诊断学-骨髓细胞学检查课件

1、骨髓细胞学检查骨髓细胞学检查目的和要求掌握骨髓穿刺的适应证血细胞的发育规律了解骨髓检查的方法和内容细胞免疫分型熟悉骨髓检查的临床应用常见细胞化学染色目的和要求掌握骨髓穿刺的适应证了解骨髓检查的方法和内容熟悉骨血象分析我们该做什么检查？血象分析我们该做什么检查？特殊的临床检验 -骨髓液制成涂片染色,观察细胞的数量、形态 -结合临床和血象等资料 -明确诊断、协助诊断、观察疗效、判断预后 或排除某些疾病血液系统疾病诊断和鉴别诊断的重要手段之一骨髓细胞学检查特殊的临床检验骨髓细胞学检查 骨髓检查 诊断、辅助 诊诊断血液 系统疾病 诊断、辅助骨髓穿刺适应证外周血象成分及形态异常不明原因发热,肝、脾、淋巴

2、结肿大骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜、血沉明显增加等化疗后疗效观察骨髓活检、免疫分型、染色体核型分析、微生物及寄生虫学检查骨髓穿刺适应证外周血象成分及形态异常骨髓？骨髓？ 骨髓:位于骨松质腔隙中的一种海绵样、胶状组织 骨髓分类：红骨髓（造血细胞）、黄骨髓（脂肪细胞） 骨髓组成：结缔组织、血管、神经及造血实质细胞 造血微环境：由血管系统、神经系统、基质细胞（血管外膜细胞、脂肪细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞、网状细胞等）和细胞外基质构成,造血干细胞赖以生存的场所。 骨髓:位于骨松质腔隙中的一种海绵样、胶状组织 骨髓胶状、海绵样组织红骨髓各种造血细胞微环境骨髓组成及细胞生成骨髓胶状、海

3、红骨髓各种造血细胞微环境骨髓组成及细胞生成多能（向）造血干细胞髓系干细胞淋巴系干细胞红系祖 细胞粒-单系祖细胞巨核系祖细胞嗜酸粒系祖细胞原红细胞早幼红 细胞中幼红 细胞晚幼红细胞网炽红细胞嗜碱粒系祖细胞原粒细胞T-淋巴系祖细胞B-淋巴系祖细胞原浆细胞原单细胞原巨核细胞原粒细胞原粒细胞原淋巴 细胞幼淋巴 细胞淋巴细胞早幼粒 细胞晚幼粒细胞中幼粒细胞杆状细胞幼单细胞单核细胞幼巨核细胞颗粒巨核细胞产版巨核细胞裸核巨核细胞血小板嗜酸早幼粒嗜酸中幼粒嗜酸晚幼粒嗜酸杆状 细胞嗜酸杆状 细胞嗜酸分叶 细胞嗜碱性早幼细胞嗜碱中幼细胞嗜碱晚幼细胞嗜碱杆状细胞嗜碱杆状细胞嗜碱分叶细胞淋巴细胞淋巴细胞浆细胞单核细胞

4、单核细胞杆状细胞分叶细胞网炽红 细胞红细胞幼浆细胞多能（向）造血干细胞髓系干细胞淋巴系干细胞红系祖粒-单系祖细血细胞发育演变图原始细胞幼稚细胞成熟细胞原幼成原始细胞、幼稚细胞及成熟细胞基本特点诊断学骨髓细胞学检查课件 胞体:较大 核仁:清晰,易见; 胞核:大、圆形、类圆形或不规则形；胞浆：少、蓝色（嗜碱性） 核染色质：细致，呈颗粒状； 颗粒：无或少许粒），核浆比增大。原始细胞 胞体:较大 幼稚细胞 胞体:中等大小; 核染色质：较粗； 胞核：圆形或类圆形； 核仁：多数无 胞质：增多,呈嗜碱性（蓝色）；颗粒：多数有颗粒 （有核红细胞例外） 幼稚细胞 胞体:中等大小; 核染色成熟细胞胞体:较小;胞核

