鼠曲草中黄酮类化合物的微波辅助提取研究

1、鼠曲草中黄酮类化合物的微波辅助提取研究【关键词】鼠曲草；,黄酮类物质；,微波辅助提取摘要：目的应用微波法提取鼠曲草中的黄酮类化合物。方法采用单因素实验正交实验,研究了乙醇体积分数、料液比、微波作用时间、微波功率对鼠曲草黄酮提取量的影响规律。结果微波提取法的最正确工艺条件为微波作用时间5in，乙醇体积分数15%，料液比160(g/l，微波功率700。在此参数组合条件下，黄酮提取率为4.72%。结论与传统溶剂法的比照实验说明，微波法不仅节省时间，而且提取效率高，是一种快速、高效、节能的新型提取工艺。关键词：鼠曲草；黄酮类物质；微波辅助提取Abstrat：bjetiveAnvelextratinpr

2、essfflavnidsfrhaphaliuaffineD.Dnbyirave-assistedextratinastested.ethdsThesingleexperientalfatr,suhasiraveper,perentfethanlvlue,iravetreatingtie,ratifslidtliquidasstudied.Then,theptiuparaeterserebtainedbyrthgnaltest.ResultsTheptiuparaeterseretheratifslidtliquid160(g/l),iravetreating5in,theiraveperrat

3、in700,perentfethanlvlue15.Theextratinratefflavnidsas4.72%attheptiuparaeters.nlusinparediththetraditinalsluentextratin,irave-assistedextratinfrhaphaliuaffineD.Dnflavnidshastheharateristisfshrterextrattieandhighereffiieyandthestisl.Keyrds：haphaliuaffineD.Dn；Flavnids；iraveassistedextratin鼠曲草Gnaphliuaff

4、ineD.Dn别名：佛耳草、清明菜，系菊花科鼠曲草属植物。本草原名“鼠耳始载于?名医别录?本草拾遗?称：“鼠曲草，生平岗熟地，高尺余，叶有白毛，黄花，已收载于?中国药典?1977年版部中1。据测定，鼠曲草全草含5%黄酮苷，黄酮类化合物具有抗氧化、抗过敏、抗炎、抗菌、抗突变、抗肿瘤、保肝作用，保护心脑血管系统和抗病毒以及杀虫等广泛的生理活性，且毒性较低，还可以用作食品、化装品的天然添加剂，如甜味剂、抗氧化剂、食用色素等2，3。近年来，微波因促进反响的高效性和强选择性，及其操作简便，副产物少，产率高及产物易提纯等优点，已经被广泛应用于生化蛋白质水解和有机合成、酯化等反响。国外不少学者已将微波应用于

5、天然产物的浸提过程。研究说明，微波技术应用与天然产物的提取具有选择性高、操作时间短、溶剂耗量少、有效成分得率高的特点4，5。本实验采用微波法提取鼠曲草黄酮类物质，以黄酮类物质的提取率为指标，研究了乙醇体积分数、料液比、微波作用时间、微波功率对黄酮类物质提取率的影响规律，并采用正交实验法确定了最正确提取条件。1材料与方法1.1材料与设备鼠曲草：采自四川理工学院汇南校区校园内；芦丁为生化试剂，购于北京化学试剂公司产品；其他试剂均为分析纯，购于成都科龙华工试剂厂KD23BDE型美的微波炉、TGL16B型Anke离心机、721E型Spetru可见分光光度计、GZXDH300BS电热恒温枯燥箱。1.2方

6、法1.2.1索氏提取准确称取枯燥的鼠曲草粉末样品(2.00000.0002g放入索氏提取器中，在蒸馏瓶中参加200l60%乙醇，水浴回流8h。提取液转移至250l容量瓶中，用提取溶剂定容至250l，取样测定。1.2.2鼠曲草中黄酮类化合物的微波辅助提取工艺流程：新颖鼠曲草预处理按一定料液比加溶剂浸润微波处理抽滤黄酮粗提液定容取样测定。操作要点：采摘新颖鼠曲草，去掉根部及枯败局部，清洗沥干后，枯燥，粉碎备用。准确称取一定量的鼠曲草粉末，参加一定量一定浓度的乙醇溶液作萃取剂进展微波处理，粗提液抽滤30in，用60%乙醇定容至100l，取样测定。1.2.3实验方案设计考察乙醇体积分数、料液比、时间、

7、微波功率对鼠曲草黄酮类物质提取效果的影响。在单因素试验根底上，以微波功率，乙醇体积分数、提取时间、料液比为试验因素，选用L9(34)正交表进展正交试验，确定最正确提取工艺条件。1.3分析方法1.3.1标准溶液的配制与标准曲线的绘制6，7精细称取芦丁10g(120烘至恒重)，以80%的乙醇定容至5l,再加蒸馏水稀释至10l。得到浓度为1.0g/l芦丁标准液。准确汲取0,0.1，0.2，0.3，0.4，0.5l芦丁溶液于10l具塞刻度试管中,先加5%NaN2溶液0.3l,摇匀放置6in后,参加10%的Al(N3)3溶液0.3l，摇匀放置6in，最后加1l/lNaH溶液4.0l，用60%乙醇定容至刻

