食品仪器分析紫外可见分光光度法参考

1、紫外可见习题一、填空题1朗伯定律是说明光的汲取与液层厚度正比，比耳定律是说明光的汲取与溶液浓度成正比，两者合为一体称为朗伯一比尔定律，其定义为A=KCL。2摩尔吸光系数的单位是L.mol-1.cm，它表示物质的浓度为1mol.L-1液层厚度为1cm时溶液的吸光度。常用符号表示，故光的汲取定律的表达式可写为A=cL。吸光度和透射比（%）关系式是A=2-logT。一般分光光度剖析，使用波长在35Onm以上时可用玻璃比色皿，在350nm以下时应选用石英比色皿。紫外汲取光谱法大多应用于判定含有双键特别是共轭系统的化合物，如含羰基、羧基、硝基等的脂肪族化合物，以及含有苯环的芬芳族化合物。6.752型分光

2、光度计，采纳自准式光路，其波长范围为2001000nm，在波长范围内用钨丝灯作光源，在波长200-320nm范围内用氢弧灯作光源。3201000nm二、判断题1当有色溶液浓度为此时溶液投射比为2。（C时，其投射比，当其浓度增大）1倍时，仍切合比耳定律，则2.可见、紫外光汲取光谱的产生，是因为分子中原子的振动和分子的转动。（）比色剖析中显色时间越长越好。（）4.摩尔吸光系数与溶液的浓度，液层厚度没相关系。（）5.摩尔吸光系数越大，表示该物质对某波长光透过的能力越强。（）6.摩尔吸光系数越大，表示某物质对某波长的光汲取能力越强。（）7.722型分光光度计和752型分光光度计都是以钨灯作为光源的。（

3、）拿比色皿时只好拿毛玻璃面，不可以拿透光面，擦抹时一定用擦镜纸擦透光面，不可以用滤纸擦。（）饱和碳氢化合物在紫外光区不产生光谱汲取，所以常以饱和碳氢化合物作为紫外汲取光谱剖析的溶剂。（）三、选择题人眼能感觉到的光称为可见光，其波长范围是（D）。A.40070Onm；B.2O040Onm；C.20O6O0nm；D.4O076Onm；2.物质与电磁辐射互相作用后，产生紫外一可见汲取光谱，这是因为（C）。A分子的振动；B分子的转动；C原子核外层电子的跃迁；D原子核内层电子的跃迁；在分子汲取光谱法（分光光度法）中，运用光的汲取定律进行定量剖析，应采纳的入射光为（B）。白光；B单色光；C.可见光；D特色

4、波长锐线辐射光4.物质的颜色是因为选择性汲取了白光中的某些波长的光所致。CuSO4溶液体现蓝色是因为它汲取了白光中的（C）。蓝色光波；B绿色光波；C黄色光波；D青色光波；5.在分光光度法中宜采纳的吸光度读数范围为（D）。A.O0.2；B.O.1O.3；CO.31.O；O.76.有色配合物的摩尔汲取系数与下边要素中相关的量是（D）。A.比色皿厚度；B.有色配合物的浓度；C.汲取池的资料；D.入射光的波长；7.切合朗伯一比耳定律的有色溶液稀释时，其最大汲取峰的波长地点（C）。A向长波挪动；B向短波挪动；C不挪动、汲取峰值降落；D不挪动、汲取峰值增添；8.当吸光度A=O时，=（D）。A.O；B.10

5、；C.50；D100；9.钨灯可作为下述哪一种光谱剖析的光源（B）。A紫外原子光谱；B紫外分子光谱；C.红外分子光谱；D.可见光分子光谱。10.在可见一紫外分光光度计中，用于紫外区的光源是（C）。钨灯；B卤钨灯；C氢灯；D能斯特光源。11.用邻菲罗林法测定微量铁时，加入抗坏血酸的目的是（C）。调理酸度；B作氧化剂；C作复原剂；D作为显色剂。12在紫外汲取光谱曲线中，能用来定性的参数是（D）。A.最大汲取峰的吸光度；B最大汲取峰的波长；C.最大汲取峰处的摩尔吸光系数；DB+C。四、问答题什么是汲取曲线？有何实质意义？答：汲取光谱曲线是经过实验获取的，详细方法是：将不一样波长的光挨次经过某一固定浓

6、度和厚度的有色溶液，分别测出它们对各样波长光的汲取程度（用吸光度A表示），以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，画出曲线，此曲线即称为该物质的光汲取曲线（或吸收光谱曲线），它描绘了物质对不一样波长光的汲取程度。汲取曲线的意义在于：（1）汲取曲线给出了物质的最大汲取波长，在此波长下对物质进行测定，敏捷度最高。（2）不一样物质的汲取曲线，其形状和最大汲取波长都各不同样，所以，可利用汲取曲线来作为物质定性剖析的依照。什么叫选择汲取？它与物质的分子构造有什么关系？答：因为各样分子运动所处的能级和产生能级跃迁时能量变化都是量子化的，所以在分子运动产生能级跃迁时，只好汲取分子运动相对应的特定频次（或波长）

