实验动物生物安全市公开课金奖市赛课一等奖课件

1、试验动物生物安全第1页/10/10试验动物中心2医学试验动物学主讲：王晓斌联络 方式MAIL:15481341第2页引 言试验动物：指经人工喂养、繁育，对其携带微生物及寄生虫实施控制，遗传背景明确或者起源清楚，应用于科学研究、教学、生产和检定以及其它科学试验动物。如大白鼠、小白鼠、裸鼠、豚鼠、家兔、比格犬、恒河猴、小型猪等。第3页KM小鼠C57小鼠裸 鼠SD大鼠新西兰兔Hartely豚鼠第4页引 言试验用动物试验动物野生动物观赏动物经济动物第5页试验动物是从事科学研究、教学、生产、检定主要支撑条件，广泛应用于医药研发、教学试验、生物检定等方面。试验动物为人类健康和社会

2、进步作出了巨大贡献。引 言第6页引 言全国一年繁殖试验动物约1300万只，实际用量在1000万只左右。试验动物在生产、使用过程中，存在感染、繁殖病原体可能以及向环境扩散危险，对人和环境产生生物安全问题。 第7页引 言1999年北京某试验室曾发生试验人员感染流行性出血热事件。事件起因就是操作人员被携带病毒试验动物抓咬伤而受感染引发。第8页引 言长春市某高校中药系试验室发生学生感染流行性出血热事件，76名学生中有10名学生受感染。整个事件起因也是因为试验操作过程中被动物抓咬伤而造成。第9页引 言3月法国食品卫生安全署(Afssa)科学家，在试验室中对动物病体进行试验研究时。意外感染致命性炭疽病菌，

3、受感染5名人员被紧急隔离至医院监控以及治疗。 第10页引 言 试验动物生物安全已引发国、内外高度重视。我国实施新版试验动物国家标准，其中要求：试验用大小鼠等级提升到SPF级;年北京市试验动物管理条例，修改和增加了试验动物生物安全方面内容;20第二届北京试验动物科学国际论坛上，日本国立大学生物安全委员会委员长佐藤浩教授提出，生物安全已成为试验动物研究中不容忽略主要原因。 第11页试验动物生物安全是对试验动物可能产生潜在风险或现实危害防范和控制。由试验动物造成各种风险和危害包含： 生产和使用试验动物中各个步骤，如试验动物引种、保种、繁育、运输、进出口，使用试验动物(包含感染和非感染试验动物)进行动

4、物试验、从事科研活动等过程中试验动物造成各种危害。 引 言第12页试验动物生物安全条件与保障国家、地方法律、法规合格试验动物与设施严格、标准化操作废弃物正确处理引 言第13页国家或地方试验动物主要法规、标准1、试验动物管理条例（1988）2、试验动物质量管理方法（修订版）（） 3、试验动物许可证管理方法（试行）（国家：、江苏省：）4、试验动物种子中心管理方法5、省级试验动物质量检测机构技术审查准则第14页国家或地方试验动物主要法规、标准6试验动物微生物等级及监测7试验动物寄生虫等级及监测8试验动物环境及设施9哺乳类试验动物遗传质量控制10试验动物配合饲料通用质量标准11试验动物配合饲料卫生标准

5、第15页国家或地方试验动物主要法规、标准 试验动物生产许可证 第16页 试验动物使用许可证 国家或地方试验动物主要法规、标准第17页国家或地方试验动物主要法规、标准江苏省试验动物管理条例：第四章： 生物安全与试验动物福利第二十二条 试验动物发生传染性疾病时，从事试验动物生产、使用单位和个人应该及时采取隔离、预防控制办法，预防动物疫情扩散，同时汇报当地畜牧兽医主管部门、动物防疫监督机构；当发生人畜共患病时，还应该马上汇报当地疾病预防控制机构。 第18页试验动物分为四级：一级为普通级；二级为清洁级；三级为无特定病原体（SPF）级；四级为无菌级（包含悉生动物）。当前比格犬、恒河猴、小型猪等大动物多为