5、：分叶、扭曲或有切迹（红细胞和血小板无核）胞质：多,淡蓝色、淡红色，核质比小（小淋巴细胞除外）核仁：无 ；染色质：粗；颗粒：有成熟细胞胞体:较小;血细胞发育成熟的一般规律项目原始幼稚成熟备注细胞大小胞质量胞质嗜碱性胞质颗粒胞核大小核形态核染色质核仁核质比例大小少多强弱无少多大小圆形凹陷分叶细致粗糙，疏松致密有无大小早幼粒细胞比原粒细胞大，巨核细胞由小变大小淋巴细胞除外红系从深蓝灰蓝灰红淡红色红系小淋巴无颗粒，粒系三种颗粒成熟红细胞核消失有的成熟细胞呈类圆形、不规则形小淋巴细胞核质比大血细胞发育成熟的一般规律项目原始幼稚成熟备注细胞大小大骨髓细胞学检测的临床应用诊断造血系统疾病 白血病、恶组、M

6、M、AA、MA、戈谢病、尼曼病、海蓝组织细胞增生症、MDS等。辅助诊断某些疾病 恶性肿瘤细胞骨髓转移、淋巴瘤骨髓浸润,骨髓增生异常综合征、骨髓增生性疾病、IDA、溶血性贫血、脾亢、ITP提高某些疾病的诊断率 疟原虫、黑热病、噬血细胞综合征、SLE骨髓细胞学检测的临床应用常见血液系统疾病各种贫血:IDA、MA、HA、AA、MDS各种类型的白血病：AL(AML,ALL),慢性白血病（慢粒,慢淋等）多发性骨髓瘤、淋巴瘤类脂质疾病：戈谢病，尼曼-匹克病，海蓝组织细胞综合征白血病：骨髓中原始细胞20%常见血液系统疾病各种贫血:IDA、MA、HA、AA、MDSM1M3M2M4M1M3M2M4L2M5L1L

7、3L2M5L1L3戈谢病MMM6尼曼-匹克病戈谢病MMM6尼曼-匹克病CLLCMLITPM7CLLCMLITPM7AAIDAMAHAAAIDAMAHA 骨髓细胞学检验的方法和内容低倍镜观察-取材、涂片、染色-有核细胞增生程度-计数巨核细胞-有无异常细胞油镜观察-分类计数-形态变化结果计算-各类细胞%-粒红比值描述-骨髓象-血象分析与报告-增生程度-粒红比值-各系数量、形态-综合分析-出具报告病例归档-申请单-涂片-报告单 骨髓细胞学检验的方法和内容低倍镜观察油镜观察结果计1、低倍镜观察 (1)判断骨髓涂片质量:观察涂片厚薄、骨髓小粒多少、油滴、色泽等,选择满意的区域进行有核细胞分类、计数涂片和

8、取材A-涂片比较:上下两张太短或太长,不符 合要求;中间的涂片长短厚薄适宜且片 膜居中，符合要求。B-下面的涂片取材较好，有较多骨髓小粒染色比较A-偏酸,细胞核、颗粒结构不清楚，红细 胞染色偏红B-较好，细胞核结构、颗粒、胞浆染色好 、红细胞染粉红色C-偏碱，细胞核、胞浆染色太深，细胞不 易辨认，红细胞染成蓝色观察部位的选择A-涂片头部细胞密集、细胞染色差,结构不 清，不能识别B-涂片体尾交界处细胞分布均匀、细胞染色 较好，是合适的细胞形态观察部位C-涂片尾部细胞破损、变形，不合适观察1、低倍镜观察涂片和取材A-涂片比较:上下两张太短或太长, (2)判断骨髓增生程度 -骨髓中有核细胞的多少反映

