基因工程以及其应用

1、关于基因工程及其应用 第1页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四从大肠杆菌说起质粒基因大肠杆菌能合成人的胰岛素吗？能合成干扰素吗？第2页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四从大肠杆菌说起胰岛素每100kg 猪或牛的胰腺中提取 45g胰岛素 79年，利用大肠杆菌的DNA分子重组，2000L培养液 提取100g ， 相当于2吨猪胰腺中提取的量 第3页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四从大肠杆菌说起干扰素：一千克纯的干扰素价值可达440亿美元。 传统生产方法：血液中提出白细胞，然后用病毒去感染它，这时会产生干扰素， 1个细胞最多生产100100

2、0个干扰素分子 基因工程：改造的大肠杆菌发酵生产：一天内便可生产20万个干扰素分子。 1KG培养物中可以得到2040mg干扰素第4页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四一、基因工程分子水平改变生命 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。这种技术是在生物体外，通地对DNA分子进行人工剪切和拼接，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生人类所需要的基因产物。 通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状（目的）。 第5页，共52页，202

3、2年，5月20日，8点14分，星期四基因的剪刀限制性内切酶（简称限制酶） （一）基因操作的工具 限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。 特点：特异性。 即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。第6页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四基因的剪刀限制性内切酶（简称限制酶） 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。限制酶第7页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四基因的剪刀限制性内切酶（简称限制酶）限

4、制酶第8页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。第9页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四基因的针线DNA连接酶（二）基因操作的工具 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。磷酸二酯键第10页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)？（二）基因操作的工具导入过程需要运输工具运载体。运载体的作用有哪些？

5、作用一：作为运载工具，将外源基因(抗虫基因)转移到受体细胞(棉花细胞)中去。作用二：利用运载体在受体细胞(棉花细胞)内，对外源基因(抗虫基因)进行大量复制。第11页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四基因的运载工具运载体：常用的运载体主要有两类： 1）细菌细胞质的质粒 2）噬菌体或某些动植物病毒第12页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四质粒： 质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中核区外的DNA分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中核以外的DNA分子。 质粒是基因工程最常用的运载体。 绝大多数细菌质粒都是闭

6、合环状DNA分子。有的一个细菌中有一个，有的一个细菌中有多个。第13页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四大肠杆菌的质粒： 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。 质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内成。第14页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四四个基本步骤：（三）基因操作的基本步骤1）提取目的基因2）目的基因与运载体结合3）将目的基因导入受体细胞4）目的基因的检测和表达第15页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四目的基因（三）基因操作的基本步骤 目的基因是人们所需要转移或改造

7、的基因。 如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。直接分离基因人工合成基因目的基因的提取方法第16页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四（三）基因操作的基本步骤步骤二：目的基因与运载体重组 1）用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。 2）用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。 3）将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子（重组质粒） 目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。第17页，共52页，202

8、2年，5月20日，8点14分，星期四（三）基因操作的基本步骤常用的受体细胞： 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。将目的基因导入受体细胞的原理借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。步骤三：目的基因导入受体细胞第18页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四（三）基因操作的基本步骤步骤四：目的基因的检测和表达四环素抗性基因氨苄青霉素抗性基因第19页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四 不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。（三）基因操作的基本步骤受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗？若不能表达，要对抗虫基因再进行

9、修饰。第20页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四二、基因工程的应用运用基因工程技术，不但可以培养优质、高产、抗性好的农作物及畜、禽新品种，还可以培养出具有特殊用途的动、植物。生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼(中国)乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)1、基因工程与作物育种第21页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转鱼抗寒基因的番茄转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯不会引起过敏的转基因大豆第22页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四转基因龙胆花色奇异转基因蓝猪耳改变花色转基因牵牛花改变了花色第23页，共52页，20

