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文档简介
1、一、非特异性免疫吞噬作用 示教溶菌酶实验 1个平板/组补体传统途径激活实验溶血实验 1份/组二、机体细胞免疫功能测定 1、E玫瑰花环实验 示教 2、淋巴母细胞转化实验示教1一、吞噬细胞及吞噬作用吞噬作用是指白细胞游出到炎症灶,吞噬病原体以及组织碎片的过程。完成此功能的吞噬细胞主要有两种,其吞噬异物的过程基本相同,但其结构和化学成分则有所不同。 中性粒细胞 巨噬细胞 2实验方法:中性粒细胞的吞噬作用金黄色葡萄球菌1-2ml,注入小白鼠腹腔内5小时后,解剖,腹腔液涂片,染色观察小吞噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的现象3实验方法:巨噬细胞的吞噬作用10%鸡红细胞悬液注入小白鼠腹腔内分别于1,6,24小时抽
2、取腹腔液涂片,染色观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象4二、溶菌酶试验溶菌酶是正常体液与分泌液中所含的一种低分子量的碱性蛋白质,主要来源于巨噬细胞,是天然免疫中一种重要的体液杀菌成分。肽聚糖是细菌细胞壁中的重要成分,溶菌酶能够水解肽聚糖从而使细菌溶解。细 革兰氏阳性:溶解 菌 革兰氏阴性:肽聚糖外面有一层脂多糖和脂蛋 白,一般情况下不受溶菌酶的影响。51、实验室准备: (1) 带菌平板的准备:处理好溶壁微 球菌加入琼脂内,到平板,冷凝备用。 (2)每平板打4个小孔,如图。123462、同学们操作步骤:清水漱口将唾液涂于空平板中用吸管吸出,按下图滴入孔内37过夜明天上午测量溶菌环的直径,记录分析741
3、23 PBS 阴性对照鸡蛋清 阳性对照3,4加入唾液标本8三、补体溶血实验原理:补体经过经典途径激活后产生溶解细胞等作用。 RBC(Ag) + 溶血素(Ab) + 补体 RBC溶解9方法10结果与判断红细胞溶解,液体变为红色透明(+)不溶解,液体均匀浑浊或有少量红细胞沉于管底(-)11四、E玫瑰花环形成实验实验原理T细胞表面标志CD2,即绵羊红细胞受体绵羊红细胞表面CD58可与CD2结合可用于T细胞的计数与分离12左:(甲紫染色,800):可见2个被绵羊红细胞包围而形成玫瑰环的T淋巴细胞;右:(吖啶橙染色):图中可见3个染成橙黄色荧光的T淋巴细胞被绵羊红细胞所包围。 T淋巴细胞玫瑰花环13实验结果凡能结合三个以上绵羊红细胞者为玫瑰花形成阳性细胞。正常人的花环形成率50-70%,大致可以代表周围血中T细胞的百分数。14五、T淋巴细胞转化实验T细胞受到特异性抗原或非特异性丝裂原刺激时,可发生转化。特异性抗原非特异性丝裂原:PHA、ConA等。正常人淋巴细胞受到PHA刺激后,其转化率为60-80%。15转化细
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