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文档简介

1、生化考研重点知识总结第一章单糖多糖与碘显色,至少需要的葡萄糖残基数:6唾液淀粉酶激活剂:Cl-几个典型非还原糖:蔗糖、糖原、淀粉形成N-糖肽键的单糖或衍生物是第二章油脂几个非饱和脂肪酸双键数:油酸:1亚油酸:2亚麻酸:3人不能自身合成的必须脂肪酸:亚油酸、亚麻酸四种脂类转运脂蛋白CM:乳糜微粒,转运外源性三酰甘油酯(2)VLDL:极低密度脂蛋白,转运内源性三酰甘油酯LDL:低密度脂蛋白,转运内源性胆固醇HDL:高密度脂蛋白,转运外源性胆固醇第三章氨基酸与蛋白质几种主要氨基酸及三字母缩写两特殊:Pro、Gly芳香:酪(Tyr)色(Trp/Try,吸光最强)苯(Phe八种必需氨基酸:甲携来一本亮色

2、书,Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr侧链为羟基氨基酸:苏(Thr)丝(Ser)酪(Tyr)酸性氨基酸:天(Asp)谷(Glu)对应两酰胺:Asn、Gln碱性氨基酸:赖(Lys)精(Arg)组(His)其它:丙氨酸(AlaPIPI 的计算:PI= (PK1+PK2) /2=(PK1+PKRCOOH)/2=(PK2+PKRNH2)/2(2)PH 的计算:PH=PK1+Lg (R/R+) =PK2+Lg (R-/R)PH =7的水中溶蛋白,PH=6,则该蛋白PIPI时有R-蛋白二级结构a螺旋:Sn=,存在Pro时不形成a螺旋,右手螺旋8折叠:同/反向,肽键中H与O成氢键

3、,轴距8转角:转角处为Gly超二级结构:无规卷曲、结构域三级结构:作用力(二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力)蛋白结构分析N端分析法:FDNB (Sanger)、PITC (Edman)、DNS-Cl (丹磺酰氯)、氨肽酶法C端分析法:羧肽酶法、无水肼解法羧肽酶A:不能水解C端为Lys、Arg、Pro的肽 键;羧肽酶B:能水解C端为Lys、Arg的肽 键;C端倒数第二位是Pro时,A、B都不能水 解打开二硫键:还原法(巯基化合物,碘乙酸保护)、氧化法(过甲酸)专一切断:胰蛋白酶(Lys、Arg-COOH肽键);CNBr (Met-COOH肽键);胰凝乳蛋白酶 ();显色反应Foll

4、in酚:蓝色,酚基(Tyr)、吲哚基(Trp),组分(CuSO4+磷钼酸)Millon:红色,酚基(Tyr),组分(HgNO3+Hg (NO3) 2)坂口反应:红色,胍基(Arg),组分(a萘酚,NaClO)黄色反应:黄色,芳香氨基酸,组分(浓HNO3)双缩脲反应:紫红色,肽键,多肽,组分(NaOH+CuSO4)乙醛酸反应:紫色,吲哚基(Trp)几种重要氨基酸提供活性甲基的:S-腺苷Met形成N-糖肽键的:Asp胶原蛋白中含量高的氨基酸:Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys蛋白分离纯化技术:透析、超滤;密度梯度离心;凝胶过滤;PI法、盐析、有机溶剂 法;电泳、离子交换;吸附层析;

5、亲和层析凝胶过滤大分子先出,凝胶电泳相反:机理分子运动速度决定因素:大小、电荷量、形状蛋白离子交换层析与洗脱:凝胶电泳三效应:电荷、分子筛、浓度效应蛋白含量测定测N:凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光测M:沉降离心、凝胶过滤(凝胶排阻层析)、SDSPAGE凯氏定氮:HNO2反应,生成的N2中氨基酸占1/2。1)其它分离二硫基的肽段可用:SDSPAGE几个主要氨基酸的PI值:几种重要蛋白:镰刀贫血病:Glu-Val,第6位与烷化剂(碘乙酸)反应的氨基酸:Cys (半胱氨酸)第四章酶学酶活化中心组成:结合部位、催化部位计算:活力单位(IU、Kat)、比活力(IU/mg)、转化数/转化周

6、期、米氏方程各可逆抑制作用的动力学特点:Km、Vmax几个抑制作用:竞争抑制(丙二酸对琥珀酸脱氢酶);有有机磷(与丝氨酸羟基共价不 可逆);CO、CN (作用于Cytaa3);不可逆抑制(重金属、有机砷、 CN化物、硫化物、CO)酶促反应初速度与E、T有关以“三点结合”模型作用的酶:甘油激酶酶的专一性专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶:以02为直接氢受体的氧化酶:VC氧化酶、细胞色素氧化酶别构酶两独立功能部位:活性中心、变构中心动力学曲线:S型,其它为双曲线具有效应:协同效应、变构效应典型代表一血红蛋白:协同效应、波尔效应、变构效应酶分离纯化要求:纯化倍数高、回收率高纯化倍数=比活力/纯化前总比活

