猪多杀性巴氏杆菌病抗原株生产工艺规程模板

资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。目录1.目标 22.适用范围 23.定义和缩略语 24.关联文件 25.程序 25.1.生产工艺质量控制要点 25.2.培养基配制 25.3.发酵罐接种培养 35.4.菌液收获 46.附件 4目标建立猪多杀性巴氏杆菌病抗原(EO630株)生产工艺规程,使生产工艺标准化、规范化,保证制品质量,防止污染和交叉污染。适用范围适用于猪多杀性巴氏杆菌病抗原(EO630株)生产工艺。定义和缩略语猪多杀性巴氏杆菌病抗原(EO630株)、生产工艺规程关联文件程序生产工艺质量控制要点生产区域要求发酵罐接种准备、菌液收获等重要的操作均在万级区域内的局部百级区域下进行,发酵罐接种和培养、菌液离心等工序在万级洁净区域,培养基制备等工序在十万级区域进行。质量控制要点生产工艺质量控制要点如下表:工序质量控制项目频次培养基消毒消毒温度,116℃每批消毒时间,30分钟每批发酵罐培养培养温度,36～37℃每批培养方式,逐渐增大通气量每批培养时间,8～16小时每批菌液收获、检验纯粹检验,应纯粹每批活菌计数,应合格每批培养基配制操作前检查1.是否无上批遗留物品。2.操作室是否有”已清洁”状态标识。3.使用的物品及用具是否符合生产规定。培养基配制1.培养猪丹毒弱毒菌所用的培养基为马丁汤干粉培养基,每次培养10万毫升/罐。2.把10毫升猪丹毒干粉培养基倒入培养基罐中,加注射用水至10万毫升,搅拌均匀。3.用空气把培养基从培养基罐输送到发酵罐内。清场1.移出废弃物及使用过物品。2.清洁操作室及设备。3.专人复核后,悬挂”已清洁”状态标识。发酵罐接种培养操作前检查1.是否无上批遗留物品。2.操作室是否有”已清洁”状态标识。3.使用的物品及用具是否符合生产规定。4.提前半小时打开局百。接种1．培养基消毒按116℃40分钟进行消毒灭菌后,然后冷却至37℃准备接种。按培养基总量的2%接种子二级种子液。2.发酵罐接种前的准备:

将保存备用的二级种子液ml移入无菌室。

按发酵罐培养基总量加入0.1%裂解血球全血。

除去瓶上胶塞,紧接着打开装有带到底管胶塞的消毒布袋,把胶塞抽出插入种子瓶中。

压实胶塞,系上护绳,送发酵罐,按要求接种。3.连接接种各管道:接管必须在火焰严格控制下进行,保证无菌操作。

工作前,点燃控制酒精棉球,把发酵罐的接种嘴和二级种子瓶及裂解血球全血瓶胶塞到底管一端导管连接,分过滤器叉管和二级种子瓶及裂解血球全血瓶胶塞另一端导管连接,分过滤器另一端和洁净空气出口连接。4.接种:

打开进气阀(即洁净空气出口气阀),让过滤空气缓缓进入种子瓶。

打开罐上接种嘴进料阀,最后打开罐内排气阀(排气阀不能开得过大,应保持罐内有一定压力,切忌形成平压或负压),利用经过分过滤器的洁净空气的压力逐瓶将种压入罐内。

接种完毕,立即用上血钳夹紧连接进料嘴的胶管,并立即关闭洁净空气出口气阀、罐上接种嘴进料阀,打开罐上到底管进气阀,通入过滤空气翻滚培养基,使血、种及培养基均匀混合。

在火焰掩护下除掉接种嘴进料胶管,盖上接种口。发酵罐培养1.接种完毕,调整接种后罐内温度,培养温度为36～37℃,通入洁净空气以逐渐增大通气量的方法于36～37℃培养8小时左右,通气量按前,中、后段适当调整。2.通气从0～4小时为前段,气量在1m3/时;4～8小时为中段,气量在2m3/时;8小时以后为后段,气量在4m3/时。清场1.移出废弃物及使用过物品。2.清洁操作室及设备。3.专人复核后,悬挂”已清洁”状态标识。菌液收获操作前检查1.是否无上批遗留物品。2.操作室是否有”已清洁”状态标识。3.使用的物品及用具是否符合生产规定。4.提前半小时打开局百。收获操作1.把经高温灭菌的2万ml瓶除去包装纸头,解开胶塞上导管小纸上头。2.在火焰严格控制下,用灭菌用橡皮胶管把导管与反应罐出料觜连接起来。3.调整反应罐内压力,打开发酸罐出料阀门,把弱毒菌液收集到2万ml瓶内,每瓶约装1.6万ml。4.装满一瓶后,关闭发酸罐出料阀门,用止血钳夹紧橡皮胶管,在火焰严格控制下,把橡皮胶管从胶塞上导管拔出,连接另一2万毫升瓶上,打开止血钳,继续收获,一直到收获完毕。5.已收获弱毒菌液的2万毫升瓶胶塞上导管在火焰严格控制下,迅速用灭菌胶头套上,用绳子扎紧,最后用拧干的灭菌医用纱布包住整个瓶颈以上部分。清场1.移出废弃物及使用过物品。2.清洁操作室及设备。3.专人复核后,悬挂”已清洁”状态标识。附件无文件接收单接收部门培训人员