6、普通级，大、小鼠、裸鼠均为清洁级、SPF以上，豚鼠、家兔等现有普通级，又有清洁级、SPF级。试验动物设施分为三级：一级为普通系统；二级为屏障系统；三级为隔离系统。试验动物及其设施等级第19页隔离系统(Insulation system) 是以隔离器(Isolator)为主体及其从属装置组成喂养系统。用作喂养无菌动物和已知菌动物。 屏障系统(Barrier system) 这是清洁级、SPF级动物生产或试验设施。人、试验动物、饲料、饮水、垫料、空气及其它物品均需进行严格微生物控制。 普通系统(Open system) 只能进行普通级试验动物生产与试验。试验动物及其设施等级第20页试验动物及其设施

7、等级不一样等级动物及其设施：必须由省级试验动物监测机构监测合格，发放“试验动物质量监测保合格证或设施合格证”。试验中所用动物必须为质量合格动物。第21页试验动物及其设施等级隔离环境以隔离器(Isolator)为主体及其从属装置组成喂养系统。用作喂养无菌动物和已知菌动物。洁净度到达一百级。第22页试验动物及其设施等级隔离环境动物设施主要指标洁净度：100级（空气三级过滤后，加隔离器）温 度：生产设施为20-26，试验设施为20-25日温差：生产4，试验3相对湿度：40-70%压强梯度：100-150Pa换气次数：20-50次/h；气流速度：0.1-0.2m/s落下菌数：0个/皿;氨浓度：14ng

8、/m3第23页屏障环境 主要用于进行SPF级、清洁级大鼠、小鼠、裸鼠等小动物试验（配置喂养室及操作室）。屏障系统(Barrier system) 这是喂养SPF动物设施。人、试验动物、饲料、饮水、垫料、空气及其它物品均需进行严格微生物控制。送入空气需经初、中、高效三级过滤，洁净度到达10000级，饲料、饮水、垫料经灭菌后方可使用。试验动物及其设施等级第24页屏障系统通行路线图第25页在屏障设施内一切操作要实施严格微生物控制，因为屏障系统内要长久喂养SPF动物,保持不被污染，而人员、物品要经常出入,其中人员又不能彻底灭菌,所以人是最大可能污染源，所以，对人员要求要尤其严格，要有严密操作细则。第2

9、6页试验动物及其设施等级屏障环境（正压）动物设施主要指标洁净度：10000级（空气经过初、中、高效三级过滤）温 度：生产设施为20-26，试验设施为20-25日温差： 生产4，试验3相对湿度：40-70%压强梯度：20-50Pa换气次数：10-20次/h；气流速度：0.1-0.2m/s落下菌数：3个/皿;氨浓度：14ng/m3第27页试验动物及其设施等级屏障环境动物试验设施设备第28页试验动物及其设施等级屏障环境动物试验设施设备第29页 试验动物及其设施等级屏障环境动物试验设施设备第30页普通环境 主要用于进行兔、猫、狗、猴等大动物试验喂养（配置喂养室及操作室）。试验动物及其设施等级第31页试

10、验动物及其设施等级普通环境动物设施主要指标洁净度：-温 度：生产设施为16-28，试验设施为16-26日温差： 试验4相对湿度：40-70%压强梯度：-换气次数：8-10次/h；气流速度：0.1-0.2m/s落下菌数：30个/皿;氨浓度：14ng/m3第32页试验动物及其设施等级普通环境动物试验设施设备第33页试验动物及其设施等级普通环境动物试验设施设备第34页 包括传染性、中毒性、放射性、致癌性、致突致畸及致死性试验等应在有特殊要求生物安全试验室中（负压）进行，应依据生物安全防护要求进行建筑或改造，按照相关要求执行。WHO将动物生物安全试验室分为四级：动物生物安全试验室一级(ABSL-1)

11、动物生物安全试验室二级(ABSL-2) 动物生物安全试验室三级(ABSL-3) 动物生物安全试验室四级(ABSL-4) 试验动物及其设施等级第35页试验动物及其动物试验操作试验动物生产生物安全： 试验动物生产过程中，对试验动物可能造成各种风险和危害防范和控制。 试验动物生产，包含试验动物引种、保种、繁育、运输、进出口等过程。 定时进行严格微生物指标监测。第36页试验动物引种：试验动物种子起源于国家试验动物保种中心，遗传背景清楚，质量符合国家标准。 试验动物保种和繁育：必须由国家或行业主管部门认可单位进行。试验动物及其动物试验操作第37页适合用于SPF/无菌动物喂养或运输试验动物运输：运输试验动

