血细胞分析在临床中的应用1课件

血细胞分析在临床中的应用

血细胞分析的发展近年来,随着科学技术的飞速发展及计算机在血液分析仪中的广泛应用,各种先进的血液分析仪逐渐普及.1953年，第一台血细胞计数仪问世，标志着这一项目抛弃了作坊式手段；1913-1998ModelAHighspeedautomaticbloodcellcountandcellsizeanalyzerCBC(全血细胞计数)+DIFF(WBC分类)模式下WBC计数分类WBC/DIFF通道对WBC计数和分类时,使用的两个信号:细胞经半导体激光激发产生侧向荧光强度侧向散射光强度信号使用的两种试剂:溶血素(4DL):将RBC完全溶解,同时在WBC膜表面打孔荧光染料(4DS,聚次甲基荧光染料)通过小孔进入WBC内,对胞浆和胞核中的核酸物质进行染色测定经过核酸荧光染色后的WBC在633nm激光的照射下,产生侧向荧光信号和侧向散射光信号。侧向荧光强度与WBC的核酸(DNA/RNA)含量成正比,侧向散射光强度反映了细胞内容物的复杂程度(核的分叶,胞浆颗粒的大小,数量,分布均匀程度)。SideScatter(Internalstructure)淋巴细胞单核细胞嗜中性细胞

嗜酸细胞

Fluorescence(RNA,DNA)RBCghost嗜碱细胞SLS血红蛋白检测方法检测使用的主要成份为十二烷基磺酸钠表面活性剂先将RBC溶解，释放出Hb分子Hb分子中的Fe2+被氧化为Fe3+，与SLS结合形成SLS-Hb有色基团，在535nm有最大吸收峰。SLS血红蛋白检测方法特点不含氰化物，无毒具有环保性SLS是一种脂溶性试剂，可减少脂血和高WBC总数造成的浊度对血红蛋白检测的影响数据异常信息淋巴细胞增多恶性血液病感染(百日咳.传单.病毒性风疹)应激状态(急性心衰.心脏梗塞.过敏反应)自身免疫性疾病.肿瘤.吸烟单核细胞增多感染(细胞性.败血症)胶原病妊娠性WBC增多霍奇金氏病恶性肿瘤中性粒细胞减少严重的细菌感染白血病.肿瘤骨髓转移药物血液恶液质过敏性休克.酒精中毒淋巴细胞减少流行性感冒.败血病药物(抗肿瘤药物.肾上腺皮质激素)肿瘤晚期.霍奇金氏病胶原性疾病(系统性红斑狼疮.类风湿性关节炎)WBC假性增高PLT聚集冷凝集有核红细胞难溶红细胞冷球蛋白PLT假性增高红细胞碎片小红细胞冷白蛋白PLT假性降低血小板聚集巨大血小板RBC假性降低红细胞碎片冷凝集小红细胞急性粒细胞白血病Auer小体出现原始粒细胞DIFF散点图显示:淋巴细胞.单核细胞和原始细胞区域出现大量散点且连成一片,大部分原始细胞由于异常增殖含有过多的DNA/RNA出现异常淋巴细胞散点图显示:有大量的异常淋巴细胞,荧光强度较弱而侧向散射光强度稍强RBC双峰分布表示出现大小不同的两群红细胞缺铁性贫血诊断与铁剂治疗后

直方图动态变化-疗效观察

铁剂治疗2周后铁剂治疗4周后特发性PLT减少性紫癫(ITP)PLT直方图分布上,在40fl附近出现一个高峰,提示有大型PLT,因此反映细胞大小的直方图无法将PLT准确检测出来,许多大的PLT被计数成RBC需要镜检的情况、国际血液学复检专家组推荐的41条自动CBC和DC复检规则：

1.新生儿：（1）复检条件：首次检测标本；（2）复检要求：涂片镜检。

2.WBC、RBC、Hb、PLT、网织红细胞（Ret）：（1）复检条件：超出线性范围；（2）复检要求：稀释标本后重新测定。

3.WBC、PLT：（1）复检条件：低于实验室确认的仪器线性范围；（2）复检要求：按实验室标准操作规程（SOP）进行。4.WBC、RBC、Hb、PLT：（1）复检条件：无结果；（2）复检要求：①检查标本是否有凝块，②重测标本，③如果维持不变，用替代方法计数。

5.WBC：（1）复检条件：首次结果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。

6.WBC：（1）复检条件：3天内Delta值超限，并<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。

7.PLT：（1）复检条件：首次结果<100x10e9/L或>1000.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。

8.PLT：（1）复检条件：Delta值超限的任何结果；（2）复检要求：涂片镜检。

9.Hb：（1）复检条件：首次结果<70g/L或>其年龄和性别参考范围上限20g/L；（2）复检要求：①涂片镜检，②确认标本是否符合要求。

10.平均红细胞体积（MCV）：（1）复检条件：24h内标本的首次结果<75fl或>105fl（成人）；（2）复检要求：涂片镜检。

11.MCV：（1）复检条件：24小时以上的成人标本>105fl；（2）复检要求：①涂片镜检观察大红细胞相关变化，②如无大红细胞相关变化，要求重送新鲜血标本，③如无新鲜血标本，报告中注明。

12.MCV：（1）复检条件：24h内标本的Delta值超限的任何结果；（2）复检要求：确认标本是否符合要求。

13.平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）：（1）复检条件：≥参考范围上限20g/L；（2）复检要求：检查标本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形红细胞。

