1138《生物技术制药概论》 20年春季西南大学作业答案

西南大学网络与继续教育学院1、生物催化和化学催化相比的弱点是选择性高安全环境友好催化高效性反应温度更严格2、下列那个不属于基因组计划需要绘制的图蛋白图转录图物理图遗传图3、促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为:大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化4、人类第一个基因工程药物是重组链激酶C、促红细胞生成素重组人胰岛素乙型肝炎疫苗5、人抗鼠抗体（HAMA）参考答案：人抗鼠抗体是指鼠源性抗体应用于人身上而产生的一种人抗鼠的抗体，导致排斥反应，使药物在体内清除速度时间.6、细胞因子参考答案：由细胞分泌的能调节生物有机体生理功能，参与细胞的增殖、分化和凋亡的小分子多肽物质7、治疗性疫苗参考答案：治疗性疫苗是指在已感染病原微生物或已患有某些疾病的机体中，通过诱导特异性的免疫应答，达到治疗或重组技术表达的产品或制品。8、基因表达参考答案：基因表达是指目的基因在生物体中的转录、翻译以及所有加工过程。9、生物药物参考答案：利用生物体、生物组织或其成分，综合应用生物学、生物化学、微生物学、免疫学、物理化学、生物技术和而成的一大类用于预防、治疗和诊断疾病的制品10、SDS(十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)参考答案：SDS是带负电的阴离子去污剂，使用SDS时，蛋白质样品需经样品溶解液处理.样品溶解液含B-巯基乙再与SDS结合形成带负电的SDS—蛋白复合物，以在PAGE中按分子量大小分离。11、亚单位疫苗参考答案：不含病原体核酸，选用能诱发宿主产生中和抗体的微生物蛋白或表面抗原而制成的疫苗。12、包涵体参考答案：包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集，形成无活性的难溶性固体颗粒。13、生物技术制药参考答案：生物技术制药是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体学、生物技术、药学等科学的原理和方法进行药物制造的技术。14、疫苗参考答案：疫苗：用于人工主动免疫的生物制品15、简述发酵工程的基本含义参考答案：发酵工程(fermentationengineering)又称为微生物工程，是利用微生物制造工业原料与工业产品并提供服16、简述抗体药物的研发历史参考答案：第一阶段以1890年Behring发现白喉抗毒素为代表，其特点是用抗原免疫动物来获得多克隆抗体。第二阶段以1975年Kohler创建杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表。1986年，美国FDA批准了世界上第一个单抗治疗性药物一一抗CD3单抗OKT3进入市场，用于器官移植时的用达到了顶点第三阶段以1994年Winter以基因工程方法制备人源化抗体为代表17、以近年来多次发生的疫苗事件为例，分析生物药物的类型、药物制备和质量控制的特殊性。参考答案：简要回顾总结某一个案例即可，如长春长生疫苗事件。此次的疫苗事件简单说来是2018年7月15日长春长生通报。紧接着7月18日，长春长生又公告公众：食药监局对其下达的处罚决定书，决定书中提及其批次为格。主要原因是疫苗生产记录作假。生物药物制备的特殊性需要特别注意原料中的有效物质含量低导致的提取等制备方法的特殊性，稳定性差等的真实性等。流通管理包括但不限于低温冷藏和运输管理、批签发制度、原始证据等。18、简述生物药物的用途参考答案：作为治疗药物，作为预防药物，作为诊断药物，其他生物医药用品19、如何控制基因工程药物质量？参考答案：基因工程药物的质量控制要点如下。1蛋白质含量的测定。2蛋白质纯度检测。3蛋白质Mr测定。4蛋白质等分析，宿主蛋白液和酸残留分析20、简述单克隆抗体的制备过程。参考答案：经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌单一抗原表位的特异性抗体，是单克隆抗体。单抗的制作过程与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，筛选杂交瘤细胞，筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞，杂交瘤细培养特异性杂交瘤细胞克隆，单抗的纯化及鉴定。21、简述生物药物的药理学特性参考答案：1、活性强:体内存在的天然活性物质。2、治疗针对性强,基于生理生化机制。3、毒副作用一般较少，营反应。22、简述生物技术药物的概念，并讨论与化学药物的主要区别。参考答案：生物技术药物是指采用DNA重组技术或其他创新生物技术生产的治疗、预防药物，如细胞因子、纤溶酶原激白、受体、疫苗和单抗等蛋白质和核酸药物。生物技术药物与化学药物的主要区别包括原料来源不同、技术不同。23、根据真核基因在原核细胞中表达的特点，表达载体必须具备那些条件？