许钟麟 空气洁净技术与消毒灭菌的验证

1、空气洁净技术与消毒灭菌的验证许钟麟工作室9/15/20221一、消毒与灭菌之不同消毒： 用物理或化学方法杀死部分真菌、细菌繁殖体和部分病原微生物，但不一定杀死芽孢。灭菌： 杀死包括芽孢在内的所有微生物。9/15/20222二、在药厂消毒、灭菌的对象人体物件、表面空气9/15/20223三、主要消毒、灭菌方法人体： 手消毒、穿无菌服。物体、表面： 化学药剂消毒，一定要一种以上。 无法消毒的地方也可以烟熏 湿热灭菌 干热灭菌（进入空气要通过高效） 辐射灭菌（考虑对象是否适用，紫外不接受） 环氧乙烷灭菌（其他办法不能用时） 过滤灭菌（无法在最终容器灭菌时）9/15/20224三、主要消毒、灭菌方法（

2、续）空气见下表1 ：消毒方式消毒原理消毒效率单区静电高压电场形成电晕，产生自由电子和离子，因碰撞和吸附到尘菌上使其带电，在集尘极上沉积下来被除去。对较大颗粒和纤维效果差，会引起放电。优点是能清除尘菌而阻力小，缺点是清洗麻烦、费时，必须有前置过滤器，可能产生臭氧和氮氧化物，可形成二次污染。50%（某些产品测试只有20左右）等离子气体在加热或强电磁场作用下产生高度电离的电子云，其中活性自由基和射线对微生物有很强的广谱杀灭作用。无法去除尘粒。66.7负离子在电场、紫外、射线和水的撞击下使空气电离而产生，68.20%可吸附尘粒等变成重离子而沉降，缺点是有二次扬尘，在空调系统中用处不大。苍术熏中药73.

3、40%9/15/20225三、主要消毒、灭菌方法（续）消毒方式消毒原理消毒效率纳米光催化75% （某些产品测试结果只有30几，甚至出现负值）在日光、紫外照射下，催化活性物质表面氧化分解挥发性有机蒸气或细菌，转化为CO2和水。要求被消毒空气必须与催化物质充分接触，要一定时间，随表面附尘效果大减，一定要有前置过滤器。紫外照射还产生臭氧。实验中甚至出现负值。甲醛熏化学药剂，已宣布致癌77.42%紫外照应用于空调系统由于空气流速高，细菌受照剂量小，效果差，只能除菌不除尘，有臭氧发生。WHO、欧盟GMP都宣布其为通常不被接受的方法，更不能作最终灭菌。82.90%电子灭菌灯物理方法85%双区静电电离极和集

4、尘极分开90%（某些产品测试只有约60）9/15/20226三、主要消毒、灭菌方法（续）消毒方式消毒原理消毒效率臭氧淡蓝色气体，较强氧化作用，其分解产生的氧原子可以氧化、穿透细菌细胞壁而杀死细菌。广谱杀菌但不能除尘，室内必须无人，损坏多种物品，对表面微生物作用小。对人的呼吸道有危害。报导不主张用。91.82%物理阻隔方法，常规风口上使用阻力仅10Pa上下，是粗效的1/3，但效率达高中效（对0.5m微粒效率达7080以上）重量轻，安装方便，无二次污染9298超低阻高中效过滤器高效过滤器物理阻隔，无副作用，一次性，卫生部消毒规范指出洁净室空气灭菌只用空气净化过滤方式。阻力大见下表29/15/202

5、27三、主要消毒、灭菌方法（续）年份菌种大小m效率600.010.01299.999（0.1m/s滤速）66199.999（0.2m/s滤速）0.0940.1799.97（0.3m/s滤速）199.9993（0.3m/s滤速）680.050.4599.97（0.5m/s滤速）770.5199.97（0.1m/s滤速）771100（0.13m/s滤速）2004199.999999.99999（滤速为cm量级）表29/15/20228细菌对滤材的穿透对于细菌和滤材特性缺乏了解的人，总是担心“活”的细菌能否贯穿滤材的问题。有人从用过的高效过滤器上取下部分滤材，把它精密置于培养基上面进行培养，结果如表