12、物时，所使用转运工具和笼器具，应该符合所运试验动物微生物和环境质量控制标准。不一样品种、品系、性别和等级试验动物，不得在同一笼盒内混合装运。试验动物及其动物试验操作第38页试验动物及其动物试验操作试验动物使用生物安全：动物及喂养要求:1、引进动物进行试验必须具备试验动物质量合格证,试验前隔离检疫1-6天。2、坚持卫生消毒制度：定时对动物室、操作室和喂养用具进行消毒。3、喂养管理人员要定时做健康检验。第39页试验操作要求：动物试验人员试验操作过程中做好防护，穿戴好工作衣、帽、口罩、手套;严格按标准操作规程进行。 试验动物及其动物试验操作第40页试验动物及其动物试验操作屏障环境标准操作规程SPF级

13、动物试验室管理责任SPF级动物试验室工作人员职责SPF级动物试验室人员进出标准操作规程SPF级动物试验室物品进出标准操作规程SPF级动物试验室动物进出标准操作规程使用SPF级动物试验室标准操作规程SPF级试验动物购置标准操作规程SPF级试验动物接收和检疫标准操作规程第41页试验动物及其动物试验操作屏障环境标准操作规程SPF级动物试验室试验动物饲料、饮水、垫料管理标准操作规程SPF级试验动物抓取和保定标准操作规程SPF级试验动物逃脱处理标准操作规程SPF级试验动物死亡和伤病处理标准操作规程高压蒸汽灭菌器使用与维护标准操作规程传递窗使用与维护标准操作规程渡槽使用与维护标准操作规程第42页试验动物及

14、其动物试验操作屏障环境标准操作规程SPF动物室照明及紫外线设备使用与维护标准操作规程消毒灭菌方法标准操作规程SPF动物试验室日常管理标准操作规程屏障系统日常卫生与消毒标准操作规程空调净化系统使用与维护标准操作规程SPF动物试验室净化标准操作规程SPF级动物试验室内环境监控标准操作规程SPF级动物试验室试验动物笼子标识标准操作规程第43页试验动物及其动物试验操作普通环境标准操作规程普通级试验动物设施管理责任标准操作规程使用普通动物试验室标准操作规程试验动物重新进入普通级动物室标准操作规程普通级试验动物、饲料、饮水、垫料购置及管理普通级动物室人员保健和安全标准操作规程普通级动物室试验动物接收标准操

15、作规程普通级动物室试验动物和物资进出管理标准操作规程普通动物室抓取动物标准操作规程第44页试验动物及其动物试验操作普通环境标准操作规程普级级试验动物逃脱、死亡和伤病处理标准操作规程进入普通级动物试验室内人员管理标准操作规程普通级动物室环境监控标准操作规程普通级动物室笼具和其它辅助设备管理标准操作规程普通级动物室环境卫生管理标准操作规程普通级动物室试验动物笼子标识标准操作规程试验用Beagle狗喂养标准操作规程试验用兔喂养标准操作规程试验用豚鼠喂养标准操作规程第45页试验动物及其动物试验操作 不一样品种、不一样等级和互有干扰动物试验，不得在同一试验间进行喂养，同一起源、相同品种、品系而用于不一样

16、试验目标动物试验喂养，标准上也不得在同一试验间进行。 不得将普通级动物带进屏障环境中进行试验，如将试验动物带离屏障环境进行试验，须经过严格包装、灭菌处理，不然不得再带回屏障环境中进行喂养、试验。第46页试验动物及其动物试验操作在进行试验时，为了不损伤动物健康，不影响观察指标，并预防被动物咬伤，首先要限制动物活动，使动物处于平静状态。试验人员必须掌握合理抓取固定方法,掌握熟练动物试验操作技术。第47页试验动物及其动物试验操作 试验动物误伤处理试验动物咬伤救治在伤口上方扎止血带，然后用高猛酸钾或双氧水冲洗伤口，并用5石炭酸或硝酸烧灼腐蚀伤处。伤口若比较大或自己不好处理，最好去医院处理。 同时二十四

