利用紫外光谱测定黄酮类化合物的结构

1、一、利用紫外光谱测定黄酮类化合物的构造大部分黄酮类化合物在甲醇中的紫外汲取光谱由两个主要汲取带构成。出此刻300?400nm之间的汲取带称为带I,出此刻240?280nm之间的汲取带称为带口。不一样样种类的黄酮化合物的带I或带n的峰位、峰形和汲取强度不一样样，因此从紫外光谱可以推测黄酮类化合物的构造种类。构造种类峰位（nm）组内差异组间差异带I带n（峰位）（峰强）黄酮310?350250?280带I不一样样、H皆强黄酮醇350?385250?280异黄酮310?330（肩峰）245?275带n不一样样I弱H强二氢黄酮（醇）300?330（肩峰）275?295查耳酮340?390230?270（

2、低强度）橙酮380?430230?270带I不一样样I强H弱（低强度）当向黄酮类化合物的甲醇（或乙醇）溶液中分别加入甲醇钠（NaOMe）、乙酸钠（NaOAc）、乙酸钠-硼酸（NaOAc-H3BO3）、三氯化铝或三氯化铝-盐酸（A1C13/HC1）试剂能使黄酮的酚羟基离解或形成络合物等，以致光谱发生变化。据此变化可以判断各样化合物的构造，这些试剂对构造拥有诊疗意义，称为诊疗试剂。黄酮和黄酮醇类（一）黄酮、黄酮醇类在甲醇中的UV光谱特色黄酮或黄酮醇的带I是由B环桂皮酰基系统的电子跃迁所惹起的汲取，带II是由A环的苯甲酰基系统的电子跃迁所惹起的汲取。黄酮和黄酮醇的UV光谱图形相像，仅带I地点不一样样

3、，黄酮带I位于304?350nm,黄酮醇带I位于358?385nm。利用带I的峰位不一样样，可以差异这两类化合物。黄酮、黄酮醇的B环或A环上取代基的性质和地点不一样样将影响带I或带n的峰位和形状。比方，7和4，位引入羟基、甲氧基等含氧取代基，可惹起相应汲取带向红位移。又如3-或5-位引入羟基，因能与C4=O形成氢键缔合，前者使带I向红位移，后者使带I、带H均向红位移。B环上的含氧取代基逐渐增加时，带I向红位移值（nm）也逐渐增加，但不能使带口产生位移。有时（比方3，4/-位有2个羟基或2个甲氧基或亚甲二氧基）仅可能影响带口的形状，使带II歧分为双峰或1个主峰（nb位于短波处）和1个肩峰（sh）

4、或曲折（na位于长波处）。A环上的含氧取代基增加时，能带口向红位移，而对带I无影响，或影响甚微（但5-羟基例外）。黄酮或黄酮醇的3-,5-或4-羟基被甲基化或昔化后，可使带I向紫位移，3-OH甲基化或昔化使带I（328?357nm）与黄酮的带I的波长范围重叠（且光谱曲线的形状也相像）,5-OH环基化使带I和带II都向紫位移5?15nm,4，-OH甲基化或昔化，使带I向紫位移3?10nm。其他地点上的羟基取代对甲醇中的紫外光谱几乎没有影响。|（二）利用诊疗试剂对黄酮、黄酮醇类化合物UV光谱的影响检出羟基地点.甲醇钠（NaOMe），主假如判断能否有4/-OH,3、4，一二OH或3、3,、4，一三O

5、H。2.乙酸钠，较为突出的是判断能否有7-OH。举例说明3.乙酸钠/硼酸主要判断A环或B环能否有邻二酚羟基（5,6-二OH除外）。举例说明4.三氯化铝及三氯化铝/盐酸，为判断有无邻二酚羟基，3-OH、5-OH供应信息。（三）异黄酮、二氢黄酮和二氢黄酮醇类在甲醇中的UV光谱特色这三类化合物都有苯甲酰系统，而无桂皮酰构造，因此它们的紫外光谱都有强的带II汲取,异黄酮带口汲取在245?270nm,而二氢黄酮和二氢黄酮醇的带II在270?295nm,一般只受A环的含氧取代基的影响，A环含氧取代基数增加，汲取峰向红位移。（四）利用诊疗试剂对异黄酮、二氢黄酮和二氢黄酮醇类化合物的UV光谱的影响判断羟基地点

