人参皂苷具有很高的抗肿瘤作用

1、人参皂苷具有很高的抗肿瘤作用肿瘤严重危害人类健康，目前肿瘤的主要治疗方法包括手术、放疗、化疗和生物治 疗。肿瘤化疗的目的在于通过化疗药物杀伤肿瘤细胞，促进肿瘤细胞的死亡或阻止其增 殖。但绝大多数药物其细胞毒性缺乏特异性，造成正常细胞的死亡，特别是增生活跃的 造血干细胞，导致骨髓移植及全身毒性等并发症，影响治疗效果和患者依从性。因而近 年来从天然药物中寻找高效低毒的抗肿瘤药物成为研究热点。人参皂苷 Rh2 是从人参中 提取的天然活性成分，众多研究表明，其具有很高的抗肿瘤活性，而对正常细胞无毒副 作用，与其它化疗药物(如顺铂)联合应用有协同作用。人参皂苷 Rh2 抗肿瘤机制非常 广泛，但主要通过调

2、控肿瘤细胞增殖周期、诱导细胞分化和凋亡来发挥抗肿瘤作用。将 肿瘤细胞诱导分化成正常细胞有利于控制肿瘤发展，诱导肿瘤细胞凋亡使细胞解体后形 成凋亡小体，不引起周围组织炎症反应。人参皂苷 Rh2 也可以通过调节和增强机体免疫 功能，发挥其抗肿瘤作用。1、人参皂苷Rh2对人肝癌细胞SMMC-7721的诱导分化作用。曾小莉等以MTT法、光镜、电子显微镜观察人参皂苷Rh2对SMMC-7721细胞增殖、 形态、超微结构的影响。用免疫组化染色和ELISA法检测细胞浆中甲胎蛋白 (alpha-fe to pro tein,AFP )合成情况，酶促反应试剂盒检测细胞浆中碱性磷酸酶 (alkaline phosp

3、hatase,ALP)和丫 谷氨酰转肽酶(Y -glutamyltranspeptidase, Y -CT)活性，放射免疫法检测细胞AFP和白蛋白(albumin,Alb)分泌量，并观察人参皂 苷 Rh2 对以上指标的影响。结果表明人参皂苷 Rh2 以时间依赖性和浓度依赖性抑制 SMMC-7721细胞增殖，10p g/ml人参皂苷Rh2作用6天抑制率达50%；而20p g/ml人 参皂苷Rh2作用4天抑制率近50%。经20p g/ml人参皂苷Rh2作用4天，肝癌细胞形 态及亚细胞结构向正常肝细胞方向逆转。10p g/ml、20p g/ml人参皂苷Rh2作用 SMMC-7721 细胞后， AFP

4、 合成明显下降；分泌量从6.600.30 下降到 2.350.06； Y -CT 及耐热型 ALb 活性显著降低； ALP 活性及 ALb 分泌量显著升高。2、人参皂苷 Rh2 对人肝癌 Bel- 7404 细胞增殖和凋亡的影响。南华大学附属第一医院姜浩、樊光华采用 MTT 比色法观察人参皂苷 Rh2 对体外培养 的 Bel-7404 细胞生长的抑制作用；应用流式细胞仪检测凋亡细胞和细胞周期变化；采 用免疫组化S-P法检测药物处理前后凋亡相关基因产物P 53、Bax 和 Bcl-2 蛋白表达。结果显示， Bel-7404 细胞经人参皂苷 Rh2 作用后生长受抑 制，呈剂量依赖性和时间依赖性，半

5、数抑制浓度(IC50)为27. 6p g/ml。流式细胞仪检 测证实，人参皂苷Rh2能诱导Bel-7404细胞凋亡。当人参皂苷Rh2浓度由12. 5p g/ml 增加至50. 0p g/ml时，细胞凋亡率(AR)依次升高；但人参皂苷Rh2浓度进一步增 加时，AR未见相应升高。人参皂苷Rh2可将细胞周期阻滞于G1期。人参皂苷Rh2处理 细胞后，突变型P 53表达下调而Bax表达上调，Bcl-2在人参皂苷Rh2处理前后无明显 变化。3、人参皂苷 Rh2 对 C6 胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。李殿友等采用细胞计数法检测细胞增殖，流式细胞仪分析细胞周期和凋亡。结果发 现，人参皂苷Rh2 2，4

6、，8p mol/L对C6胶质瘤细胞有增殖抑制作用，且呈明显量效 关系；人参皂苷Rh2作用72h后，4p mol/L浓度对C6胶质瘤细胞诱导凋亡作用最为明 显；人参皂苷Rh2作用后，G0/G1期细胞百分率明显下降，而S期细胞百分率显著增加。 表明人参皂苷Rh2对C6胶质瘤细胞有明显的增殖抑制和诱导凋亡作用，且这种作用有 周期特异性。4、人参皂苷Rh2对食管癌细胞Eca-109周期的影响。河北医科大学李丽、齐凤英应用MTT法测定人参皂苷Rh2对细胞的生长抑制作用， HE染色后光镜观察细胞形态变化，应用免疫细胞化学和Wes tern blot检测细胞周期调 控因子cyclinE，CDK2,p 21W

7、AF1基因蛋白表达，采用半定量RT-PCR检测基因mRNA 表达。结果发现，人参皂苷Rh2对Eca-109细胞生长有抑制作用，并呈剂量、时间依赖 性。20p gml-1人参皂苷Rh2作用1 d后细胞达到半数抑制，作用3 d的Eca-109 细胞较对照细胞数目明显减少，细胞形态向正常细胞方向逆转。细胞周期分析显示，随 着人参皂苷Rh2药物剂量的增加，G0/G1期细胞数逐渐增加，S和G2/M期细胞数逐渐减 少，10p gml-1和20p gml-1人参皂苷Rh2处理组和对照组比较有显著性差异。 20p gml-1人参皂苷Rh2处理细胞后，随着作用时间延长，cyclinE和CDK2蛋白及 其mRNA

