遗传学实验果蝇杂交设计书

1、遗传学实验果蝇杂交设计书遗传学实验果蝇杂交设计书一、单因子试验1、实验原理分离定律（law of segregation）也称孟德尔分离定律。一对 基因在杂合状态下不互相影响，各自保持相正确独立性，而在形 成配子的时候，就会互相分开，并按照原样分配到不同的配子中 去。在一般情况下，配子的理论分离比是1:1，子二代（匚）的基 因型分离比是1:2:1，若显性完全，七的表型分离比是3:1。杂种 后代分离出来的隐性基因纯合体与原来隐性亲本在表型上是一样 的，隐性基因并不因为和显性基因在一起而改变它的性质。单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。野生型果蝇是长翅 （+/+），其长翅超出腹部末端约 1/3.残

2、翅果蝇的双翅已经退 化，只留下少量残迹（vg/vg），无飞翔能力。Vg的基因座位于 第二染色体67.0,。对长翅（+）完全隐性。用野生型长翅果蝇与残翅果蝇杂交，子一代（F1）全是长 翅。子一代系内交配，子二代产生性状分离，长翅：残翅为 3:1,。基因型为+/vg （长翅）雌雄均可产生两种配子+和vg，而且各 占1/2,。简单列表可知七的性状比为3:1。表1果蝇杂交实验的配子及双翅形状的遗传 JE疽配子 1F必配子1/2 +1/2 vg1/2 +14 +/+1/4 +/vg长翅长翅1/2 vg14 +/vg 长翅1/4 vg/vg 残翅2、实验步骤确定杂交亲本，挑选处女蝇。选用2#与18#为亲本

3、进行杂交实验。选用野生型长翅和突变型残翅果蝇为杂交亲本。雌蝇一定要选 处女蝇。处女蝇的挑选方法：亲本饲养2周之后，提前1012小 时把培养瓶内所有活的成虫倒干净，然后在倒掉成虫的12小时内 吧新羽化的成虫倒出来，装进消毒过的培养瓶或者平底试管进行 适度麻醉，麻醉后放在消毒过的白瓷板或者硬纸板上把雌雄蝇分 别挑出，雌蝇即为处女蝇。根据实验所需处女蝇数量的多少，可 连续收集，但不要超过3天。配好杂交组合，进行正、反杂交。正交组合：野生型长翅(早)X突变型残翅(&)。用消毒过 的毛笔把34只长翅处女蝇扫入培养瓶中，然后把培养瓶水平放 置，一面麻醉状态下的果蝇沾到培养基或水珠而被闷死，随机用 同样方法

4、扫入34 只残翅雄蝇，塞紧棉塞，贴好标签，保持水平 直至果蝇苏醒后放入25C恒温培养箱中培养。反交组合：将亲本性别交换。培养7天之后把亲本果蝇成虫全部倒出来处死。再过7天F1成蝇出现，把F1成蝇转移到经过消毒的空瓶子 里进行适度麻醉，观察F1翅形的变化，并把结果记录。把56对适度麻醉的F1转入另一培养瓶，标明信息。表2正、反交F1果蝇翅形观察结果记录表察结果 统计日矿长翅早X残翅&残翅早X长翅&长翅数残翅数长翅数残翅数合计(5)过7天，F1成虫倒出处死，培养基继续培养。(6)过7天，F2成虫出现，开始观察，能够连续观察7天左右，往后可能有F3成虫出现，因此观察时间不要超过8天。记录数据，观察过

5、的成虫集中处死。表3正、反交F2果蝇翅形观察结果记录表-察 结果 统计日期长翅早X残翅&残翅早X长翅&长翅数残翅数长翅数残翅数合计(7)处理数据，并进行卡方检验，来确认是否符合理论猜测比值。表4实验结果X2测验表观察结果长翅(+ )正交、反交合 并残翅(vg)正交、反交合 并合计实验观察数(O)预期数3:1 (C)偏差(O-C)(O-C) 2C3、实验预期结果F1全部为长翅果蝇，而且正反交结果一样。F2出现翅形的性状分离，而且数量比大约符合长翅：断翅 为3:1，且正反交结果类似。经过卡方检验证明实际分离比与理论分离比一致。二、两对基因自由组合实验1、实验原理由非同源染色体上的两对等位基因所决定

6、的两对相对性状，在 杂种第二代是自由组合的。根据孟德尔第二定律，一对基因的分 离与另一对（或者另几对）基因的分离是独立的。一对基因所决 定的性状在杂种第二代是3:1，两对不连锁的基因所决定的形 状，在杂种第二代就呈9:3:3:1，黑檀体果蝇（e）的体色乌黑， e的基因座位于3号染色体70.7；与e相对应的野生型性状是体 色灰黄。残翅果蝇（vg）的双翅几乎没有，只能看到少量残迹， vg的基因座位于2号染色体67.0；与vg相对应的野生型是长 翅。由于e和vg位于不同源的染色体上，因此两对基因杂种在形 成生殖细胞的时候，会产生4种不同类型的配子，其理论比例为 1:1:1:1。如果子一代系内杂交，4种&配子和4种早配子可形成 16种组合的合子，其中9种组合为长翅灰黄体，3种为黑色长 翅，3种为灰体残翅，1种组合为黑身残翅。配子 早配子ff-r+/ +/+/ e/vg/ +/Vg/ e/+/ +/+/+ +/+/+ +/e+/vg +/+/vg +/e+/ e/+/+ +/e+/+ e/e+/vg e/+/vg e/evg/ e/+/vg +/+/vg e/+vg