烟草青枯病土壤微生物数量及生理群的测定

1、烟草青枯病土壤微生物数量及生理群的测定 结果表明：青枯病重发丘块四季中细菌和真菌平均数多、放线菌平均数少；轻发丘块则细菌和真菌平均数少、放线菌平均数多。 测定的7种微生物生理群中，青枯病重发丘块四季中硝酸细菌和反硫化细菌平均数少、反硝化细菌平均数多，轻发丘块则硝酸细菌和反硫化细菌多、反硝化细菌平均数少。 从不同季节来看，重度发病地块春季细菌数最多，夏季硝酸细菌少。 关键词： 烟草 青枯病 土壤微生物 生理群 经调查发现烟草青枯病发生危害时，在其他栽培条件相同的情况下，同一类型稻田土或旱土的不同地块，或同一地块不同地段的烟地，青枯病发生危害轻重不同，其原因是否与土壤中微生物群落有关。这项工作以往

2、很少有人研究。 本研究试图通过对烟草青枯病不同病情的土壤进行微生物数量及组成分析，为筛选烟草土壤中青枯病菌拮抗微生物奠定基础，为深入开展烟草青枯病生物防治研究提供理论依据。 材料和方法 土壤来源：选择了湖南省郴州市桂阳县仁义乡汪山村烟草青枯病常发旱地（黄壤土）2.5公顷，栽植烤烟品种k326，采用五点取样法，在病害发生最多时调查一次，烟叶采收后调查一次。 确定面积0.083公顷,青枯病病指53.6(1号土壤);面积0.073公顷;青枯病病指34.5(2号土壤);面积0.08公顷，青枯病病指11.2(3号土壤)为取土来源，分春（3月中旬）、夏（6月中旬）、秋（10月中旬）、冬（12月中旬）四个季

3、节取土分析。 培养基 细菌用牛肉汁蛋白胨琼脂放线菌用高氏号琼脂真菌用马丁氏琼脂固氮菌用改良阿须贝琼脂亚硝酸细菌用改良斯蒂芬逊培养液硝酸细菌用亚硝酸盐培养液反硝化细菌采用柠檬酸培养液硫化细菌采用低亚硫酸盐培养液反硫化细菌采用有机氮源培养液化学试剂 孟加拉红，链霉素，重铬酸钾，对氨基苯磺酸，萘胺、二苯胺、KI、HgI2、KOH、Bacl2、等均为分析纯。测定方法细菌、放线菌、真菌、固氮菌、纤维素解菌的总数测定采用平板菌落计数法。亚硝酸细菌和硝酸细菌应用稀释法：取10-310-7等5个稀释度，每个稀释度3个重复，每管接土壤悬液1毫升，在25-28下培养1014天，用格利斯试剂、 测定NO2-，用二苯

4、胺试剂测定NO3-。反硝酸细菌应用稀释法：取10-310-7等5个稀释度，每个稀释度3个重复，每管接土壤悬液1毫升，在28-30下培养14天，用萘氏试剂测定NH3。用格利斯试剂检查NO2，检查杜氏小管有无气泡测定N2。硫化细菌应用稀释法：取10-310-7等5个稀释度，每个稀释度3个重复，每管接土壤悬液0.5毫升，在28-30下培养15天，用1%BaCl2溶液测定SO42-是否存在。反硫化细菌应用稀释法：取10-310-7等5个稀释度，每个稀释度3个重复，每管接土壤悬液0.5毫升，在28-30下培养14天，检查有无黑色FeS沉淀。 结果与分析 土壤主要微生物种类和数量三种烟草土壤中主要微生物种

5、类有细菌、放线菌和真菌。它们在土壤中的数量，在1、2、3号土中细菌最多，真菌次之，放线菌再次。三种土壤比较，细菌平均数以1号土最多，2号和3号土中细菌平均数相差不大，放线菌平均数以3号土最多，1、2号较多，且差异小，真菌平均数以1号土最多，2号次之，3号最少（见表1）。不同季节三种烟草土壤中细菌、放线菌、真菌数量变化1号土春、夏、秋、冬四季细菌均最多，数量稳定。放线菌春、冬季较多，夏、秋季较少，真菌以夏季最多，春秋冬季少，数量稳定。2号土春夏秋冬细菌均最多，放线菌春冬季较多。真菌以夏季最多，冬季次之，春、秋季少。3号土春夏秋冬细菌均最多，放线菌春冬季较多，春夏秋冬四季真菌较少（见表2）。烟草土

6、壤中主要微生物生理群及其数量 经测定在1、2、3号烟草土壤中均有纤维素分解菌、亚硝酸细菌、硝酸细菌、反硝化细菌、硫化细菌、反硫化细菌。在1、2、3号土中均未检测到好气性固氮菌。纤维素分解菌平均数量以3号土最多，其次是1号土、2号土最少亚硝酸细菌平均数量1号和3号土居多，2号土比1号和3号土少二分之一；硝酸细菌平均数以3号土最多，其次为2号土，1号土较少；反硝化细菌平均数以1号土最多，其次为2号土，3号土较少；硫化细菌平均数以2号土最多，其次是1号土，3号土较少；反硫化细菌平均数以3号土较多，2号土次之，1号土较少（见表3）。微生物生理群数量季节性变化纤维素分解菌和反硫化细菌1、2、3号土中的数

7、量周年无变化亚硝酸细菌夏冬两季在1、3号土中最多硝酸细菌夏季2、3号土中最多反硝化细菌和硫化细菌春季在1、2、3号土中均最多硫化细菌春夏两季在1、2、3号土中也最多除此以外,各种微生物在各季节1、2、3号土中其数量变化小（见表4）。 微生物生理群数量差异纤维素分解菌和反硫化细菌无差异亚硝酸细菌数量1、3号土相同，且多于2号土硝酸细菌数量2、3号土相同，比1号土多，反硝化细菌1、2号土相同，且较多于3号土硫化细菌数量1、2、3号春夏季相同，秋冬季略有差异（见表4）。小结与讨论在测定的四个季节感染青枯病的烟草土壤中的微生物的平均数中, 1、2、3号土发病由重到轻，细菌、真菌平均数依次由多到少，放线菌平均数则由少到多 从不同季节来看，重度发病地块春季细菌数最多，烟草青枯病严重，这可能与春季雨水多，土壤湿润，气候适宜，有利于青枯病侵入放线菌多数种类能产生抗菌素，抑制细菌生长，不利病害发生，如春季轻度发病地块放线菌较多，病害较轻。测定的7种微生物生理群中发病由重到轻，硝酸细菌和反硫化细菌四季的平均数由少到多反硝化细菌平均数则由多到少土壤中硝酸细菌多表明土壤通气性良好、铵态氮较多反硝化细菌多的表明土壤中硝酸盐多、土壤通气性差，不利于好气性微生物生长发育 不同土壤中微生物生理群数量季节性变化：