7、力回收率=活力单位数/纯化前活力单位数方法:同蛋白质竞争性抑制剂:增S可减弱抑制作用患尿黑酸症的病人是由于:缺少尿黑酸氧化酶(尿黑酸氧化酶遗传缺陷)第五章核酸反向互补配对:ACG-CGT (U)N-昔键:W(C1 -C5),嘌吟(N9-C1 ),嘧啶(N1-C1 )SnRNA:核仁不均一 RNA,功能(促进转录、)核酸分离技术凝胶电泳:三效应、分子运动速度决定因素见蛋白质离子交换层析:阳离子交换层析,核昔酸脱下顺序:U-G-C-A阴离子交换层析,核昔酸脱下顺序:C-A-U-G亲和层析:可用亲和层析法分离的核酸:mRNA (PolyA尾)DNA测序三法:加减法(Sanger、1975 ),化学断

8、裂法,双脱氧终止法(Sanger、1977、原理)不能形成两性离子的核昔酸是UMP:原因cNMP最重要的cNMP: cAMP、cGMPcAMP:第二信使(4)cAMP分子内有:环化的磷酸二酯键cAMP与cGMP:生物作用并不是完全相反第六章分子生物学与基因工程基因组学 启动子组成3部分:识别部位(-35、CG/CAAT),结合部位(-10、TATA),转录起始 点八、高度重复序列:卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA原核生物基因重叠类型:基因家族按特点分三类:简单多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家 族基因家族按组成分三类:DNA复制DNA复制方式:线性(眼型),环状【。(大肠

9、杆菌)、滚环(病毒质粒)、D型(线 粒体、叶绿体)】DNA复制需引物:转录不需引物原核DNA聚合酶功能:损伤修复、校正、合成DNA基因工程酶(l)RNase:RNaseA(嘧啶 3 一5)、RNaseTl (G 的 3 一5)、RNaseT2 (A 的 3 一5)DNA连接酶所需能量:原核ATP、真核NAD+转移水解DNA-RNA中的RNA的酶:RNaseH、逆转录酶(有RNaseH活性)牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得产物:5磷酸切开,产生3单磷酸核苷蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得产物:3 -OH切开,产生5单磷酸核苷核酸合成酶:DDDP (依赖DNA的DNA聚合酶)、RDDP (依赖RNA的DN

10、A聚合酶)、DDRP (依赖DNA的RNA聚合酶)(7)RNAPol2: RNAPolB,合成 hnRNA,分布在核质中RNA用强碱水解产生:2 -核苷酸、3 -核苷酸混合物限制内切酶切割特点:4-8bp、6bp主要,成黏性、平齐末端,成回文序列,甲基化难切tRNA结构含稀有碱基最多:D (二氢尿嘧啶)、4(假尿嘧啶)、I (次黄嘌吟)四环四臂五区:D臂、T4C臂、氨基酸臂(受体臂)、反密码子臂二级:三叶草三级:倒L基因表达DNA重组过程中DNA连接四方式:粘性末端连接、同聚物加尾法、加衔接物连接法、 加DNA接头连接法转位:三类转位因子【(插入序列IS)、转座子(Tn)、可转座噬菌体】,转位

11、后遗传效应(突变、产生新基因、染色体畸变)转录:转录5端常见起始核苷酸是G、A,原核终止子在终止位点前有PolyU翻译:参与肽链延伸的因子(EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子),肽基转移酶催化组分 (23SrRNA),蛋白合成时生成肽键的能量来自高能酯键水解转录抑制剂:利福平、利迪链霉素、放线素D、a-鹅膏蕈碱翻译抑制剂:抗生素(氯霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素、四环素、土霉素)机理干扰素(使起始因子eIF2磷酸化失活),毒素(抑制真核肽链延长)基因工程基因工程载体:必备条件(自主复制、有标志基因便于筛选、易引入受体细胞、酶切位点少、M大可携带大片基因)常用载体(质粒、病毒、噬菌体、人工大

12、染色体改造而来DNA文库:含某种生物体全部被转录成mRNA的所有基因序列密码子起始密码子:原核(AUG、GUG、UUG,对应fMet)真核(AUG,对应Met)起始 tRNA: tRNAMet、tRNAfMet终止密码子:UAA、UAG、UGA无义密码子:UAA、UAG、UGA线粒体中三种特殊密码子:UGA-色氨酸原核RF1识别的密码子:UAA、UAX淤RF2识别的密码子:UAA、UGA密码子性质:不重叠、特殊性、通用性、简并性、连续性、摆动性摆动性:A-U,U-A、G,C-G,G-C、U,I-A、U、C其它SnRNA功能:RNA成熟加工、与染色质结合、调节基因活性多拷贝基因有:组蛋白基因、3