8、度,摇匀后放置15in，在510n下测定吸光度，参比为60%乙醇，得标准曲线(芦丁浓度y和吸光值A的关系)如图1所示，其回归方程：Y=0.076X+0.0002，r=0.9997。图1标准曲线略1.3.2鼠曲草总黄酮的测定及计算将定容后的粗体液以6000r/in离心18in，提取液冷却，取上清液0.3l，按1.3.1的方法进展测定。按下式进展计算总黄酮提取率。总黄酮提取率%=1/(V1/V21000)100%1=检测样品相当于标准芦丁的黄酮含量,g=样品质量,gV1=检测样品稀释液体积，lV2=样品稀释液总体积，l2结果与分析2.1乙醇体积分数对鼠曲草总黄酮提取的影响在微波炉功率500，料液比

9、150(g/l)，微波作用时间3in的条件下，不同乙醇体积分数对鼠曲草总黄酮提取率的影响规律见图2。图2乙醇体积分数对鼠曲草总黄酮提取的影响略由图2可以看出，在微波作用下，黄酮的提取率随乙醇体积分数的增加而进步。当乙醇体积分数增加到一定值时提取率反而降低，这是因为高体积分数的乙醇沸点较低，易挥发，局部黄酮也随着蒸气被带出。2.2料液比对鼠曲草黄酮提取量的影响在微波炉功率500，乙醇体积分数10%，微波作用时间3in的条件下，不同料液比对鼠曲草黄酮提取率的影响规律见图3。图3料液比对鼠曲草黄酮提取的影响略由图3可知，黄酮提取率随溶剂量的增加先升高再降低，在料液比为l60(g/l)时，黄酮提取率出

10、现峰值。这是由于微波辐射的能量使黄酮超微构造特性遭到破坏而溶于水中。料液比相对较小时，鼠曲草吸收的微波能量相对较多，细胞破碎的程度就比拟好，溶解的黄酮就多；而溶剂体积过大时，吸收的能量相对减少，细胞破碎程度相对减小，因此黄酮溶解量也相应减少。2.3作用时间对鼠曲草黄酮提取量的影响在微波功率500，乙醇体积分数10%，料液比为150(g/l)的条件下，不同微波作用时间对鼠曲草黄酮提取率的影响规律见图4。由图4可知，黄酮提取率随微波作用时间的延长先升高再降低，这可能是因为微波在短时间内对细胞膜的破碎作用就比拟大，溶出物多，黄酮提取率也就高。随时间增加样品中黄酮类化合物可能会受到破坏，影响黄酮物质的

11、浸出。转贴于论文联盟.ll.图4微波作用时间对鼠曲草黄酮提取量的影响略2.4功率对鼠曲草黄酮提取量的影响在乙醇体积分数为10%，料液比为150(g/l)，微波作用时间为2in的情况下，不同微波炉功率对鼠曲草黄酮提取率的影响规律见图5。图5微波功率对鼠曲草黄酮提取量的影响略由图5可知，随着微波功率的增大，总黄酮提取率先升高再降低，这可能是因为随着微波功率不断增加,分子运动加剧，细胞膜破碎程度加大，黄酮浸出率也随着升高；但细胞膜并不会无限制破碎，当微波炉功率太大时，微波对细胞内物质的选择性加热性能差异那么减小，一些易溶于水的物质先被溶解，从而造成黄酮提取率的降低。2.5优化工艺的正交实验为了优化提

12、取工艺，根据单因素实验结果，将影响黄酮类物质提取效果的微波功率，乙醇体积分数、作用时间、料液比定为实验因素，每个因素3个程度，选择L934正交表进展实验因素程度见表1，以总黄酮提取率为指标。结果见表2。表1正交实验因素程度略极差越大，因素影响越大。由表2可知，影响提取效果的各因素主次顺序为：ADB，即：作用时间乙醇体积分数料液比微波功率。结果说明，提取工艺的最正确工艺条件为：A2B23D3，即：微波作用时间5in，乙醇体积分数15%，料液比160(g/l)，微波功率70%。由于最正确组合没有在正交实验中出现，因此进展3次验证实验。在此最正确参数组合条件下，黄酮提取率为4.72%，提取率大于试验

13、表中的任一组合。2.6微波提取法与索氏提取法提取率的比拟按正交实验确定的最正确微波提取条件提取鼠曲草中的黄酮类化合物，并与索氏提取法进展提取率的比拟(见表3)。表3微波提取法与索氏提取法进步率的比拟。结果见表3。表2正交试验及结果略表3微波提取法与索氏提取法进步率的比拟略由表3可见，与索氏提取法相比，微波提取技术大大缩短了提取时间，而且提取率有所增加，可见，微波提取法节能、省时、高效。3结论微波提取技术用于鼠曲草总黄酮的提取是可行的，它具有省时、高效、节能等优点，提取效率优于索氏提取法，微波提取鼠曲草总黄酮的最正确工艺条件为：微波作用时间5in，乙醇体积分数15%，料液比160(g/l)，微波

14、功率700。该工艺条件的研究为鼠曲草总黄酮提取的工业化消费建立了理论性根底，具有实际指导意义。参考文献：1江苏新医学院.中药大辞典，下册.上海：上海人民出版社,1979：2501.2王成章，陈祥银杏叶中黄酮类化合物及其分析方法J.林产化工通讯，1998，3：83.3张鞍灵，高锦明，王妹清黄酮类化合物的分布及开发利用J.西北林学院学报，2000，15(1)：69.4ZhaEL，GaiQQ，ZhangHR，InvestigatinfiraveassistedextratinfseabukthrnflavnidsJ.FdFerentInd(食品发酵与工业)，2022，30(12)：148.5YueE，JiangTF，ShiYPFastdeterinatinfflavnidsinHip