高效液相色谱仪常见故障的判定及解决方法

1、高效液相色谱仪常见故障的判定及解决方法2009-6-8来源：杭州格图科技有限公司进入该公司展台现象原因解决方法压力异常（工作压力 的变化往往是故障 的征兆。从下表中找 出所观察到的现象， 并在右侧的列表中 参考相应的解决方 法）A、有压力显示， 没有，流动相流动1、电源问题；接通电源开机2、保险丝被烧坏；更换保险丝3、控制器设定不正确或设 定失败a、采取恰当的设定b、修理或更换控制器4、柱塞杆折断更换柱塞杆5、泵头内有空气溶剂脱气、启动泵抽出空 气6、流动相不足a、补充流动相b、更换入口滤头7、单向阀损坏更换单向阀8、漏液拧紧或更换手紧接头B、流动相流动正 常，但没有压力显 示1、仪表损坏；更

2、换仪表2、压力传感器损坏；更换压力传感器C、压力持续偏高1、流速设定过高调整流速设定2、柱前筛板堵塞a、在允许情况下反冲色谱 柱b、更换筛板c、更换色谱 柱3、流动相使用不当或缓冲 盐的结晶沉淀a、使用恰当的流动相 b、冲洗色谱柱4、色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱5、进样阀损坏清洗或更换进样阀6、柱温过低提高温度7、控制器失常修理或更换控制器8、保护柱阻塞清洗或更换保护柱9、在线过滤器阻塞清洗或更换在线过滤器D、压力持续偏低1、流速设定过低调整流速2、系统漏液确定漏液位置并维修3、色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱4、柱温过高降低温度5、控制器失常维修或更换控制器E、压力不断上升1、见列表见列表C

3、F、压力降为零见列表A、B见列表A、BG、压力不断下降，但不回零见列表D见列表DH、压力波动1、泵中有气体a、溶剂脱气13、从泵中除 气体2、单向阀损坏更换单向阀3、泵密封损坏更换泵密封4、脱气不充分a、溶剂脱气心改变脱气 方法（使用在线脱气法等）5、系列漏液确定漏液位置并维修6、使用梯度洗脱由于流动相粘度的变化引起的压力波动漏液通常可以通过拧紧 或更换管路接头来 解决漏液的问题。但 值得注意的是过分 拧紧会导致金属接 头的磨损。如果通过 稍微拧紧接头不能 解决漏液的问题，就 必须将接头取下，检 查是否损坏（例如， 卡套损坏、密封表面 有杂质；损坏的接头 应该更换掉。）A、接头处漏液1、接头松

4、动拧紧2、接头磨损更换3、接头过紧a、拧松，再重新拧紧b、更换4、接头被污染a、拆下清洗b、更换5、部件不匹配使用同一品牌的配件B、泵漏液1、单向阀松动a、拧紧单向阀（不必拧的 过紧）b、更换单向阀2、接头松动拧紧接头（不必拧的过紧）3、混合器密封损坏a、更换混合器密封b、更换混合器4、泵密封损坏维修或更换泵密封件5、压力传感器损坏维修或更换压力传感器6、脉冲阻尼器损坏更换脉冲阻尼器7、比例阀损坏a、检查隔膜，如果漏液立 即更换b、检查手紧接头， 损坏的立即更换8、放空阀的损坏a、拧紧放空阀b、更换放 空阀C、进样阀漏液1、转子密封损失重新安装或更换进样阀2、定量环阻塞更换定量环3、进样品密封

5、松动调整4、进样针头尺寸不合适使用恰当的进样针5、废液管中产生虹吸保持废液管高于废液液面6、废液管阻塞更换或疏通废液管D、色谱柱漏液1、尾端接头松动拧紧接头2、 卡套内有填料拆下、清洗卡套、重新安装3、 筛板厚度不合适使用合适的筛板（参考下表）物质粒径筛板孔径3-却l0.5p5-20p2pE、检测器漏液1、流通池垫片损坏A、避免过人的背景压力（压力降）B、更换垫片2、流通池窗破碎更换窗口3、手紧接头漏液拧紧或更换4、废液管阻塞更换废液管5、流通池阻塞重新安装或更换峰变形（液相色谱系 统的许多问题都能A、峰拖尾1、筛板柱塞A、反冲色谱柱B、更换进 口筛板C、更换色谱柱在谱图上反映出来。2、色谱柱