17、小时内到防疫站注射疫苗（如狂犬疫苗、流行性出血热疫苗，等）。 第48页标本处理： 动物血液及组织标本马上按试验要求进行分离、冻存或固定等处理后存放。动物试验标本及废弃物处理第49页动物试验标本及废弃物处理试验动物使用各种废弃物可按医疗废物分类目录进行对应分类，并严格按照医疗废物管理条例要求进行处理。依据试验动物使用废弃物特征可分为感染性废弃物：如被动物血液、体液污染物品 病理性废弃物：试验动物尸体等废弃物 损伤性废弃物：废弃锐器。 药品性废弃物：变质或者被污染废弃药品 化学性废弃物：含有毒性、腐蚀性、易燃易爆性 废弃化学物品第50页动物试验标本及废弃物处理试验动物使用废弃物搜集将试验动物使用废

18、弃物分置于动物废弃物专用包装物、或者容器内。分类搜集。盛装试验动物使用废弃物每个包装物、容器外表面应该有警示标识，注明：单位、日期、类别等。废弃物经包装、密封后存放于暂时贮存设施，不得露天存放；暂时贮存时间不得超出天，由医疗废弃物处理专门机构统一运输、处理。第51页动物试验标本及废弃物处理试验动物使用废弃物暂时贮存设施、设备要求：远离人员活动区和生活垃圾存放场所，方便试验动物使用废弃物运输人员及运输工具、车辆出入。有严密封闭办法，设专（兼）职人员管理，预防非工作人员接触动物废弃物。有防渗漏、防雨水冲刷、防阳光直射、防蚊蝇、防蟑螂、防盗以及预防儿童接触等安全办法。易于清洁和消毒。第52页动物试验

19、标本及废弃物处理如需暂时贮存病理性废弃物，则应该具备低温贮存或者防腐条件。设有显著动物废弃物警示和“禁止吸烟、饮食”标识。病原体感染性动物试验废弃物，需经过高压或消毒液初步处理后再分装搜集、再统一由医疗废弃物处理专门机构运输后深入处理。第53页1、人畜共患病毒性疾病：流行性出血热、埃博拉病毒感染、马堡病毒疾病、淋巴性脉络丛脑膜炎病毒感染、灵长类痘病毒病、麻疹、鸡新城疫、A型肝炎、猴免疫缺点综合征、狂犬病、流感、节肢动物携带性病毒感染。2、人畜共患立克次氏体病：Q热、猫抓热。附：主要人畜共患病第54页附：主要人畜共患病3、人畜共患细菌性疾病： 李斯特菌、猴结核病、鸚鹉热、鼠咬热、鼠疫、布氏杆菌病

20、、钩端螺旋体病、沙门氏菌病、志贺氏菌病、肠炎耶森氏菌病。4、人畜共患病原虫性疾病：弓形虫病、黎形虫病、隐孢子虫病、阿米巴原虫病、大肠纤毛虫病。第55页 1、病原体：汉坦病毒。 传染源带病毒黑线姬鼠和褐家鼠，试验大鼠也偶然传输。 2、传输路径污染尘埃飞扬形成气溶胶吸入感染。带病毒血、尿污染人皮肤破损处，也使人患病。（一）流行性出血热（肾综合征出血热HFRS）第56页3、易感者人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔。4、症状潜伏期14天；动物无显著症状；人感染后出现高热、出血、休克、肾功效受损和循环衰竭，严重者死亡。（一）流行性出血热（肾综合征出血热HFRS）第57页（二）淋巴细胞性脉络丛脑膜炎1、传染源淋巴细

21、胞性脉络丛脑膜炎病毒。带病毒野小鼠或试验小鼠为传染源。2、传输路径带病毒小鼠分泌物、排泄物污染，吸血昆虫传输，胎盘垂直传输。第58页3、易感者人、小鼠、猴、豚鼠、大鼠、地鼠、兔、狗、鸡等。4、症状人感染后表现类似流感样症状，有三种表现：大脑型、内脏型、迟发型。（二）淋巴细胞性脉络丛脑膜炎第59页试验动物福利 动物福利（animal welfare）是指人为提供给动物对应物质条件和采取行为方式，确保动物在健康舒适状态下生存，使动物处于生理和心理愉快感受状态。 1822年，英国“人道主义者”马丁提出禁止虐待动物议案，这项法案就叫马丁法（Martin Act）。第60页试验动物福利到了19世纪末开始以后，试验动物福利成了人们关注焦点，各个国家相关法律和条款相继颁布。美国联邦政府1966年颁布动物福利法，正是在这种