分析性能评估资料

1、5-核糖核苷酸水解酶测定试剂盒（酶速率法）分析性能评估资料 - TBA120FR一概述5-核糖核苷酸水解酶测定试剂盒（酶速率法）（以下简称5 -NT试剂）分析性能内容包括空白吸光度、分析灵敏度、线性范围、精密度、准确度等项目的测试，本文参照5 -核糖核苷酸水解酶测定试剂盒（酶速率法） 注册产品标准的要求以及试验方法在全自动生 化分析仪上对 5 -NT 试剂相关技术性能指标进行相应的研究评估。测试仪器及参数设置2.1测试仪器：TBA-120FR2.2.参数设置：东芝TBA-120FR参数Assay Name5 -NTL-Refere nce-H0-10L-L in ear Ran ge-H0-8

2、0Reacti on ModeRATE UPWavele ngth-Prim/sec548Read time-Ma in25-32Read time-Flex0-0Li nearity-Bia nk Read14-16Abs Limits0.5-2.5Sta ndard S.Vol6Reage nt 1 R.Vol200Reage nt 2 R.Vol100Decimal Places2UnitsU/LCalib ModeLin earK2766Bla nk/Calib Replicates3-3BLK Abs Ran ge-2.5-2.5BLKWater 0.00BLA Sample S.V

3、OL.6C1#.#C1 Sample S.VOL.6C2-C5C2-C5 Sample S.VOL.三性能测试结果3.1 空白吸光度 用指定空白样品（去离子水）测试试剂（盒），在测试主波长下，测试三次吸光度，取平均值即为试剂空白吸光度测定值。其结果应符合37C环境下，波长546nn处、光径为1cm时，A空白w 0. 300。批号A2014002A2014003A201400410.0110.0100.01020.0090.0100.01030.0080.0140.010平均值0.0090.0110.0103.2 空白吸光度变化率以蒸馏水调整分光光度计的零点，用指定空白样品 （蒸馏水）测试试剂工

4、作液，在波长546nm、37C条件下稳定5min后测定一次试剂工作液吸光度A1 , 5min时再测定一次试剂 工作液吸光度A2,计 算试剂空白吸光度率，空白吸光度变化率 A/min w 0. 015 （温度37C、波长546nm、光径1cm）批号A2014002A2014003A2014004空白吸光度变化率0.004-0.00203.3 分析灵敏度用已知浓度的样本测试试剂盒，记录样本的吸光度值Ai与样本经过T （ min ）后的吸光度值A2,换算为25. 00U/L的吸光度变化率厶A/min。计算公式为：吸光度变化率 A/min=A?- aJ/t c /C样本（1）其中：A?=（ A?主波-

5、B2副波）A1= （A1 主波 B1 副波）A?主波一一在规定参数下，主波长下反应T时间后的吸光度值；B2副波一一在规定参数下，副波长下反应T时间后的吸光度值；A1 主波一一在规定参数下，主波长下的起始吸光度值；B1 副波在规定参数下，副波长下的起始吸光度值；T -反应起始至终点的反应时间（ min）；Co -要求规定的浓度；C （样本）实际检测样本的浓度值。批号A2014002A2014003A20140040.0280.030.0313.4线性范围用去离子水（零值样本）稀释接近线性范围上限的高浓度样本，混合成至少5个不同梯度的样品（Xj），分别测试试剂（盒）。每个稀释浓度的样本测试3次，分

6、别求出测定结果的均值（yj。以稀释浓度（X）为自变量，以测定结果均值（yj为因变量求出线性回归方程。按公式（2）计算线 性回归的相关系数（r）。迟（人吠）（片一y） 迄（XX） Z （y-y）2 TOC o 1-5 h z i i（2）Y Yi估计值相对偏差=100%x （3）Yi估计值（3）绝对偏差| = | Yi- Yj估计值| （4）式中：X 测定管溶液的理论浓度；Y 与测定管溶液浓度相对应的实际测量值；i 1 2, 3,n；将稀释浓度（xj代入线性回归方程，计算出Yj的估计值，按公式（3）或（4）计算Yj与估计值的相对偏差 或绝对偏差。平均值20.3019.8019.70线性相对/绝对

7、偏差A2014002A2014003A201400410.600.500.6024.81%3.81%4.59%31.50%1.02%2.60%40.00%-0.24%0.75%5-0.80%-1.03%-0.12%在（0-80.00 ） U/L 线性范围内,r 0.990。在（10.01-80.00 ）U/L范围内的相对偏差不超过15%测疋纟口果（0-10.00）U/L时绝对偏差不超过1.50 U/L。35测量精密度3.5.1 重复性在重复性条件下，用控制物质测试试剂（盒），重复10 次，按公式（5），公式（6）计算其变异系数在重复性条件下，用控制物质测试试剂（盒），重复10 次，按公式（5）

8、，公式（6）计算其变异系数（CV ）。X2CV(%)弋 1%（6）式中：X 系列测定值;x -测定均值；n -测定次数;S 标准差。批号A2014002A2014003A2014004125.139.924.539.525.240.6224.739.624340.724.540.6325242.12514024.13942439224239325.142352440.82541.424.5425624541.82442.324.840.3724.840.423.839.424.839.1825141.724.941.624739.6924.13952540.124.440.21024.440.

9、22441.124.240.8平均值24.5940.5224.4840.5424.6340.50S0.46301.04010.48721.03840.35921.1785CV( %1.88%2.57%1.99%2.56%1.46%2.91%结果判断合格合格合格合格合格合格标准要求CVC 5%352批间差检测的均值为：人(i=1 , 2, 3)，按公式,公式(8)计算其相对偏差(R)。计算公式用控制物质分别测试3个不同批号的试剂(盒)，每个批号测试3 次 ， 分 别 计 算 每 批 3 次X; 63ER XmaxXmin 100 % (8)Xt式中：Xmaxx中的最大值；xminx中的最小值;3

10、批试剂检测均值。批号A2014002X1A2014003批号A2014002X1A2014003X2A2014004X31.22%1.22%RW10%124.424.424.8224.823.924.432424.924.9平均值124.40平均值224.40平均值3247024.5平均值R标准要求3.6 准确度取参考物质测试试剂（盒），重复3 次，取平均值，按照公式（9）并计算相对偏差相对偏差（ ）=测得的均值一参考物质靶值参考物质靶值100%（）批号靶值范围测定平均值不准确度是否在控A201400224.624.4-0.81%在控A201400324.4-0.81%在控A201400424.70.41%在控A201400239.841.23.52%在控A201400339.3-1.26%在控A201400441.64.52%在控标准要求