度烧伤,5 s7 s可致浅II度烧伤，10 s15 s可致深II度烧伤,3 s5 s可致I度烧伤；距大鼠背部70 cm、光照12 s可致III度 烧伤。此方法与核爆炸所致光辐射烧伤比较接近，且操作经济、卫 生、容易控制烧伤深度和面积、重复性较好。2. 4 烫伤创面愈合模型 55 C100 C热水、恒温恒压电 热烫伤仪或恒温水浴烫伤仪、点状烫伤器等

8、烤灼作用于动物背部或 腹部表面组织一定时间后，即可造成实验性烫伤模型。根据动物大小 可制作多个创面供研究10。采用恒温恒压电热烫伤仪在压力1 kg、 温度80 C条件下作用皮肤6 s可造成浅II度烫伤，作用8 s可 造成深II度烫伤，作用12 s可造成III度烫伤9。此 外,Borman11用厚度为3 mm的纱布浸入100 C的沸水中，然后 再置于大鼠腹部拟烫伤区4 s，可致浅II度烫伤,8 s可致深I度 烫伤。此法简单易行且易于控制，重复性好。张立颖等12为研究一 种适于监测生理指标的烫伤动物模型，经多次实验验证和组织学证 实，认为将浸入热水的纱布，待其水温恒定于99C,平铺于大鼠腹部 3

9、s可致浅II度烫伤,10 s可致深II度烫伤。且认为选用纱布作为 致伤物，能使其与皮肤弧面紧贴，可避免热力致伤的不平衡性导致创 面烫伤程度深浅不一的特点。该类模型既可用于研究烫伤创面愈合的 病理生理过程，也可用于促修复药物的评价13。局部皮肤坏死模型 就是用腐蚀性较强的化学物质作用于 动物皮肤表面一定时间或局部注射可致组织坏死的药物，以致动物 真皮坏死，形成溃疡。Mekkes等2制此模的方法：在猪背部先用电 动刀切除一定大小，厚度为2. 4 mm2. 5 mm的皮肤，然后再用浸 满20 %三氯乙酸的纱布覆盖致伤部位5 min，即可致局部组织坏死。 Rudolph用1种抗肿瘤的化疗药物阿霉素，在

10、拟致伤部位皮下注射 一定剂量（大鼠一般50p g500p g，家兔100 mg200 mg）即可致 真皮坏死，伴有轻度持久的炎细胞浸润，以中性粒细胞为主，形成的 坏死焦痂可达50 d以上7。此类模型适用于研究创面愈合的基本病 理生理过程和发生机理，也可用于研究清创或促修复药物的作用效 果和治疗护理的机理。感染创面动物模型就是在动物的创口处接种一定浓度的已知致病菌，如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单孢菌，以致创 面感染。一般认为菌落计数超过每克105个创面愈合将发生困难3, 但也因动物和不同的环境而异。赵子粼等14认为，家兔在高湿热环 境下细菌感染浓度每克为109个，并按此浓度成功制成感染模型

11、，动 物创面及周围组织明显红肿，出现脓性分泌物。该模型可用于观察感 染创面的细菌定量变化，并适用于抗感染与促修复药物或敷料的效 果评价。放射复合伤动物模型该模型分为全身和局部放射复合物。全身放射复合伤模型，即将动物装在一特制的有机玻璃笼子里， 在距放射源一定距离处，辐射一定时间，再全层切除动物皮肤。由于 全身照射主要影响机体的造血系统和免疫系统，引起调节伤口愈合 的血源成分的减少或丧失，从而使伤口局部组织中生长因子表达降 低，导致全身照射后创伤愈合延迟，而局部照射主要损害伤口局部组 织，影响成纤维细胞等修复细胞的功能。国内外对全身放射复合伤的 研究较多，而对主要作用于表浅部位皮肤局部照射的研究

12、较少。与全 身照射相比，局部照射可避免全身因素的影响，更有助于深入地阐明 伤口愈合机理。刘建忠等15建立局部放射复合伤的方法：用60软 射线X射线机，电压45 kV，电流10 mA，单次局部照射吸收剂量率 0. 651 7Gy/ min，靶皮距25 cm，一次性照射大鼠臀部直径为30 cm 的圆形区域，非照射区用铅橡皮保护，然后用自制打孔器在大鼠臀部 对应部位制成直径为20 cm的圆形切割伤，深达皮下组织全层，但 不伤及皮下筋膜层，不缝合。该模型可用于观察经辐射后的动物伤口 愈合时间、原合成、病理学变化以及已愈合创面百分率的时相变化 等特点。创伤修复是一个十分复杂的过程，由于临床所积累的经验在时 间和空间上存在的局限性以及在道义和方法学上的种种限制，要深 入探讨创伤修复的发生发展机制与疗效机理，许多实验不能也不