7、的光能。而不一样物质分子内部构造不一样，分子的能级也是千差万别，各样能级之间的间隔也互不同样，这样就决定了它们对不一样波长光的选择性汲取。3.在光度法测定中惹起偏离朗伯-比耳定律的主要要素有哪些？怎样除去这些要素的影响？答：（l）因为非单色光惹起的偏离。严格来说朗伯一比耳定律只合用于单色光，但当前用各样方法所获取的入射光实质上都是复合光，因此致使对朗伯一比耳定律的偏离。（2）因为溶液自己的化学或物理要素惹起的偏离。如因为介质的不平均性而惹起的偏离。当被测试液是胶体溶液、乳浊液或悬浮液时，入射光经过溶液后，除了一部分被溶液汲取外，还有一部分因散射而损失，使透光率减小，吸光度增添，致使偏离朗伯一比

8、耳定律。此外，由于溶液中的化学反响而惹起的偏离。溶液中的吸光物质常因离解、缔合、形成新的化合物或互变、异构等化学变化而改变其浓度，因此致使偏离朗伯一比耳定律。分光光度计的主要零件有哪些？各零件的作用是什么？答：主要有五大零件。（1）光源：其作用是供应切合要求的入射光。（2）单色器：其作用是把光源发出的连续光谱分解成单色光，并能正确方便地“拿出”所需要的某一波长的光，它是分光光度计的心脏部分。单色器主要由狭缝、色散元件和透镜系统构成。（3）汲取池（又叫比色皿）：是用于盛放待测液和决定透光液层厚度的器件。（4）检测器又称接受器，其作用是对透过汲取池的光作出响应，并把它转变为电信号输出，其输出电信号

9、大小与透过光的强度成正比。常用的检测器有光电池、光电管及光电倍增管等，它们都是鉴于光电效应原理制成的。（5）信号显示器：其作用是把检测器产生的电信号，经放大等处理后，用必定方式显示出来，以便于计算和记录。信号显示器有多种，跟着电子技术的发展，这些信号显示和记录系统将愈来愈先进。紫外-可见分光光度计按光路可分为哪几类？它们各有什么特色？答：按光路紫外-可见分光光度计可分为单光束式及双光束式两类。单光束分光光度计：从光源中发出的光，经过单色器等一系列光学元件及汲取池后，最后照在检测器上时一直为一束光。单光束分光光度计的特色是构造简单、价钱低，主要适于作定量剖析。其不足之处是测定结果受光源强度颠簸的

10、影响较大，因此给定量剖析结果带来较大偏差。双光束分光光度计：从光源中发出的光经过单色器后被一个旋转的扇形反射镜（即切光器）分为强度相等的两束光，分别经过参比溶液和样品溶液。利用另一个与前一个切光器同步的切光器，使两束光在不一样时间交替地照在同一个检测器上，经过一个同步信号发生器对来自两个光束的信号加以比较，并将两信号的比值经对数变换后变换为相应的吸光度值。这类仪器的特色是：能连续改变波长，自动地比较样品及参比溶液的透光强度，自动除去光源强度变化所惹起的偏差。关于一定在较宽的波长范围内获取复杂的汲取光谱曲线的剖析，此类仪器极为适合。紫外-可见分光光度计与可见分光光度计比较，有什么不一样之处？并说

11、明原由。答：可见分光光度计和紫外-可见分光光度计的差异：前者的使用波长范围是400780nm；后者的使用波长范围为2001000nm。可见分光光度计只好用于丈量有色溶液的吸光度，而紫外-可见分光光度计可丈量在紫外、可见及近红外有汲取的物质的吸光度。在吸光光度法中，选择入射光波长的原则是什么？答：为使测定结果有较高的敏捷度，应选择波长等于被测物质的最大汲取波长的光作为人射光，称为最大汲取原则。这样不单丈量敏捷度高，并且测准时偏离朗伯一比耳定律的可能性和程度减小，正确度也好。但当有扰乱物质存在时，有时不行能选择最大汲取波长，这时应依据汲取最大，扰乱最小的原则来选择入射光的波长。在吸光光度法中，影响

12、显色反响的要素有哪些？答：（1）显色反响的选择性要好。（2）显色反响的敏捷度要高。（3）显色剂与有色化合物之间的颜色差异要大。（4）反响生成的有色化合物构成要恒定。（5）有色化合物的化学性质要稳固。电子跃迁种类有哪些？哪些跃迁在紫外-可见光谱上能够反应出来？答：紫外汲取光谱是由化合物分子中三种不一样种类的价电子，在各样不一样能级上跃迁产生的。这三种不一样种类的价电子是：形成单键的电子、形成双键的电子和氧或氮、硫、卤素等含未成键的n电子。当分子汲取必定能量的光辐射时，分子内电子电子或n电子将由较低能级跃迁到较高能级，即由成键轨道或n非键轨道跃迁到相应的反键轨道中。三种价电子可能产生*，*，*，*

