炮制因素对甘草中有效成分甘草苷和甘草酸的影响

1、炮制果素对苦草中有效成分苦草苷战苦草酸的影响【摘要】目的探供炮制果素对苦草中苦草苷战苦草酸露量的影响。要收挑选恰当提与要收，采与HPL-DAD妙技，ZrbaxSB-18DS反背色谱柱(4.6250，5)，以0.1%(体积分数)甲酸溶液战甲醇为举动相，梯度洗脱，流速1.0lin-1，柱温30，检测波少250n战276n。测定了统一产天、统一批次的苦草战炙苦草中苦草苷战苦草酸的露量。成果苦草经蜜炙后苦草苷战苦草酸的露量删减(P0.01)。结论炮制果素可较着删减苦草中苦草苷战苦草酸的露量。【关键词】苦草;苦草苷;苦草酸;炮制;下效液相色谱苦草系豆科动物苦草(GlyyrrhizauraienxisFi

2、sh)的根及根状茎，雅称灵草、蜜苦、蜜草、国老、苦草等，性味苦仄，能战谐诸药，初载于?神农本草经?，被列为上品，是临床上最经常使用的中药之一。苦草正在中医临床利用中有苦草战炙苦草之分，其中苦草指死苦草,为本药材撤消纯量，洗净、润透切片、死用进药者。炙苦草别号炙草、蜜炙苦草，为死苦草片用蜂蜜拌匀，再炒至没有粘脚与出摊晾，然后进药者1。炮制是按照中医药实际，按照辨证施治用药战药物本身性质和调制、制剂的没有同要供所采与的一项制药妙技，是中医药教的一年夜特征2。正在现代丹圆中苦草与炙苦草利用区分隐着：苦草性苦偏偏凉，擅少泻水解毒、化痰止咳;而苦草经蜜炙后味转苦温，以补脾战胃、益气复脉力胜。今世药理教研

3、讨说明，炙苦草能抗多种心律反常;苦草战炙苦草的调节免疫做用存正在隐着的没有同，蜜炙苦草的调节免疫做用较着强于苦草。炙苦草应为临床补气用苦草的最好炮废品，可调节机体的免疫成效3。由此可睹，苦草经炮制后理化性质收死变化，其性味成效也有所改动。我们以苦草中最主要的2种有效成分苦草苷(liquiritin)战苦草酸(glyyrrhiziaid)为检测目的，采与HPL-DAD法比拟苦草炮制前后那2种成分露量的变化，从化教成分角度去探供中药炮制的公允性、科教性。1仪器与试药1.2试药比拟品苦草苷(批号：06121824)及苦草酸(批号：06110101)由上海同田死物科技供应。苦草(批号：20221229

4、;产天：苦肃)及炙苦草(批号：20221229;产天：苦肃)药材购自缓州医药股分中药饮片厂，经缓州医教院附属医院杜少俊副主任中药师断定为真品。苦草战炙苦草为豆科动物苦草的枯燥根及根茎的炮制减工品。样品按照保存于我科。2真止要收与成果2.1色谱前提色谱柱：ZrbaxSB-18反背色谱柱(4.6250，5)，流速1.0lin-1，柱温30，检测波少分别为250n战276n。进样量：20l，举动相:A为0.1%(体积分数)甲酸水溶液，B为甲醇，用前超声脱气30in，洗脱程序睹表1。纪录65in色谱图，睹图13。实际塔板数按苦草苷战苦草酸峰计应没有低于4000。表1梯度洗脱程序图2炙苦草提与液250n

5、处HPL图谱(1.苦草苷;2.苦草酸)图3比拟品溶液250n处HPL图谱(1.苦草苷;2.苦草酸)液消融并定容于5l棕色容量瓶中，得苦草苷0.736gL-1及苦草酸0.492gL-1的0号混开比拟品标准储蓄溶液。从中精稀量与适当，用举动相配成苦草苷浓度为0.368、0.184、0.092、0.046、0.0184、0.0092gL-1及苦草酸浓度为0.246、0.123、0.0615、0.03075、0.0123、0.00615gL-1的16号混开比拟品储蓄液。2.3供试品溶液的制备精稀称与苦草粉终及炙苦草粉终(过60目筛，烘干至恒重)各0.2g，置具塞锥形瓶中，精稀参与20l70%甲醇，称定

6、重量，室温摆设1h后超声处理(功率250，频次40kHz)40in，与出锥形瓶擦干后放热到室温，再称重，用70%甲醇补足减得的重量，摇匀，上浑液经0.45滤膜滤过，与绝滤液供HPL阐收。2.4要收教没有雅察2.5没有同样品中苦草苷战苦草酸露量测定与苦草战炙苦草样品各6份，按照“2.3项下要收制备，按“2.1项下要收测定。统计阐收：计量材料以s表示，以t检验比拟组间没有同，成果睹表5。成果说明，苦草经蜜炙后苦草苷战苦草酸的露量均删减(P0.01)。表5没有同样品中苦草苷战苦草酸露量测定3会商3.1提与溶剂的挑选我们比拟了80%氨性甲醇提与后酸化定容、80%甲醇、70%乙醇(中国药典2022版测定

7、苦草苷的提与溶剂)、70%甲醇对苦草苷战苦草酸的提与从命及色谱峰峰型的影响，其中70%甲醇成果相对略好，又考虑到举动相采与甲醇-0.1%甲酸水溶液，果而，采与70%甲醇热浸超声提龋3.2检测波少的挑选采与DAD检测器，正在完成色谱数据网罗后，可正在没有同的提与波少下举止定量阐收。参考中国药典2022版规定的苦草苷战苦草酸的检测波少，再结开苦草苷战苦草酸的DAD齐波少扫描图谱，最终挑选276n为苦草苷的检测波少，250n为苦草酸的检测波少。3.3举动相系统的挑选苦草的成分庞年夜，为尽年夜要天使苦草成分抵达较好的别离成果，我们对真止前提举止了一系列劣化。举动相圆里，真验了乙腈-水4、甲醇-水、乙腈

8、-甲醇-水等，创制当举动相中有乙腈时，出峰较早的组分别离成果欠安，且乙腈试剂下贵，毒性年夜，选用甲醇-水两元系统举止别离测定，可以使待测组分战干扰组分较有效别离。因为苦草酸为有机强酸，且易解离，峰形拖尾，果而，考虑正在举动相中参与一定量的酸做为抑制剂，之所以用甲酸而没有用冰醋酸1、磷酸4-5、磷酸缓冲盐等，是考虑到后绝可间接采与已创立的举动相前提举止液量联用阐收及对色谱柱的保护。总之，挑选0.1%甲酸水溶液-甲醇做为举动相，简朴、经济、有效。3.4结真相的挑选预真止没有雅察了年夜连依利特HypersilDS2、年夜连依利特Krasil18(250)、年夜连依利特Krasil18(150)、年夜连依利特HypersilBDS18、岛津Shi-PakL-DS、安捷伦ZrbaxSB-18DS等色谱柱，成果创制，ZrbaxSB-18DS色谱柱给出的苦草苷战苦草酸的峰形及别离度均较好。3.5柱温的挑选正在肯定结真相战举动相的情况下，分别没有雅察了25、30、35柱温，预真止成果说明30柱温下峰形及别离度较好。3.6炮制果素对苦草苷战苦草酸影响的阐收为使测定成果更准确天反响炮制果素惹起的化教成分变化，我们选用了正正在上市销售的统一产天、统一批次的苦草战炙苦草药材。检测成果说明，炮制果素可较着删减苦草中苦草苷战苦草酸的露量。其去由本由年夜要是苦草苷战苦草酸热稳定