6、.甲醇钠都带口向红位移，示A环上有羟基。如有5,6,7-或5,7,8-三羟基或3，4/-二羟基，则汲取带将随搁置的延伸而逐渐衰败。二氢黄酮、二氢黄酮醇带口向红位移的大小取决于能否有游离的5-OH。2.乙醇钠乙醇钠使7-羟基异黄酮的带II向红位移6?20nm，但6-位有含氧取代基时，乙醇钠几乎不可以使带口产生挪动。4,，5,6,7-四羟基异黄酮的紫外光谱随时间延伸而衰败。乙醇钠使5,7-二羟基二氢黄酮和5,7-二羟基二氢黄酮醇带II向红位移34?37nm,而其相应的5-去氧化合物则挪动51?58nm。5,6,7-三羟基二氢黄酮的紫外光谱随时间延长而衰败。3.乙醇钠/硼酸不可以用NaOAc/H3B

7、O3对异黄酮、二氢黄酮和二氢黄酮醇类的紫外光谱的影响来检查B环邻位二羟基，由于它们的B环与主要发色团缺少有效的共轴。但它们中的A环有6,7-二羟基时，加入NaOAc/H3BO3后使带向红位移10?15nm。4.三氯化铝和三氯化铝/盐酸异黄酮、二氢黄酮（可能也包括二氢黄酮醇）的A环如有邻二羟基（6,7-或7,8-,不包括5,6-）,则带II在AlCl3中比在AlCl3/HCl中向红位移11?30nm。有5-羟基的异黄酮，其带II在AlCl3/HCl存在下与在甲醇中的光谱比较,向红位移10?14nm，而有5-羟基的二氢黄酮和有5-羟基的二氢黄酮醇类的带II在相同情况下向红位移20?26nm。目标检

8、测：黄酮类化合物的鉴识与构造测定此刻多依靠于谱学的综合解析，而化学方法和色谱方法已降至协助地位。未知黄酮类化合物的判断，多在测定分子式的基础上，利用PPC或TLC获得的Rf值或hRf值与文件比较或解析比较样品在甲醇溶液中及加入各样诊疗试剂后获得的紫_外及可见光谱进行解析。同时，关于化合物的颜色反响，以及在提取分别过程中所表现的行为（如溶解度、酸或碱中的溶解情况、铅盐积淀等）也应注意解析。但这些方法均有必定局限性，并曾以致得出过一些错误结论。质子核磁共振（1HNMR）由于可定量测定H的个数，以及依照质子的化学位移和芬芳氢核之间的自旋巧合所供应的信息（裂分数目及巧合常数大小），可确定黄酮母核上的取

9、代模式。近出处于仪器分辨率的千锤百炼，加以同核去偶、溶剂位移以及核磁共振技术的使用，1H-NMR谱的测定对解析天然黄酮类化合物的构造已经成为一种特别重要的手段。可是正如此后谈到的那样，在黄酮类化合物的1H-NMR谱上，有时要想的确指认每个信号其实不是一件简单的事情。比方当黄酮类母核的A-环上只有一个芬芳氢核时，要想与H-3信号差异，就是十分困难的问题。解决这种问题，13C核磁共振(13C-NMR)技术有很大的优势。加上各样取代基位移及昔化位移效应的发现，使得图谱的解析工作大大简化。因此，13C-NMR技术在黄酮类化合物的构造判断中发挥着越来越重要的作_用。质谱(MS)技术，特别场解析质谱(FD-MS)与迅速原子轰击质谱(