生物a淀粉酶的固定化与淀粉溶液的检测浙科选修

a-淀粉酶的固定化与淀粉水解作用的检测知识结构二、a-淀粉酶的固定化与淀粉水解作用的检测一、固定化技术基础知识一、固定化技术基础知识

固定化技术：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括吸附法、包埋法、化学结合法（将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上）。包埋法化学结合法物理吸附法细胞多采用包埋法固定酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定化反应方式

不管是固相柱还是固相悬浮体，回收后，在一定条件下贮存，还可以利用。1.使底物溶液通过装有固相酶的柱，柱留出液即为酶催化的产物。2.有时也可将固相酶或固定化细胞悬浮于底物溶液中，一定时间后溶液即成酶催化的产物。实验原理α-淀粉酶β-淀粉酶

糖化淀粉酶

淀粉糊精麦芽糖葡萄糖二、α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测

运用吸附法将α-淀粉酶的固定在石英砂上。一定浓度的淀粉溶液经过固定化的α-淀粉酶催化后，生成糊精，使流出液加入KI-I2指示液后呈红色，表明水解产物糊精生产。固定化装置—层析柱实验材料制备

5mmol/LKI-I2溶液称取0.127g碘和0.83g碘化钾。加蒸馏水100ml。a-淀粉酶的固定化在烧杯中将5mga-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中。再加入5g石英砂，不时搅拌，30分钟后装入层析柱中。用10倍体积的蒸馏水洗涤此层析柱以除去未吸附的游离淀粉酶，流速控制为1ml/min。可溶性淀粉溶液取50mg可溶性淀粉溶于100ml热水中，搅拌均匀。实验步骤2.试验后，用10倍体积的蒸馏水洗涤此层析柱，放置在4℃冰箱里，几天后再重复上述实验，看是否有相同结果。1.将灌注了固定化酶的层析柱放在铁架台上，用滴管滴加淀粉溶液，使淀粉溶液已0.3mL/min的流速过柱。在流出5mL后接收0.5mL流出液，加入1-2滴KI-I2

溶液，观察颜色。用水稀释1倍后再观察颜色。吸附有α-淀粉酶的石英砂淀粉溶液HST层析住实验结果12341、2mL水+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉液+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉滤液+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉滤液+1~2滴KI-I2溶液+稀释1倍实验注意事项a.控制滴灌流速。0.3mL/min的流速，我们就可以控制每分钟滴管流出量为每分钟6滴（6=0.3mL/50uL）。这样做的目的是控制流速让淀粉和淀粉酶充分接触，反应。b.显色。在流出5mL后接取0.5mL过滤液，然后向试管中加入1-2滴KI-I2溶液。切记，KI-I2溶液不要加入太多，以免碘液颜色覆盖糊精淀粉反应后的颜色。谢谢！螺蛳粉

螺蛳粉vzg79wcv无存恐怕已经是确信无疑的事情了。而回家探亲的张老乡还全然不知道这里已经遭受到如此大的灾难，还在兴致勃勃地准备携家眷前来呢。即使听到这里已经遭难的消息时，大概也已经是在南下的途中了。如果他一定要来看个究竟，到时候全家人可如何在这个遭受了如此大劫难的汉口镇上落脚啊！想到这些，耿老爹不禁潸然泪下。大水退去之后，耿家父子们首先是清理开楼梯，然后下得楼来将门里的淤泥铲开一个空间。打开门后，再将一楼内地板上和窗台上的淤泥全部清理到门外面的路边儿上。最后，耿英拿钥匙好不容易打开抽屉上的小锁子，用力拉开抽屉将零用的散碎银子和铜板全部取出来，用一小块布包了拿到楼上清理干净。只可惜了多半店铺的粮油米面，全部都给毁掉了。再继续清理到小院儿里，发现驴和平车，以及简易车棚早已没了踪影，而且水井已经被浑水倒灌，恐怕在短期内不能再用了。说起来，耿家父子四人应该是很幸运的了。无情的洪水虽然冲走了立下汗马功劳的毛驴和平车，损失了一楼店铺内所有的粮油米面，但四个人全都安然无恙，而且手里还尚有一些银两，不至于两手空空的。此外，二楼上还存有一些粮油米面和一大水缸的饮用水，勉强维持几日问题还不算太大。接下来的几天，幸存下来的一些人开始清理街道，而更多的人则已经在准备或开始纷纷外逃了。原来，这次长江决堤只发生在北岸，南岸一点儿没有受到损害，这些人是准备渡江南下谋生的。前思后想一番之后，耿老爹和三个孩子商量：“这场大水，已经使周围数百里今年不可能再有多少收成了，而且镇上的人口也损失了一大半。看来，咱们的粮油零售店已经不可能在这里继续维持下去了。我想啊，现在唯一的办法只能是过江去再做打算了。”耿正兄妹三人面面相觑。听爹爹说得在理，都点头称是。于是，耿老爹当即拍板：“事不宜迟，那我们及早准备动身。”没有了毛驴和平车，耿老爹和耿正只能四处寻找扁担和箩筐。但是，在这场罕见的大洪灾之后，偌大的汉口镇已经被洗劫一空，像扁担和箩筐这一类的家伙什儿，大多已经随着洪水漂走了。父子俩人转了大半天，好不容易才寻得一副，耿老爹不惜重金买了下来。由于小二楼的房主已经在这场大洪灾中遇难了，所以，耿老爹不需要交涉退房事宜，收拾好自己的东西抬腿走人即可。想到张老乡在临别时曾经说，待十一月里返回来之后要亲自到店铺送书信来，耿老爹的心里一阵阵作痛。