16～22条为白细胞分类的复检规则：

16.无白细胞分类计数（DC）结果或DC结果不全：（1）复检条件：无条件复检；（2）复检要求：人工分类和涂片镜检。

17.中性粒细胞绝对计数（Neut＃）：（1）复检条件：首次结果<1.0x10e9/L或>20.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。

18.淋巴细胞绝对计数（Lym＃）：（1）复检条件：首次结果>5.0x10e9/L（成人）或>7.0x10e9/L（<12岁）；（2）复检要求：涂片镜检。

19.单核细胞绝对计数（Mono＃）：（1）复检条件：首次结果>1.5x10e9/L（成人）或>3.0x10e9/L（<12岁）；（2）复检要求：涂片镜检。

20.嗜酸粒细胞绝对计数（Eos＃）：（1）复检条件：首次结果>2.0x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。

21.嗜碱粒细胞绝对计数（Baso＃）：（1）复检条件：首次结果>0.5x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。

22.有核红细胞绝对计数（NRBC＃）：（1）复检条件：首次出现任何结果；（2）复检要求：涂片镜检。

23条为网织红细胞的复检规则：

23.网织红细胞绝对计数（Ret＃）：（1）复检条件：首次结果>0.10x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。

24～41条为可以提示的复检规则：

24.怀疑性报警[不成熟粒细胞(IG)/杆状核中性粒细胞（Band）报警提示除外]：（1）复检条件：首次成人结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。

25.怀疑性报警：（1）复检条件：首次儿童结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。

26.WBC结果不可靠报警：（1）复检条件：阳性报警；（2）复检要求：①确认标本是否符合要求并重测标本，②如出现同样报警提示，检查仪器，③如需要，进行人工分类。

27.RBC碎片：（1）复检条件：阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。

28.双形RBC：（1）复检条件：首次结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。

注意事项仪器为筛选试验,不能从测定结果直接诊断疾病遇到异常提示时及时镜检仪器定期保养,保证日常工作正常进行（二）血细胞形态变化的一般规律1.细胞大小及形态大小：由大到小。2个例外：巨核细胞及早幼粒细胞。形态：红细胞始终圆形，粒细胞圆形或椭圆形，单核细胞由圆形、椭圆形变为不规则形，巨核细胞由圆形变为不规则形。2.细胞核大小：由大到小。巨核细胞除外。核形：各系细胞有不同表现。核位置：红系核居中，粒、单系核偏位，淋巴细胞核一侧着边，仅一侧有胞浆。核染色质：颜色由浅到深，染色质由细致疏松到粗糙密集，最后紧缩成块。核膜：不明显到明显。核仁：清晰、模糊、消失。3.细胞浆量：由少到多。颜色：粒、红、巨核由深蓝或浅蓝到浅红；淋巴、单核保持浅蓝或灰蓝色；浆细胞由灰蓝变为深蓝。颗粒：从无到有，由非特异性到特异性。㈢、血细胞的正常形态学特征1、红细胞系统原红（normoblast）早幼红（basophilicnormoblast）中幼红（polychromaticnormoblast）晚幼红（orthochromaticnormoblast）原红细胞：早幼红细胞：中幼红细胞2、粒细胞系统原粒（myeloblast）早幼粒（promyelocyte）中幼粒（myelocyte）：中性、嗜酸、嗜碱晚幼粒（metamyelocyte）杆状核粒（stabgranulocyte,bandgranulocyte）分叶核（Segmenteelgranulocyte）原粒细胞早幼粒细胞中性中幼粒细胞晚幼粒细胞杆状核粒细胞嗜酸粒细胞（中幼、晚幼、杆状核、分叶核嗜碱粒细胞（早幼、中幼、晚幼、杆状核、分叶核）3、淋巴细胞系统原淋（Lymphoblast）幼淋（prolymphocyte）淋巴（lymphocyte）大淋巴细胞小淋巴细胞原淋巴细胞幼淋巴细胞：大淋巴细胞小淋巴细胞4、浆细胞系统原浆（plasmablast）幼浆（proplasmacyte）浆细胞（plasmacyte）原浆细胞幼浆细胞浆细胞5、单核细胞系统A.原单（monoblast）B.幼单（promonocyte）C.单核（monocyte）D.吞噬（maerophage）ABC原单核细胞幼单核细胞单核细胞6、巨核细胞系统原巨（megakaryoblast）幼巨（promegakaryocyte）颗粒巨（granularmegakaryocyte）产板巨（thrombacytogenousmegakaryocyte）裸核（nakednucleous）原巨核细胞幼巨核细胞颗粒型巨核细胞产血小板型巨核细胞推片推片、染片的质量

正常骨髓象（油镜）缺铁性贫血骨髓象溶血性贫血骨髓象巨幼细胞性贫血骨髓象地中海贫血

慢性ITP骨髓象（高倍镜）幼红细胞形态异常核间桥（细胞内）核间桥（细胞外）核出芽不对称双核三核幼红多核幼红、点彩不对称核分裂象核碎裂幼红细胞多伪足核畸形巨大成熟红细胞原粒I型：核圆形平坦，染色质疏松核仁明显胞浆中无颗粒.原粒II型：在I型基础上胞浆有少数细小颗粒早幼粒细胞：核有偏位，染色质聚集，颗粒增多急性非淋巴细胞型白血病原粒白AMLM2阿