10、22年，5月20日，8点14分，星期四A：紫外光照射下的转绿色荧光蛋白的 Eustoma (Lisianthus) 花。B：转没有绿色荧光蛋白的空质粒的花，第24页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四会发光的转基因鱼第25页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠导入人基因具特殊用途的猪和小鼠超级动物特殊动物图为2001年12月底出生的5只可爱的转基因克隆小猪。据培育者英国PPL医疗公司称，这些转基因小猪将为研究和“生产”适用于人体移植手术使用的动物器官提供巨大的帮助。 第26页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星

11、期四首只转基因猴诞生，人类未来忧喜参半第27页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四2、 2002年，中国转基因棉花达到150万公顷，已经占到棉花产量的13. 我国大豆食用油近七成是“转基因”产品 与杂交育种、诱变育种相比较，基因工程育种的优点有哪些？目的性强、克服远源杂交不亲和性、育种周期短第28页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四 1993年我国科学工作者培育成的抗棉铃虫的转基因抗虫棉，其抗虫基因来源于（ ）A、普通棉花的基因突变B、棉铃虫变异形成的致死基因C、寄生在棉铃虫体内的线虫D、苏云金芽孢杆菌体内的抗虫基因D第29页，共52页，2022年，5月2

12、0日，8点14分，星期四2、基因工程与药物研制我国生产的部分基因工程疫苗和药物第30页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四1、微生物基因工程： 即把目的基因导入大肠杆菌等菌中，通过微生物表达目的基因的产物。2、细胞基因工程： 即用哺乳动物细胞株表达目的产物3、转基因动物： 即将目的基因直接导入鼠、兔、羊和猪体内，使目的基因在哺乳动物体内表达，从儿获得目的产物第31页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四产品名称菌株或细胞应用人胰岛素大肠杆菌人生长激素大肠杆菌表皮生长因子大肠杆菌白细胞介素-2大肠杆菌a干扰素酵母菌乙型肝炎疫苗酵母菌溶血栓剂哺乳动物细胞治疗糖尿病

13、治疗生长缺陷症治疗烫伤、胃溃疡治疗某些癌症治疗癌症或病毒感染预防病毒性肝炎治疗心血管病（心脏病）第32页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四胰岛素是治疗糖尿病的特效药，长期以来只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌，每2000L培养液就能产生100g胰岛素！大规模工业化生产不但解决了这种比黄金还贵的药品产量问题，还使其价格降低了30%-50%!第33页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四干扰素治疗病毒感染简直是“万能灵药”！过去从人血中提取，300L血才提取1m

14、g！其“珍贵”程度自不用多说。人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等通过基因工程实现工业化生产，均为解除人类的病苦，提高人类的健康水平发挥了重大的作用。人造血液及其生产第34页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四2、不属于基因工程方法生产的药物是（ ）A、干扰素 B、白细胞介素C、青霉素 D、乙肝疫苗 C第35页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四3、基因工程与环境保护环境监测：基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。1t水中只有10个病毒也能被DNA探针检测出来第36页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四利用基因工程

15、培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况，却不易因环境污染而大量死亡，甚至还可以吸收和转化污染物。第37页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四环境污染治理：基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类，用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属，分解DDT等毒害物质。第38页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四 2006年3月14日绿色和平组织发布消息,称亨氏营养米粉含有转Bt基因抗虫水稻成分。 那么转基因食品到底安全吗？什么样的转基因食品才能上市？

16、如何面对市场上的转基因食品呢？第39页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四四、基因食品的安全性1、转基因生物可能对人体健康产生不利影响，严重的可以致癌和其他疾病。2、转基因生物可能对环境质量、生态系统或生态系统的稳定性产生不利影响。3、基因武器可能给人类带来毁灭性的危险。第40页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来C练习2）有关基因工程的叙述正

17、确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料D第41页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四3）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶A第42页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四参考资源：第43页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四展示你的搜索成果第44页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四 有人认为，转基因新产品也是一把双刃剑，犹如水能载舟，亦能覆舟，甚至带来灾难性的后果，你是否同意这一观点？举例说明。思维拓展第45页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四基因工程的“专用工具”基因的剪刀限制性内切酶：一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子的酶。 第46页，共52页，2022年，5月20日，8点14分，星期四第47页，共52页，2022年，5月20日，