邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁

1、邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁第1页，共12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三一、实验目的 1了解分光光度计的结构和正确的使用方法；2学习吸收曲线的制作方法，理解最大吸收波长的意义；3掌握朗伯比尔定律的应用。第2页，共12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三二、实验原理 在pH约为5的HAc-NaAc缓冲溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的橙红色络合物，max510nm, 1.1104L/(molcm)。在510nm处吸光度与其浓度成正比，符合朗伯-比尔定律，用标准曲线法可求得试样中微量Fe2+的测定。 如果铁以Fe3+的形式存在，应预先加入盐酸羟胺将F

2、e3+还原成Fe2+。第3页，共12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三三、主要仪器与试剂1仪器 722型分光光度计、 10mL吸量管，50mL容量瓶。2试剂 (1) 铁标准溶液（含铁 100g/mL）； (2) 0.1%邻菲罗啉溶液 ； (3) 5%盐酸羟胺溶液 ； (4) HAc-NaAc缓冲液（pH=4.6）。第4页，共12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三四、实验步骤1邻菲罗啉-亚铁吸收曲线的绘制 准确吸取铁标准溶液（含铁 10g/mL，用含铁 100g/mL 配制）4mL于50mL容量瓶中，依次加入5mL HAc-NaAc缓冲液、2mL盐酸羟胺溶液、5mL邻

3、菲罗啉溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟。以水作参比溶液，用1cm比色皿和722型分光光度计在=440-600nm分别测定吸光度A。 以所得吸光度A为纵坐标，相应波长为横坐标，在坐标纸上绘制A与的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定铁的适宜波长，一般选用最大吸收波长max为测定波长。第5页，共12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三2标准曲线的绘制 准确吸取铁标准溶液（含铁10g/mL）0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL于六个50mL容量瓶中，依次加入5mL HAc-NaAc缓冲液、2mL盐酸羟胺溶液、5mL邻菲罗啉溶液，用去离子水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟

4、。以不加铁的试剂溶液作参比，用1cm比色皿，在max处分别测定吸光度A。 以显色后的50mL溶液中的含铁量(g)为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制测定铁的标准曲线。第6页，共12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三3试样中微量铁的测定 准确吸取试样10mL于50mL容量瓶中，按照绘制标准曲线的实验步骤，配制溶液并测定吸光度Ax，从标准曲线上查出对应的铁的质量，并求原试样中铁含量的浓度（g/mL）。 第7页，共12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三五、数据记录及结果处理 1吸收曲线绘制和测量波长选择 由吸收曲线可得，max= nm。2标准曲线的绘制和铁含量的测定第8页，共

5、12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三若由标准曲线上查出对应的铁含量为cx ，则原试样中铁含量的浓度cFe计算： 第9页，共12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三六、思考题 1参比溶液的作用是什么？ 2溶液酸度对测定有何影响？ 3制作标准曲线和进行其他条件实验时，加入试剂的 顺序能否任意改变？为什么？第10页，共12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三七、注意事项1为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管使用寿命。 2比色皿使用注意事项：1）每台仪器与比色皿配套，不能与其它仪器上的比色皿调换；2）拿取比色皿时，手指不能

6、接触其透光面； 3）装溶液时，先用该溶液润洗比色皿内壁23次，被测溶液以装 至比色皿的3/4高度为宜，并用滤纸轻轻吸去比色皿外部的液 体，再用擦镜纸小心擦拭透光面，直到洁净透明；4）测定系列溶液时，通常按由稀到浓的顺序测定；5）实验完毕，及时把比色皿洗净、晾干，放回比色皿盒中。第11页，共12页，2022年，5月20日，20点21分，星期三附722型分光光度计简要操作方法： 预热仪器。为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热 20min。预热仪器和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光 路切断，防止光电管疲劳 ；选定波长。转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。调节“T 0”点。打开吸收池暗室盖（光门自动关闭），使读数 模式调至T上，在调节0% T旋钮，使数字显示为“00.0”；调节T=100。轻轻盖上吸收池盖（将参比溶液置于光路）， 调节透光率100% T旋钮，使数学显示为“100.0” ；测定。使读数模式调至A，轻轻拉动比色皿座架拉杆，使被 测溶液进入