9、出骨髓增生程度 -采用五级分类法 分级有核细胞有核细胞数 临床意义 红细胞一个高倍镜视野 增生极度活跃 增生明显活跃 增生活跃 增生减低 增生极度减低 1: 1 1：10 1：20 1：50 1：200 100 50100 2050 510 3+ 4+-RAS:环形铁粒幼细胞15%常用骨髓细胞化学染色SE染色AE染色PAS染色Fe染色M1-POXM2-POXALL-POXM5-POXALL-POXM4-POXM5-POXM3-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXALL-CEM3-CEM1-CEM3-CEM1-AE+NaFM1-AEM5-AE+NaFM5

10、-AEM1-POXM2-POXALL-POXM5-POXALL-PNAP化脓菌感染-NAPCML-NAPALL-NAPNAP化脓菌感染-NAPCML-NAPALL-NAPL2-ACPc单核细胞-PASb巨核细胞-PASa成熟粒细胞-PASALL-PAST急淋-ACPCLL-PAS红色粗颗粒状阳性M6-PASMA-PASd幼红细胞-PASL2-ACPc单核细胞-PASb巨核细胞-PASa成熟粒细胞IDA铁染色:细胞内铁阴性,幼红细胞内未见铁颗粒铁粒幼红细胞环形铁粒幼红细胞铁粒幼红细胞IDA铁染色:细胞外铁阴性,IDA铁染色:细胞内铁阴性,幼红细胞内未见铁颗粒铁粒幼红细胞急性白血病细胞化学染色特点

11、细胞化学染色 急淋 急粒 急单 红白血病 M7POX - -/+ -+ +(粒细胞） -SB - + -+ +(粒细胞） -AS-D NCE - + -+ +(粒细胞） -NAE - -+ + +(单核细胞） -NAE+NaF - 不被NaF抑制 被NaF抑制NAP N或PAS + 粗颗粒状/块状 - /+弥漫红色 -/+弥漫红色 +（幼红细胞 ） +急性白血病细胞化学染色特点细胞化学染色 细胞免疫分型 用单克隆抗体及免疫学技术对细胞膜表面和（或）细胞质存在的特异性抗原进行检测,借以分析细胞所属系列，分化程度和功能状态的一种方法。检测方法1、免疫荧光法用荧光素标记的单克隆抗体,在一定条件下与细

12、胞表面的分化抗原结合，经激发光照射产生荧光。借助流式细胞仪观察荧光抗原。有荧光者为阳性，无荧光者为阴性2、免疫酶染色法细胞免疫分型 用单克隆抗体及免疫学技术检测方法细胞免疫分型的临床应用T淋巴细胞亚群检测全T细胞-CD3、CD4和CD8T细胞 -TH(CD4+、CD8-） -TS(CD4-、CD8+)CD4+/CD8+:机体免疫状态、疾病诊断、病情分析、监测治疗和判断预后白血病免疫分型1、明确诊断ALL和AMLALL-CD2CD5CD7CD10CD19CD20AML-CD13CD33MPOCD15CD14HLA-DR2、确定ALL的细胞类型（B细胞或T细胞）和ALL的分化阶段3、鉴定AML的特

13、征4、少见类型的白血病,M6、M7、M0、双表型、CLL、毛白、MM白血病微小残留病检测完全缓解的白血病,出现CD19、CD22、CD10、CD7、CD5、CD13、CD37、CD34等任何一种抗原阳性同时伴有TdT+可诊断微小残留存在。敏感性达10-4细胞免疫分型的临床应用T淋巴细胞亚群检测白血病免疫分型白血病ALL与AML的免疫表型特点 CD19 CD7 CD33 CD13 HLA-DR TdTB-ALL + - - - + +/-T-ALL - + - - -/+ +AML - -/+ + + + -ALL与AML的免疫表型特点 CD19 急性淋巴细胞白血病的免疫表型特点 系列 亚型 主要的蛋白标记B系列 早期B型 CD19+,CD10- 普通型 CD19+,CD10+ 前B型 CD19+，胞质链+ 系列 亚型 主要的蛋白标记T系列 B细胞型 CD19+，胞膜Ig+ 前T型 CD7+,CD2- T细胞型 CD7+,CD2-急性淋巴细胞白血病的免疫表型特点 系列 亚型 急性髓细胞白血病的免疫分型亚型 典型的