药物的杂质检查总结

1、第三章药物的杂质检查杂质（forin、impurities）是指：有毒副作用的物质本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质药物中杂质的来源生产过程中引入（1）原料、反应中间体及副产物（2）试剂、溶剂、催化剂类（3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质贮藏过程中产生水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等药物中的杂质按来源分为一般杂质（generalimpurities）如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化

2、物、炽灼残渣等。一般杂质的检查方法收载在中国药典的附录中。特殊杂质（special impurities）：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质， 如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的有关物质。特殊杂质检查方 法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。杂质限量：指药物中允许杂质存在的最大量，通常用百分之几或百万分之几来表示药物的杂质检查法1.对照法限量检查法（Limit Test）特点：不需知道杂质的准确含量灵敏度法系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。特点：不需对照物质比较法含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸光度、pH值等。特点：

3、准确测定杂质的量，不需对照品杂质限量的计算杂质限量允许杂质存在的最大量供试品量杂质限量的计算杂质限量允许杂质存在的最大量供试品量杂质限量=杂质限量=标准溶液体积X标准溶液浓度供试品量V - C L =x 100%S一般杂质检查规则药品检验操作标准规定：遵循平行操作原则（1）仪器的配对性：如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导 气管长度及孔的大小要一致（2）对照品与供试品同步操作正确的比色、比浊方法检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份 氯化物检查法（一）原理对照法药物：Cl- + AgNO3 HN03 AgCl 白色浑浊对照：NaCl（C, V）+

4、AgNOhno3 AgCl 白色浑浊3检查方法药典附录除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml （溶液如显碱性，可滴 加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml纳氏比色管中，加 水使成约40m1，摇匀，即得供试溶液。另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml 纳氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0m1，用水稀释使成50m1，摇匀，在暗 处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得测定条件标准NaCl溶液10口gCl-/ml，50ml溶液中含5

5、080瞄的Cl-所显浑浊梯度明显，相当于 标准NaCl溶液58ml。反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。加硝酸的目的：（1）加速AgCl浑浊的形成；（2）产生较好的乳浊；（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。试剂：硝酸银供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。平行操作原则干扰及排除若供试品有色，需经处理后方可检查。（1）内消色法：倍量法如枸橼酸铁铵中氯化物的检查。2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原

6、褪色后再依法检查。碘化物中氯化物的检查不溶于水的有机药物（1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。（2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。（3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。硫酸盐检查法一）原理对照法药物：SO2-+ BaCl hci BaSO白色浑浊对照：K2SO4（c、V）+ BaCl2 hci BaSO4白色浑浊测定条件标准K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.10.5mg所显浑浊梯度明显，相当于标准 K2SO4 溶液 1 5ml。反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜试剂：氯化钡供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，

7、使生成白色浑浊而不是白色沉淀比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。干扰及排除若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。铁盐检查法硫氰酸盐法原理对照法药物:L+皿Fe3+ +6SCN- HC1 lFe(SCN) L 红色Fe3+6对照：Fe3+(C、V)+ 6SCNHCt- Fe(SCN)6L-红色检查方法药典附录除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml，移置50ml纳氏比色管 中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml， 再加水适量稀释成50ml，摇匀；如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液(取各 药品项下规定量的标

8、准铁溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成25ml，加稀盐酸4ml与 过硫酸铵50mg，用水稀释使成35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml， 摇匀)比较，即得测定条件1)用FeNH4(SO4)2.12H2O (硫酸铁铵)配制标准铁贮备液(加入硫酸防止Fe3+的水解)， 标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液10艇Fe3+/ml，50ml溶液中含1050瞄的Fe3+ 显色梯度明显，一般取标准铁溶液1.05.0ml反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml为宜。试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行检查 Fe2+和 Fe3+铁盐检查时，

9、加过硫酸铵可氧化Fe2+为Fe3+，同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分 解褪色。加硝酸后加热也可氧化Fe2+为Fe3+比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。干扰及排除为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层 比色。具环状结构的有机药物，需经700800C炽灼破坏处理后再依法检查。干扰离子的影响重金属检查法以铅为代表第一法硫代乙酰胺法1. 原理 对照法CH CSNH + H O- pH3.5 r CH CONH + H S322322药物：Pb2+ + H S pH3.5 PbS黄色棕黑色对照：PbNO3(c. V)+ H2S PH3.5 PbS黄色棕黑色适用

10、于溶于水、稀酸和乙醇的药物。测定条件用硝酸铅配制标准铅贮备液(加硝酸防止Pb2+水解)，标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅溶液10|ig Pb2+/m 1，适宜比色范围为27ml溶液中含1020瞄的Pb2+。本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值为33.5。显色剂：从Ch.P (1990)开始改用硫代乙酰胺做显色剂干扰及排除1)供试品如有色，需经处理后方可检查。外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。内消色法改用第四法，微孔滤膜过滤法若供试品中有微量Fe3+存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或 盐酸羟胺(0.51.0g)还原Fe3+为Fe2+，