13、，n*，n*等六种形式电子跃迁，此中较为常有是*跃迁，n*跃迁，*跃迁和n*跃迁等四种种类。*跃迁：这种跃迁的汲取带出此刻200nm以下的远紫外区。如甲烷的max=125nm，它的汲取光谱曲线必要在真空中测定。n*跃迁：含有氧、氮、硫、卤素等杂原子的饱和烃衍生物都可发生n*跃迁。大部分n*跃迁的汲取带一般仍旧低于200nm，往常仅能见到未端汲取。比如饱和脂肪族醇或醚在180185nm，饱和脂肪胺在190200nm；饱和脂肪族氯化物在170175nm；饱和脂肪族溴化物在200210nm。当分子中含有硫、碘等电离能较低的原子时，汲取波长高于200nm（如CH3I的n*汲取峰在258nm）。*跃迁：

14、分子中含有双键、叁键的化合物和芳环及共轭烯烃可发生此类跃迁。孤立双键的最大汲取波长小于200nm（比如乙烯的max=180nm）。跟着共轭双键数增添，吸收峰向长波方向挪动。*跃迁的汲取峰多为强汲取，其值很大，一般状况下max4-1-110Lmolcm。n*跃迁：分子中含有孤对电子的原子和键同时存在并共轭时（如含C=O，C=S，-N=O，-N=N-），会发生n*。这种跃迁的汲取波长大于200nm，但汲取强度弱，一般低于100Lmol-1cm-1。因为一般紫外-可见分光光度计只好供应190850nm范围的单色光，所以，我们只好测量n*跃迁，n*跃迁和部分*跃迁的汲取，而对只好产生200nm以下汲取

15、的*跃迁则没法丈量。何谓助色团及生色团？答：生色团是指在2001000nm波长范围内产生特色汲取带的拥有一个或多个不饱和键和未共用电子对的基团。如C=C=，C=O、-N=N-、-CN、-CC-、COOH、-N=O等。假如两个生色团相邻，形成共轭基，则本来各自的汲取带将消逝，并在较长的波优点产生强度比原汲取带强的新汲取带。所谓助色团是一些含有未共用电子对的氧原子、氮原子或卤素原子的基团。如-OH，-OR，-NH2，-NHR，-SH，-Cl，-Br，-I等。助色团不会使物质拥有颜色，但引进这些基团能增添生色团的生色能力，使其汲取波长向长波方向挪动，并增添了汲取强度。五、计算题某金属离子X与R试剂形

16、成一有色配合物，若溶液中X的浓度为1.010-4mol/L。用1cm比色皿，在525nm处测得吸光度为0.400，计算此配合物在525nm处的摩尔吸光系数。解：由郎伯-比尔定律得A0.4004103(L.mol1.cm1)（答）bc11.01042称取维生素C0.05g溶于100ml的0.005mol/L硫酸溶液中，再正确量取此溶液2.00ml稀释至100ml，取此溶液于1cm汲取池中，在max为245nm处测得A值为0.551，求试样中维生素C的质量分数。（a=56Lg-1cm-1）解：设待测液中Vc的浓度为c,由郎伯-比尔定律得cA0.5519.8103(g/L)b561则样品中维生素C的

17、浓度为9.8103m(Vc)=0.49100/1000=0.049(g)故%（Vc）=0.049/0.05100=98(答)10020.49(g/L)3有一标准Fe3+溶液，浓度为6g.mL-1，其吸光度为0.304，而试样溶液在同一条件下测得吸光度为0.510，求试样溶液中Fe3+的含量（mg/L）。解：由郎伯-比尔定律得As=abs(1)Ax=abx(2)(1)/(2)并作数学变形得，Axs0.510610.06(g/mL)10.06(mg/L)(答）x0.304As4、在456nm处，用1cm比色皿测定显色的锌配合物标准溶液获取如表3-11所示数据：表3-11锌标准溶液吸光度测定数值表Z

18、n/g/mL2.004.006.008.0010.0A0.1050.2050.3100.4150.515（1）绘制工作曲线；解：（1）设未知液中锌的浓度为，依表中数据，用excel绘制工作曲线，得回归方程A=0.0515+0.001（2）已知未知液的吸光度A=0.260，由回归公式得A0.0010.2600.0010.05150.05155.03(g/mL)（答）5、用磺基水杨酸法测定微量铁。称取0.2160g的铁铵矾溶于水稀释至500mL,得铁标准溶液。按下表所列数据取不一样体积标准溶液，显色后稀释至同样体积，在同样条件下分别测定各溶液的吸光度如表3-12所示：表3-12铁标准溶液吸光度测定数值表V/mL0.002.004.006.0