6、3所列，可见在过滤器背面的滤材培养不出细菌。因此，细菌的贯穿问题也就被否定了。此外，培养结果还说明，在预过滤器迎风面上部附着的细菌数，达到整个气流中的细菌数的90，高效过滤器迎风面上附着的细菌数仅占10。这也说明，由于细菌等价直径大，大部分已在预过滤器上被过滤下来了。9/15/20229表3 高效过滤器滤材表面附着细菌的实验结果滤材位置在过滤器上部取样在过滤器中部取样迎风面滤材表面17粒4粒背风面滤材表面009/15/202210微生物在滤材上的繁殖 这是技术人员和医护人员所共同关心的问题。细菌的繁殖应有合适的温度、湿度和营养。对于以无机材料制成的滤材，由于缺乏必要的营养，细菌在其上的生存是很

7、困难的（虽然现在已发现，几乎没有细菌不“吃”的东西）。有人把在手术室中使用了13000h以后的高效过滤器滤材取下一些作试样，按照以下三种条件处理： 9/15/202211 把滤材的集尘面精密置于培养基上。 按照的方法再向滤材上滴下无菌蒸馏水，使其充分润湿。 按照的方法，并保存相对湿度为90。培养结果是： 只的条件下，可见到滤材上形成枯草菌和真菌的菌落（23个/cm2）；在的条件下，仅有霉菌的小菌落形成；在的高湿条件下，认为细菌完全不能发育。9/15/202212这一试验结果表明，多数细菌在被过滤器捕集下来以后，由于湿度、营养源不合适（温度影响且不谈）即趋于自然死亡，或者仅有一部分芽孢形成的菌落

8、或者真菌一类生存下来。如果在高湿度下没有营养源，细菌也生存不下来，反之，只要有营养源，即使在普通环境中细菌也得以生存并发育。蒸馏水本身虽无营养，但可能有助于滤材上含营养微粒的溶解，而这一点可能比高湿度条件对细菌还有利。9/15/202213四、空气灭菌的主流方法 菌附于尘上，要除尘、菌，只有过滤和静电，能两者兼顾，但后者必须要有预过滤，其性价比远低于过滤，所以空气的消毒灭菌技术中空气过滤是主流，反映在国外各类标准中。新风、回风和部分送风超低阻高中效无菌送风高效排风高效、零泄漏9/15/202214五、空气消毒灭菌效果的验证按新GMP对无菌区微生物应进行动态监测，见表4：级别浮游菌cfu/m3沉

9、降菌（90mm)cfu/4h表面微生物接触碟（55mm)cfu/皿5指手套cfu/手套A1111B10555C1005025D20010050是平均值单个皿可少于4h空气量应多于1m3多皿接力9/15/202215六、生物制品需要的级别级别生物制品灌装前不经除菌过滤灌装前经除菌过滤其他100级（背景为静态百级动态万级）制品的配制、合并、灌封、冻干、加塞；细胞的制备；添加稳定剂、佐剂及灭活剂等工序半成品制备中的接种与收获万级制品的配制、合并、精制；半成品制备中的细胞培养；添加稳定剂、佐剂、灭活剂；接种后鸡胚的孵化和细菌培养除菌过滤和超滤工序；体外免疫诊断试剂的阳性血清和抗原、抗体的分装9/15/202216六、生物制品需要的级别（续）级别生物制品灌装前不经除菌过滤灌装前经除菌过滤其他10万级鸡胚的孵化；溶液或稳定剂的配制与灭菌；血清等的提取和血浆的合并；非低温提取；分装前巴氏消毒；轧盖及最终容器精洗；口服剂发酵密闭系统环境（暴露部分需无菌操作）深部组织创伤和大面积体表创面用品；酶联免疫吸附剂的包装、配液、分装与干燥；胶体金试剂、聚合酶链反应试剂（PCR）、纸片法试剂等其他体外免疫试剂制备9/15/202217七、生物制品的生产条件要独立厂房：如卡介苗或用活性微生物的制