中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究课件

1、中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究报告人：吴春燕学号：04328040专业：应用化学（化学生物学）导师：刘岚 副教授报告提纲 选题意义 国内外研究现状 研究思路 实验及讨论 结论选题意义 海洋真菌是海洋微生物的一个重要分支。从海洋真菌分离出的次级代谢物中约7080具有生物活性。 红树林内生真菌代谢产物包括生物碱类 (杂环生物碱、大环生物碱等)，大环内酯，环肽类，醌类，萜类，聚醚类，甾醇类，多糖类，不饱和脂肪酸等。从红树林内生真菌ZZF42已发现的代谢产物：1-甲基-咔啉N-甲基-1-甲基-咔啉吲哚-3-乙酸4-甲氧基-8-羟基-喹啉环-（苯丙-酪）二肽4-羟基-苯乙酸据此可看出

2、，红树林内生真菌F42能产生结构独特、骨架新颖并具有生物活性的代谢产物，而产物中被分离鉴定出的化合物还比较少，故该菌具有进一步研究的潜力。 培养菌种配制培养液200L接菌发酵40天收菌 菌体 晒干MO浸泡一个月MO提取物EA萃取5次EA提取物培养液：60下200L 5L 前期准备工作 重蒸溶剂、查阅文献等（07.1107.12）实 验 与 讨 论 菌株培养发酵（08.0108.03） 分离、鉴定代谢产物（08.0308.05）关于培养液中代谢产物的讨论 PE:EA=12 （体积比） 洗脱得到的组分经反复柱层析、薄层制备色谱纯化，得到:浅黄色粉末Rf 0.25 Rf 0.70 展开剂：EA展开剂

3、：10%MO-EA碘缸显色EI-MS环（苯丙-苯丙）二肽 环（甘-苯丙）二肽 1H NMR分析（溶于氘代DMSO）H 9.19(brs)H 6.816.83(d, J=8.1) 6.646.67(d, J=8.1) 如果真的存在环（苯丙-酪）二肽， 它为什么不能被EI检测出来？ EI源要求固、液态样品汽化后再进入离子源，因此不适合难挥发和热不稳定的样品。环（苯丙-酪）二肽：mp 291293难挥发化合物 APCI：大气压状态下进行的化学电离MS2：母离子和子离子的关系APCI-MS2分离、鉴定APCI-MS2 样品的（+）APCI全扫描质谱图 母离子m/z 311.1的二级全扫描质谱图 母离子

4、m/z 295.1的二级全扫描质谱图 母离子m/z 205.1的二级全扫描质谱图 环（苯丙酪）二肽的裂解途径关于菌体代谢产物中低极性部分的讨论 菌体：用甲醇浸泡甲醇提取物甲醇相正己烷相展开剂：20%EA-PE脂肪酸脂肪酸甘油酯GC-MS硫酸-甲醇甲酯化 红树林内生真菌ZZF42菌体代谢产物低极性部分 硫酸-甲醇酯化后的GC/MS总离子流色谱图结 论 红树林内生真菌ZZF42菌体的低极性代谢产物甲酯化后含有八种成分，分别为：-柏木烯、十四酸甲酯、十五酸甲酯、(9Z)-十六碳烯酸甲酯、十六酸甲酯、（9E，12E）-十八二烯酸甲酯、(9Z)-十八烯酸甲酯、十八酸甲酯。 一般认为，低极性部分 = 脂肪

5、酸/脂肪酸酯 可能还有其它物质，如萜类等。致 谢本论文是在导师刘岚副教授的悉心指导下完成的。刘老师对实验进展十分关注，从理论上和实践上给予了我非常深入细致的教导。是刘老师的信任和支持使我有了许多锻炼的机会，从学习灭菌接菌、过柱分离到核磁培训、测试、解谱，是刘老师的精心栽培使我的实验技术和科学素养都上升到一个新的高度。刘老师拥有渊博的专业知识，严谨的治学态度和勤奋踏实的科研作风，是我将来学习工作中的楷模。在此，衷心感谢刘老师对我的谆谆教诲和深切关怀！感谢林永成教授，佘志刚副教授，许芳师姐，马欢歌师姐，杨昌师兄，高俊平师兄，陈彬师兄，何永钊同学，王锋同学给予我的帮助，感谢天然室所有老师、师兄师姐、同学们对我的关心和帮助！本论文的大部分谱图是由中山大学测试中心的陆慧宁、周海云、姚骏骅老师完成的，在此对他们表示衷心的感谢。同时还要感谢学院中心实验室胡谷平老师的指导和帮助！本论文的研究得到第八届（2007学年）创新化学实验与研究基金项目的支持，在此表示感谢！感谢“创新化学实验与研究基金” 及在场的所有老师和同学们！我的报告到此结束！其 它 从培养液中分离，经反复柱层析、制备薄层色谱纯化，经高效薄层色谱分析，显示一个点的组分共有9个，但因量少，还未进行结构鉴定。拟继续培养真菌ZZF42，使代谢