自动化仪器在微生物检验中的应用课件

1、 第八节 细菌检验的自动化第一章 全自动血培养系统一、血培养系统的发展过程1.手工方法：血液标本肉汤液体培养瓶35孵箱7天肉眼观察 血液标本双相培养瓶35孵箱观察斜面菌落2.半自动血培养仪：血液标本专用培养瓶35孵箱取出置读数仪检测CO2含量3.全自动血培养系统：血液标本专用培养瓶血培养仪阳性器自动报警自动化血培养系统的发展半自动血培养系统1975年BD公司生产了世界上第一台BACTEC110半自动血培养仪，后陆续460、660、730、860问市1988年Difco公司推出的Sentincl System，其原理是测定导电度的改变自动化血培养系统的发展1989年Orgaron公司生产出全自动

2、的Bact/Alert培养仪1991年BD公司以荧光增强技术为原理的新型BACTEC9000系列上市1991年生物梅里埃公司生产出VITAL全自动培养仪，其直接检测瓶中荧光1992年Difco公司推出ESP system，其利用电子测定压力的改变。1999年Orgaron公司又推出全世界最新产品Bact/Alert 3D全自动血培养仪。2010年BD公司推出最大的FX4001、Bact/Alert血培养系统：1990年阿克苏欧加农公司生产的第一台全自动连续检测血培养系统（MBCS）。原理：培养瓶底部含有Novel颜色感应器，培养基与感应器之间有层半渗透性薄膜，只有CO2能透过膜，当瓶内微生物生

3、长释放出的CO2渗透至感应器时，经水饱和产生H，使感应器PH改变，瓶底颜色由墨绿色变为黄色。CO2H2OHHCO3特点：全自动化：孵育箱、检测系统、计算系统融合在一起；微生物易于生长：连续恒温、振荡方式；标本避免交叉污染：封闭式检测。培养仪510年不停机，设有内部质控系统，及时纠正失控情况。培养5天可发报告。Bact/Alert血培养系统缺点和不足 Bact/Alert120由于是利用H+增多，促使感应器pH值改变来报告阳性结果。因此，对一些不分解糖，或利用葡萄糖能力差的微生物，CO2释放少，自然H+也少，pH值改变不明显，结果可能会出现假阴性。Bactec9120血培养仪缺点和不足 Bact

4、ec9120目前只能做普通血培养，而不能做结核杆菌培养和药敏试验，如培养TB还需加一台Bactec9000MB。据说现在有一种瓶可做血液的TB培养 进口与国产血培养基的区别全自动培养系统的培养瓶与国产的培养基成份不一样，内含大豆硌蛋白消化液，还含有0.025%SPS（聚脑茴香酸钠），有三抗作用：抗吞噬细胞、抗补体、抗抗体。全自动血培养系统培养基可加中和或吸附抗生素的物质，如树脂、活性炭（FNA）。第二章 微生物自动化鉴定系统1.微生物鉴定的发展概况显微镜的诞生球菌、杆菌革兰染色的应用G球菌、G球菌 生化单项反应IVMC手工方法 微量反应板 数码分类鉴定半自动化微量反应板、仪器阅读反应结果全自动

5、化孵育箱、读数仪、计算机分析连在一起2.数码分类鉴定系统（API系统） 这是集数学、电子、信息及自动分析于一体的鉴定系统。 工作原理：计算并比较数据库内模型菌对微量反应板中每个生化反应出现的频率总和。 积分规则：21个生化反应阴阳性结果，换成数码，每三个孔为一组，第一个阳性为1，第二个阳性为2，第三个阳性为4，阴性为0。5144512输入计算计，与模型菌比较，数码最接近的为鉴定结果，大肠埃希菌Id%98.6%。 %Id99.9为极好鉴定； %Id9999.8之间为很好的鉴定； %Id9098.9之间为好的鉴定； %Id80可前二个菌鉴定加起来，可达到属的水平或认为不可接受的结果。半自动鉴定系统

6、（ATB）： 工作原理：也是利用数码分类，只是判断反应孔阴阳性结果由读数仪读数。特点：仪器阅读生化反应结果，可减少人为误差；也可做药敏试验报告R.S；有一个专家系统纠正药敏结果的偏差。全自动鉴定系统： Vitek鉴定系统：原是美国宇航局太空计划中用于细菌分析的一部分，90年代由bioMerieUX Vitek生产为自动化鉴定仪。 工作原理：采用有数码原理，30个微量生化反应池、细菌生长池内浊度增加，透光度减少，仪器一小时自动测定一次透光度，最终与计算机内模型菌透光度比较，得出阳性结果： 百分变化率（%） 100% 特点：可动态观察细菌生长的情况，仪器随时报警，不要等到24h，比传统的手工方法要快；药敏试验可报MIC，也可进行MRS、ESBL鉴定；整个试验过程是全封闭，对实验室污染少；鉴定卡贵，成本大。PHOENIXTM100鉴定/药敏系统原理：利用氧化还原反应+细菌刃天青（指示剂）Vitek系统：这是在第一代Vitek基础上研发的可同时容纳120个菌的鉴定，采用快速荧光法测定细菌，2小时发报告，该仪器具有高级专家系统，可根据表型结果提示有何