6、塌陷填充色谱柱其中有一些问题可 以通过改变设备参3、干扰峰A、使用更长的色谱柱B、 改变流动相或更换色谱柱数得到解决；而其他 的问题必须通过修 改操作程序来解决4、流动相PH选择错误调整PH值。对于碱性化合 物，低PH值更有利于得到 对称峰对于色谱柱和流动 相的正确选择是得 到好的色谱图的关5、样品与填料表面的溶化 点发生反应图A、加入离子对试剂或碱性 挥发性修饰剂B、更改色 谱柱键）B、峰前延1、柱温低升高柱温2、样品溶剂选择不恰当使用流动相最为样品溶剂3、样品过载降低样品含量4、色谱柱损坏见 A1、 A2C、峰分叉1、保护柱或分析柱污染图取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如 果分析

7、柱阻塞，拆下来清 洗。如果问题仍然存在， 可能是柱子被强保留物质 污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在， 入口可能被阻塞，更换筛 板或更换色谱柱2、样品溶剂不溶于流动相改变样品溶剂。如果可能 采取流动相作为样品溶 剂。D、峰变形样品过载减少样品载量E、早出峰变形样品溶剂选择不恰当A、减少进样体积B、运用 低级性样品溶剂F、早出的峰拖尾 程度大于晚出的 峰柱外效应A、调整系统连接（使用更 短、内径更小的管路）B、 使用小体积的流通池G、K增加时，脱尾更严重1、二级保留效应，反相模 式化加入三乙胺（或碱性样 品）B.加入乙酸（或酸性 样品）C加入盐或缓冲剂（或离子化样品）D.更换 一支柱子2

8、、二级保留效应，正相模 式化加入三乙胺（或碱性样 品）B.加入乙酸（或酸性 样品）仁加入水（或多官 能团化合物）D.试用另一 种方法3、二级保留效应离子对加入三乙胺（或碱性样品）H、酸洗或碱性化合物的峰拖尾缓冲不合适A、使用浓度50-100mM的 缓冲液B、使用Pka等于 流动相PH值的缓冲液I、额外的峰1、样品中有其他组分正常2、前一次进样的洗脱峰A、增加运行时间或梯度斜 率B提高流速3、空位或鬼峰检查流动相是否纯净使用流动相作为样品 溶剂C.减少进样体积J、保留时间波动1、温控不当调好柱温2、流动相组分变化防止变化（蒸发、反应等）3、色谱柱没有平衡在每一次运行之前给予足 够的时间平衡色谱柱

9、K、保留时间不断1、流速变化重新设定流速变化2、泵中有气泡从泵中除去气泡3、流动相选择不恰当A.更换合适的流动相B.选择合适的混合流动相L、基线漂移1、柱温波动。（即使是很 小的温度变化都会引起基 线的波动。通常影响示差控制好柱子和流动相的温 度，在检测器之前使用热 交换器图M、基线噪音 则的）M、基线噪音 则的）（规检测器、电导检测器、较 低灵敏度的紫外检测器或 其它光电检测器。）2、流动相不均匀。（流动 相条件变化引起的基线漂 移大于温度导致的漂移。）3、流通池被污染或有气体4、检测器出口阻塞。（高 压造成流通池窗口破裂， 产生噪音基线）5、流动相配比不当或流速 变化6、柱平衡慢，特别是流