参考答案：（1）能够独立的复制；（2）具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记，以利于外源基因的克隆、鉴定和筛选（3）应具有很强的启动子，能为大肠杆菌的RAN聚合酶所识别；（4）应具有阻遏子（5）应具有很强的终止子（6）所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号。24、简述发酵工程制药的基本过程参考答案：答案：1.菌种的选育2.培养基的配置3灭菌4.扩大培养和接种5.发酵过程6.分离提纯抗体的发展阶段大致可分为什么？25、简述基因工程的基本含义参考答案：又称基因拼接技术或DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生26、基因工程在抗生素生产中有那些应用？参考答案：通过基因工程明确抗生素合成基因的典型特点和克隆的方法，解析合成基因的结构，深入了解微生物的生长为人类的健康提供更多更有效的产品，主要体现在以下几方面：（1）提高抗生素的产量（2）改善抗生素的组分（3）改进抗生素的生产工艺；（4）产生杂合抗生素，提供新的药物来源（5），用组合生物合成方法合成复杂化合物27、单克隆抗体的优点与缺点分析参考答案：优点：①McAb为高纯度单一抗体，在氨基酸序列以及特异性方面均为一致，检测灵敏度极高；②可以通过杂瘤细胞可以用液氮深冻法进行长期保存；④可在分子水平上解析存在于病毒表面的抗原或受体；⑤可以用不缺点：①McAb特异性太强，有时不能检出微生物突变株；②有时不能产生与抗原交联的功能；③易受pH半衰期短；④McAb制备程序复杂、工作量大。因此，可以采用常规抗体解决的问题就无须制备McAb。28、简述生物技术在制药领域的应用。参考答案：利用基因工程技术生产多肽/蛋白质类药物或疫苗；利用蛋白质工程制造新型活性多肽/蛋白类药物；利用细技术获得活性药物分子或药物中间体；利用发酵工程提高生产工艺水平；现代生物技术在新药研发中的作用29、蛋白质含量测定的方法有哪些？参考答案：蛋白含量主要用于原液比活性计算和成品规格控制，测定方法主要有Folin-酚试剂法（Lowry法）、染色法HPLC法、荧光法和凯氏定氮法等，其中Lowry法和Bradford法是质量检定中常用方法30、简述基因工程在传统制药行业中的可能应用。参考答案：基因重组提高产量改善组分改进生产工艺产生新的品种31、质粒参考答案：质粒（plasmid）是染色体外能独立自主复制并遗传的环状双链DNA分子。单克隆抗体：由单一单克隆抗体：由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体。32、PCR参考答案：在四种脱氧核苷三磷酸（dNTP）存在下，以寡聚核苷酸为引物及单链DNA为模板，经DNA聚合酶催化合成DNA上互补链的过程称为聚技术。33、GLP参考答案：GLP（Goodlaboratorypracticeofdrug）药品非临床研究质量管理规范。指对从事实验研究的规划设计、执行实施、管理监督件提出的法规性文件。34、列举出3种以大肠杆菌表达的生物技术药物，并分析该类药物的特点。参考答案：1重组人胰岛素rhinsulinhumulin2重组人甲状旁腺激素rhPTHForteo3重组人粒细胞集落刺激因子rhG－CSFNeupogen特点：遗传背景清楚，转化效率高，研究费用少生长快，可以短时间获得目的蛋白目的基因表达水平高不能进行糖基化修饰35、抗体药物参考答案：用于治疗的单克隆抗体、抗体片段、基因工程改造的抗体、免疫偶联物以及融合蛋白均可统称为抗体药物（antibody-baseddrugs）。36、简述生物药物的分类参考答案：1）按药物的结构分类：氨基酸及其衍生物类药物；多肽和蛋白质类药物；酶和辅酶类药物；核酸及其降解物细胞生长因子；生物制品类；2）按来源分类；人体组织来源；动物组织来源；植物组织来源；微生物来源；海洋生物来源；3）按生理功能和用途分类：治疗药物；预防药物；诊断药物；其它（生化试剂、保健品、化妆品、食品、医37、查阅并分析你所知道的至少四种生物技术药物（至少含重组蛋白药物、抗体药物、疫苗各一种等）的药学知上市公司概况、应用分析等）。参考答案：查阅药品批准信息或者网站信息，分析每一种药物相关资料得5分（名称、、适应症、作用机理、上市公司38、系统分析你掌握的几种重组阳性克隆子的筛选和鉴定方法参考答案：（1）根据重组子遗传重组表型改变的筛选法1）利用抗生素抗性基因进行筛选2）通过a互补使菌产生颜色来筛选3）利用报告基因筛选克隆子（2）根据重组子结构特征的筛选法1）琼脂糖凝胶电泳比较重组DNA的大小2）限制性内切酶分析3）印迹杂交方法4）PCR法（3）根据目的基因表达产物采用免疫化学方法筛选。39、蛋白质含量测定的方法有哪些？参考答案：蛋白含量主要用于原液比活性计算和成品规格控制，测定方法主要有Folin-酚试剂法（Lowry法）、染色法HPLC法、荧光法和凯氏定氮法等，其中Lowry法和Bradford法是质量检定中常用方法.40、生物技术药物与化学药物的主要区别是什么？