11、可消除干扰3)若供试品为铁盐，Fe3+在盐酸中生成HFeCl，用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法检查若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如ZnSO4中重金属的检查，要在碱性下加KCN掩蔽Zn2+后，依第三法检查第二法炽灼残渣法适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。原理 对照法500600 C炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。操作方法样品：S置坩蜗中- 500600C炽灼残渣 残渣HNO 3、A HC1、A 氯化物h2o NR电0调节至pH7.0左右一PH3 5缓冲液2 0ml 依一法检查对照：空坩蜗H2SO4、A HNO

12、3、A HC1、A nh3 h2o、a _H2O _标准Pb(no3)2溶液 一pH3 5缓冲液2 0ml 依一法检查含钠及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿(因可腐蚀瓷坩埚，带入大量 重金属)第三法硫化钠法适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。原理对照法药物：Pb2 + + Na S NaOH PbS黄色棕黑色对照：PbNO3 J V)+ Na2S NaOH PbS黄色棕黑色测定条件NaOH碱性条件下显色剂：硫化钠砷盐检查法(一)古蔡法原理 对照法Zn + HCl H2 + AsO3- AsH3 个遇HgBr2试纸生成黄色棕色的砷斑，与2ml标准

13、砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较操作方法标准砷斑用2ml标准砷溶液制备供试品需经有机破坏，则标准砷溶液应平行操作测定条件标准砷溶液临用新配，川gAs/ml。酸为反应物，酸量应足够，所以加浓盐酸5ml。酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是：还原As5+为As3+，加快反应速度；碘化钾被氧化生成的I2又可被氯化亚锡还原为I-，I-与反应中生成的Zn2+能形成稳定的 配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生；可抑制微量Sb的干扰，在实验条件下，100 jigSb存在不干扰。醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰，醋酸铅棉花60mg装

14、管高度6080mm。锌粒应无砷砷斑不稳定，应立即观察干扰及排除供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加HNO3，A，使氧化成硫酸盐，以 除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将Fe3+还原为Fe2+。如枸橼酸铁铵中 砷盐的检查。具环状结构的有机药物，要先行有机破坏后再进行检查。常用的有机破坏方法：碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查本法适用于不含Sb或含Sb量小于100瞄的供试品。（二）Ag-DDC法检查、含量测定1.原理：对照法Zn + HCl H2 + AsO3- AsH3 个AsH3 + 6Ag（DDC）As（DDC）

15、+ 6Ag（红色）+ 3HDDC直接比色或于510nm波长处测定吸收度，进行比较。用有机碱吸收反应产生的HDDC有利于反应的进行。USP（29）用毗啶，Ch.P（2005）用 三乙胺。本法适用于含Sb量小于500口g的供试品。（三）白田道夫法 Ch.P（2005）含Sb药物中砷盐的检查如葡萄糖酸锑钠原理 对照法As3+、As5+ SnCl 一HCl 2As （棕褐色的胶态砷）炽灼残渣检查法检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的无机杂质（金属氧化物或无机盐类）。原理样品炭化后+ H2SO4湿润一700800C炽灼至恒重一炽灼残渣（硫酸灰分）限量一般为0.1%0.2%操作方法样品+炽灼至恒

16、重的坩蜗- 直火缓缓加热至全部黑色、无烟雾，放冷H 2 S O4 0 51m l湿润，直火加热 至H2SO4蒸气除尽血榆浦温灼烧 残渣（恒重）炽灼残渣 =残渣及坩埚重-空及埚重X100% 供试品重注意事项供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定。含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚若残渣需留作重金属检查，则500600C炽灼至恒重。加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化溶液颜色检查法控制药物中有色杂质限量的方法。第一法 目视比色法 即与标准比色液比较的方法，全波长范围定性观察观察方法r平视颜色较深时从上向下颜色较浅时第二法 分光光度法 单一波长定量第三法 色差计法 全波

17、长范围定量易炭化物检查法检查药物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有机杂质方法：H2SO4炭化后与对照液比较。对照液：“溶液颜色检查”项下的标准比色液；由比色用氯化钻液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液；高锰酸钾液比色：同置白色背景前，平视观察比较。澄清度检查法检查药物中的微量不溶性杂质，用作注射剂的原料药一般应作此项检查。1. 检查方法 对照法供试品T供试品溶液比较规定级号的浊度标准液溶剂：水、酸、碱、有机溶剂有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水”干燥失重测定法干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水分，也包括其它挥发性物质。测定方法：常压

18、恒温干燥法适用于受热较稳定的药物。干燥温度一般为105 Co干燥失重：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行。炽灼残渣：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼0.5h后进行。干燥剂干燥法适用于受热易分解或挥发的供试品。干燥剂：无水氯化钙、硅胶、P2O5。减压干燥法适用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除的药物。除另有规定外，压力应在2.67kPa (20mmHg)以下。残留溶剂测定法残留溶剂测定法药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的， 但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。药品中常见的残留溶剂(第一、第二、第三类溶剂)的残留限度应符合规定。对其他溶剂， 应根据生产工艺的特点，制定相应的限度，使其符合产品规范、药品生产质量管理规范(GMP)或其他基本的质量要求。检查方法中国药典采用气相色谱法检查残留有机溶剂1.色谱柱毛细管柱填充柱 直径为0.250.18mm的二乙烯苯一乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他适 宜的填料