10、动 相发生变化时7、流动相污染、变质或由 低品质溶剂配成。8、样品中有强保留的物质（高K值）以馒头峰样 被洗脱出，从而表现出一 个逐步升高的基线。9、使用循环溶剂，但检测 器为调整10、检测器没有设定在最 大吸收波长处1、在流动相、检测器或泵 中有空气2、漏液3、流动相混合不完全4、温度影响（柱温过高， 使用HPLC级的溶剂，高纯 度的盐和添加剂。流动相 在使用前进行脱气，使用 中使用氮气。用甲醇或其他强级性溶剂 冲洗流通池。如有需要， 可以用1N的硝酸。（不要 用盐酸）取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流 窗。更改配比或流速。为避免 这个问题可定期检查流动 相组成及流速。用中等强度的溶

11、剂进行冲 洗，更改流动相时，在分 析前用10-20倍体积的新 流动相对柱子进行冲洗。检查流动相的组成。使用 高品质的化学试剂及 HPLC级的溶剂使用保护住，如有必要， 在进样之间或在分析过程 中，定期用强溶剂冲洗柱 子重新设定基线。当检测器 动力学范围发生变化时， 使用新的流动相将波长调整至最大吸收波 长处流动相脱气。冲洗系统以 除去检测器或泵中的空 气。检查管路接头是否松动， 泵是否漏液，是否有盐析 出和不正常的噪音。如有 必要，更换泵密封。用手摇动使混合均匀或使 用低粘度的溶剂减少差异或加上热交换N、基线噪音 规则的）检测器未加热）5、在同一条线上有其他电子设备6N、基线噪音 规则的）检测

12、器未加热）5、在同一条线上有其他电子设备6、泵振动（不1、漏液0、宽峰3、流动相各溶剂不相溶4、检测器/记录仪电子元 件的问题5、系统内有气泡6、检测器内有气泡7、流通池污染（即使是极 少的污染物也会产生噪 音）8、检测器灯能量不足9、色谱柱填料流失或阻塞10、流动相混合不均匀或 混合器工作不正常1、流动相组成变化2、流动相流速太低3、漏液（特别是在柱子和 检测器之间）4、检测器设定不正确5、柱外效应影响A.柱子过载B.检测器对 反应时间或池体积响应过 大C.柱子与检测器之间 的管路太长或管路内径太 大d.记录仪响应时间太 长6、缓冲液浓度太低7、保护柱污染或失效器断开LC、检测器和记录 仪，

13、检查干扰是否来自于 外部，加以更正在系统中加入脉冲阻尼 器检查接头是否松动，泵是 否漏液，是否有盐析出和 不正常的噪音。如有必要， 更换密封。检查流通池是 否漏液。检查流动相的组成。选择互溶的流动相 断开检测器和记录仪的电 源，检查并更正。用强极性溶液清洗系统 清洗检测器，在检测器后 面安装背景压力调节器 用1N的硝酸（不能用磷 酸）清洗流通池更换灯 更换色谱柱 维修或更换混合器，在流 动相不走梯度时，建议不 使用泵的混合装置 重新制备新的流动相 调节流速检查接头是否松动、泵是 否漏液、是否有盐析出以 及不正常的噪音。如果有 必要更换密封。调整设定A.小体积进样（例如： 10ul而不是100u

14、l）以1： 10或1： 100的比例稀释 样品B.减少响应时间或 使用更小的流通池C.使 用内径为0.007-0.01的 短管路D.减少响应时间 增加浓度 更换保护柱8、色谱柱污染或失效，塔板数较低更换同样类型的色谱柱。如果新柱子可以提供对称 的色谱峰，则用强溶剂冲 洗旧柱子9、柱入口塌陷打开柱入口，填补塌陷或更换柱子10、呈现两个或多个未被 完全分离的物质的峰选择其它类型的色谱柱以 改善分离效果11、柱温过低提高柱温。除非特殊情况， 温度不宜超过75C12、检测器时间参数太大使用较小的时间常数P、分离度降低1、流动相污染或变质（引 起保留时间变化）重新配置流动相2、保护柱或分析组阻塞去掉保护柱进行分析。如 果必要则更换保护柱。如 果分