参考答案：答案：原料来源不同；技术方法不同；活性检测不同；质量控制标准不同。41、生物技术药物的质量标准研究的主要内容是什么？参考答案：答案：研究生物技术药物产品的均一性；研究建立生物技术药物产品生物学活性或者免疫学活性测定方法；品或参考品；建立生物技术药物目标产品生产相关杂质限量分析方法和标准；在以上研究的基础上制定出保证标准相一致的质量控制标准和药物分析方法。42、如何进行发酵工艺的控制？参考答案：答案：包括培养基，溶氧，pH和温度等多参数的控制。43、单克隆抗体的优点与缺点分析参考答案：优点：①McAb为高纯度单一抗体，在氨基酸序列以及特异性方面均为一致，检测灵敏度极高；②可以通过交瘤细胞可以用液氮深冻法进行长期保存；④可在分子水平上解析存在于病毒表面的抗原或受体；⑤可以缺点：①McAb特异性太强，有时不能检出微生物突变株；②有时不能产生与抗原交联的功能；③易受pH半衰期短；④McAb制备程序复杂、工作量大。因此，可以采用常规抗体解决的问题就无须制备McAb。44、举出三种当前流行的单克隆抗体药物名称和适应症参考答案：阿达木单抗：商品名修美乐（Humira），是抗人肿瘤坏死因子（TNF）的人源化单克隆抗体，是人单克隆D2E7重CambridgeAntibodyTechnology（CAT）与美国雅培公司联合研制，2003年1月首次在美国上市，随后相继在德国风湿性关节炎和强直性脊柱炎。利妥昔单抗：利妥昔单抗（rituximab,RTX,商品名美罗华）是1997年被批准用于治疗肿瘤的抗CD20人鼠嵌合中已显示出优越的疗效和良好的治疗耐受性。随着对B细胞及其作用机制认识的深入，利妥昔单抗的治疗范围关节炎、系统性红斑狼疮、特发性血小板减少性紫癜等自身免疫性疾病。曲妥珠单抗：曲妥珠单抗（Herceptin/赫赛汀）是一种人源化针对HER-2受体的单克隆抗体，2002年美国拮抗肿瘤细胞生长信号传导从而抑制肿瘤生长、影响细胞周期、下调肿瘤细胞表面HER-2蛋白表达及减少V表达的乳腺癌。45、目的基因的制备方法有哪些？参考答案：答案：从基因组中直接分离；通过RNA合成DNA；基因的化学合成；聚合酶链反应（PCR）钓取。46、查阅资料综述生物药物阿单木单抗（修美乐）能成为连续多年世界销售额排名第一的药物特征和市场应用，并提出开发抗体类药物的观点。参考答案：简要描述阿单木单抗的名称、药物性质、适应症。罗列该药物在最近五年的市场应用分析。对开发的抗体类药物的启示和前景分析。47、简述或者图示基因工程制药的基本流程参考答案：基因工程药物的生产涉及DNA重组技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大部分。上游技术与构建(狭义基因工程)；下游技术则包括含有重组外源基因的生物细胞(基因工程菌或细胞)的大规模培品质量控制等过程。广义的基因工程是一个高度统一的整体，上游DNA重组的设计必须以简化下游操作工艺工程蓝图的体现和保证，这是基因工程产业化的基本原则。48、简述生物技术在制药领域的应用参考答案：利用基因工程技术生产多肽/蛋白质类药物或疫苗；利用蛋白质工程制造新型活性多肽/蛋白类药物；利用细胞术获得活性药物分子或药物中间体；利用发酵工程提高生产工艺水平；现代生物技术在新药研发中的作用.49、简述发酵工程制药的基本过程参考答案：1.菌种的选育2.培养基的配置3灭菌4.扩大培养和接种5.发酵过程6.分离提纯50、如何进行发酵工艺的控制？参考答案：包括培养基，溶氧，pH和温度几个方面进行控制。51、GMP参考答案：药品生产质量管理规范，其英文名称为goodmanufacturingpracticesfordrugs，简称GMP,于1962年首先由美国食品药品管理52、比较转化、转导、转染三种不同方式基因导入宿主的方法？参考答案：转化作用(transformation)：将携带某种遗传信息的DNA引入宿主细胞，通过DNA之间同源重组作用，获化作用。转化是生物界客观存在的自然现象。转导作用(transduction):自然界中，通过噬菌体或病毒的一个细胞的过程称为转导(transduction)。即通过噬菌体(病毒)颗粒感染，把DNA导入被感染的宿主细转染作用是将外源DNA分子导入真核细胞的过程，原核生物中转化的同义词。53、发酵工程参考答案：发酵工程(fermentationengineering)又称为微生物工程，是利用微生物制造工业原料与工业产品并提供服务的技术，是生物54、生物技术药物参考答案：生物技术药物(biopharmaceutics)是利用生物体、生物组织、细胞或其成分，综合应用生物学、生物化学与分子生物学、微生物学与造而成的一大类用于预防、诊断、治疗和康复保健的制品。55、基因工程参考答案：又称基因拼接技术或DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因(I分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性