8、表达水平逐渐增高，而P21WAF1蛋白及其mRNA表达水平逐渐降低。结论：人 参皂苷Rh2可以将人食管癌细胞Eca-109阻滞于G0/G1期，诱导肿瘤细胞分化，并且通 过影响细胞周期调控因子cyclinE，CDK2, p 21WAF1基因的表达抑制食管癌细胞的增殖。5、人参皂苷Rh2联合顺铂应用对人喉癌细胞Hep-2的作用。徐洪君等将体外培养的喉癌细胞Hep-2分别加入终浓度为0.5、1.0、2.0、5.0p g/m 1的顺铂（DDP）、终浓度为10、20、30、40p g/m 1的人参皂苷Rh2，以及终 浓度为20p g/m 1的Rh2分别联合终浓度为0.5、1.0、2.0、5.0p g/m

9、 1的DDP， 设空白对照组，待药物作用48小时后，分别用光学显微镜、MTT法、流式细胞仪（Flow cytometry, FCM）、荧光显微镜检测培养细胞的作用效果。结果在光镜下可见正常喉癌 细胞生长密集。细胞呈梭型或多角型，细胞彼此之间相接触。在低剂量Rh2组和DDP 组，可见细胞数量略减少，细胞形态无明显改变。在高剂量Rh2组和DDP组，细胞数量 明显减少，可见细胞碎片。而低剂量Rh2和低剂量DDP联合应用后，可获得与高剂量 Rh2组和DDP组相同的效果。MTT结果显示Rh2、DDP单独应用和联合应用都呈剂量依赖 性增加抑制喉癌细胞的生长。低剂量Rh2和低剂量DDP联合应用，可明显抑制喉

10、癌细胞 生长。FCM显示Rh2和DDP单独应用，可诱导细胞凋亡，而联合应用可获得较单独应用 更为明显的诱导细胞凋亡效应。吖啶橙染色显示各用药组均可见细胞胞膜出芽、染色质 凝集、核片段化及凋亡小体等典型的细胞凋亡特征。可见，人参皂苷Rh2及DDP均可诱 导喉癌细胞凋亡，二者联合应用后呈现出协同作用，可发挥更为明显的抗癌作用，因此 可相应减少DDP用量，从而降低毒副作用。6、人参皂苷 Rh2 对肺腺癌耐药细胞促凋亡作用的研究。中南大学湘雅医院胡硕等用MTT法分别检测顺铂和Rh2对A549细胞、A549 DDP 细胞的抑制率（IC）。将Rh2作用于A549 DDP细胞，Hoechst 33258染色

11、荧光显微镜下 观察细胞核形态，流式细胞仪检测细胞跨膜电位（屮）。结果发现顺铂对A549细胞、 A 549 DDP 细胞的 IC50 分别为 24p mol/l、325p mol/l，耐药指数为 13.54。Rh210 M mol/l时，对A549 DDP细胞有明显抑制作用，且与Rh2的浓度有一定的依赖关系。 Rh2作用后A549 DDP细胞核缩小或变形，荧光成团块分布，有凋亡小体形成；细胞线 粒体跨膜电位显著性降低（P 0.01） o结论：Rh2能促使A549 DDP细胞凋亡。7、人参皂苷Rh2体外对小鼠黑色素瘤细胞的分化诱导作用。夏丽娟、韩锐以小鼠黑色素瘤B16细胞为模型，研究了人参皂苷Rh

12、2对B16细胞的 分化诱导作用，结果表明，Rh2在10mg/l浓度下，对B16细胞有较强的分化诱导作用， 表现为黑色素生成能力明显增加；形态向正常上皮样细胞分化；细胞呈网状结构；黑色 素颗粒增加；生长变缓慢。酪氨酸是黑色素合成的限速酶，控制黑色素的合成，用 10mg/l 浓度的Rh2作用细胞，4 d后酪氨酸活力明显升高，与黑色素生成能力成正比，说明Rh2 可诱导B16细胞向正常色素细胞分化。8、人参皂苷Rh2注射液对荷肝癌(H22)小鼠免疫功能的影响。大连市中医研究所葛迎春等以荷肝癌(H22)小鼠为实验模型，观察人参皂苷Rh2 注射液对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素、NK细胞毒活性和

13、IL-2免疫指 标的影响。结果表明，人参皂苷Rh2注射液能提咼荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能和 促进荷瘤小鼠血清中羊红血球抗体生成。NK细胞是细胞免疫中非特异部分，荷肝癌 (H22)模型组小鼠的NK细胞活性处于严重低下状态，而人参皂苷Rh2注射液高、中剂量 组与荷瘤组比较NK细胞杀伤活性有明显增强。IL-2主要是由活化的辅助性T淋巴细胞 产生的细胞因子，IL-2具有自身正向免疫调节作用，但在大多数荷瘤机体，IL-2系统 处于明显的抑制或紊乱，荷瘤小鼠的IL-2活性低于正常组，而人参皂苷Rh2注射液高 剂量组显著提高IL-2活性。人参皂苷Rh2注射液通过调节和增强机体免疫功能，发挥 其抗肿瘤作用。综上所述，人参皂苷Rh2可以通过调控肿瘤细