13、种印迹法对应检测对象:S-DNA、N-RNA、W-Pro(5)Tm的影响三因素:C三G、盐浓度(Na+)、DNA均一性(均一一窄)Tm= (C+G) %X +第七章维生素与激素几种重要酶的辅酶脱羧酶:a酮酸脱羧酶(TPP/VB1)、氨基酸脱羧酶(磷酸毗哆醛(VB6)磷酸毗哆醛:氨基酸脱羧酶、转氨酶的辅酶以FAD为辅酶的酶:二氢硫辛酰胺脱氢酶、脂酰辅酶A脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、线粒体 a磷酸甘油脱氢酶羧化酶的辅酶:生物素(VB7)(4)VB12:钻胺素(参与甲基转移)氧化还原酶的辅酶:NAD+以NADP为辅酶的酶:苹果酸酶、6pG脱氢酶以FAK为辅酶的酶:脂酰辅酶A脱氢酶几种特定功能的维生素凝血维

14、生素:VK,脂溶抗血维生素:VC,水溶含 A 的维生素:NAD+、NADP、FAD、CoASH口:体内活性最高的VD是:1,25二羟基胆钙化醇1,25 (OH) 2D3两种VD原:VD3 (7脱氢胆固醇),VD2 (麦角固醇)VD3的形成:胆固醇一7脱氢胆固醇一VD3胰岛素等激素的受体是:含N激素受体在激素作用下与腺苷酸环化酶的耦联是由G蛋白介导实现的蛋白质类激素受体位于:细胞质膜上类固醇激素受体位于:细胞内第八章生物氧化肌肉或神经细胞储存能量的高能化合物是:磷酸肌酸(IP3)高能化合物有:磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)、生物合成中主要的还原剂;NADPH,来源于H

15、MS (磷酸戊糖途径/磷酸己糖旁路)生物氧化过程中,ATP生成方式:底物水平磷酸化、氧化磷酸化线粒体的嵴:外表面与基质接触,含有氧化磷酸化组分ATP合成酶F0F1-ATPase是:催化ATP合成的酶形式,一种膜结合复合物,单独存在时没ATP酶活 性F0:含H+通道ATP合成机理细胞质脱下的一对氢进入线粒体的三方式:异柠檬酸穿梭、苹果酸穿梭、甘油磷酸穿梭丙氨酸脱氢酶系的辅因子:TPP(VB1)、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+丙氨酸脱氢酶系的酶:丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶醛缩酶的底物是:F-1,6-2PQD在TCA、有氧呼吸链中产生的ATP最多的是:a-酮戊二

16、酸-琥珀酸第九章糖代谢糖酵解部位:胞液过程:葡萄糖、糖元转变为丙酮酸三关键酶:己糖激酶:包括(葡糖糖激酶、果糖激酶),不受ATP/AMP的调节磷酸果糖激酶:限速,主要激活剂(2,6-二磷酸果糖),抑制剂(ATP、柠檬酸)丙酮酸激酶:受ATP/AMP的抑制产能:2ATP醛缩酶的底物:F-1,6-P2 (1,6-二磷酸果糖)糖代谢中既催化脱氢又催化脱羧的两种酶:异柠檬酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶糖的有氧氧化丙酮酸乙酰辅酶A:部位:线粒体内膜丙酮酸脱氢酶系:3酶(丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶)5 辅(TPP (VB1)、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+)TCA循

17、环:柠檬酸循环、Krebs循环调节TCA循环运转最主要的酶:异柠檬酸脱氢酶(限速)、a-酮戊二酸脱氢酶系部位:线粒体基质、内膜酶:柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶(限速)、a酮戊二酸脱氢酶系1分子葡萄糖有氧氧化产生ATP数:36(38)=2+6(4)+6+24草酰乙酸来源三途径:苹果酸酶和苹果酸脱氢酶、丙酮酸脱羧酶、磷酸丙酮酸脱羧酶磷酸戊糖途径、磷酸己糖旁路HMS核糖的分解途径是:HMS生物合成中除ATP供能外合成糖还需:UTP合成脂肪还需:GTP生物合成的还原力是NADPH,来源是HMS反应部位总结糖酵解(EMP):胞质TCA:线粒体基质、内膜氧化磷酸化:线粒体内膜糖元代谢合成糖元时,葡萄糖先活化

18、成:UDPG植物合成淀粉时需:ADPG合成蔗糖需:UDPG、6-P-G糖异生第十章脂代谢三酰甘油代谢分解代谢B -氧化:反应部位:线粒体基质产物:偶数碳(乙酰CoA)、奇数碳(几个乙酰CoA+1个丙酰CoA)反应过程:二步脱氢(生成1FADH2+1NADH)、产ATP(5个)饱和脂肪酸分解酮体生成部位:肝内成分:乙酰乙酸、B-羟丁酸、丙酮利用部位:肝外,脑、肌不饱和脂肪酸氧化分解:两特殊酶:顺-反烯酯酰CoA异构酶、顺-反-B羟酯酰CoA异构酶 1分子软脂酸(16C)彻底氧化分解成CO2、H2O生成ATP数: 脂肪酸合成脂肪酸合成代谢还原力是NADPH,来源是HMS催化胞液脂肪酸合成的限速反应由乙酰CoA羧化酶催化酰基载体为ACP,8 -氧化中酰基载体是乙酰CoA磷脂代谢合成磷脂所需能量来自:CTP胆固醇代谢在体内可直接合成胆固醇的化合物是:脂酰CoA第十一章氨基酸与蛋白质代谢几种氨基酸生酮氨基酸:Leu、Lys生糖氨

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