生物化学蛋白质氨基酸

蛋白质初步认识一、蛋白质的概念二、蛋白质的生物学意义三、蛋白质的化学组成一、蛋白质的概念蛋白质：较复杂的含氮生物有机大分子，是生物体内一切细胞的重要组成部分，是生命的重要物质基础，其基本组成成分是氨基酸.

★蛋白质是有20种α-氨基酸通过肽键相互连接而成的一类具有特定空间构象和生物学活性的高分子有机化合物。二、蛋白质的生物学意义蛋白质是一切生物细胞和组织的主要组成部分，是生命活动所依据的物质基础。2.生物的各种生物功能也都靠蛋白质体现。——蛋白质在生物体系中的质和量质：蛋白质是一切生命活动的体现者，有什么样的蛋白质就能表达出什么样的生物性状。量：原生质的各种成分比例１、无机盐1—1.5%２、糖类和核酸1—1.5%３、脂类1—2%４、蛋白质7—10%５、水80—90%

蛋白质是细胞和生物体中最重要的物质，它对生命的重要性体现在两个字上：质与量上。三、蛋白质的化学组成——蛋白质的元素组成

CHONS（50%）（7%）（23%）（16%）

（0～3%）Others:P、Cu、Fe、Zn、Mn、Co、Se、I磷铜铁锌锰钴硒碘氮含量——一般15%—17％——平均16%——凯氏定氮。

蛋白质含量＝蛋白氮×6.25蛋白质分子结构层次——结构和构象C、H、O、N等

20种氨基酸肽蛋白质分子X-射线衍射法第二节氨基酸通式、分类、性质、制备

（一）氨基酸的通式和手性或非极性氨基酸（二）氨基酸的分类、结构和代号极性氨基酸——不带电负电正电——氨基酸的分类方式Gly(1)按R的极性(1)按R的结构——必须氨基酸、稀有氨基酸和非蛋白质氨基酸必需氨基酸：

自身不能合成或难以合成、必须从食物中摄取的氨基酸。Met,Trp,Lys,Val,Ile,Leu,Phe,Thr。假、设、来、写、一、两、本、书。稀有氨基酸…非蛋白质氨基酸…（三）氨基酸的性质状态、熔点、溶解性、光吸收特性1、一般的物理性质

组成蛋白质的氨基酸中，Trp、Tyr和Phe对紫外光有一定的吸收，这是因为它们分子中含有苯环，是苯环的共轭双键造成的，这三个氨基酸的光吸收都在280nm附近。1）氨基酸的酸碱性质和等电点2、化学性质

氨基酸所带静电荷为“零”时，溶液的pH值称为该氨基酸的等电点（isoelectricpoint），以pI表示。不同pH时氨基酸以不同的离子化形式存在等电点时，氨基酸主要以两性离子形式存在2）氨基酸的酸碱滴定曲线和等电点的计算K1=[Gly±][H+][Gly+]K2=[Gly-][H+][Gly±]pI时，[Gly+]=[Gly-][Gly±][H+]K1=[Gly±]K2[H+][H+]2=K1K2pH=（pK1+pK2）/2pI=（pK1+pK2）/2pI=（2.34+9.60）/2=5.97Gly101H+的物质的量OH-的物质的量酸性氨基酸，以Asp为例：碱性氨基酸，以Lys为例：3）化学反应——与甲醛的反应——与HNO2的反应2，4一二硝基氟苯——Sanger的反应DNFBDNP-氨基酸（黄色）——Edman反应

PITCPTC-氨基酸PTH-氨基酸——与茚三酮的显色反应蓝紫色化合物Pro黄色化合物米伦试剂：硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸、亚硝酸的混合液作用对象：酪氨酸、含酪氨酸的蛋白质；白色、加热变红色米伦氏反应——其它的显色反应乙醛酸反应色氨酸与乙醛酸和浓硫酸反应在界面上出现紫红色的环坂口反应试剂：碱性次氯（溴）酸钠、1-萘酚；作用对象Arg;红色产物福林反应试剂：磷钼酸和磷钨酸；作用对象：酪氨酸及含酪氨酸的蛋白质；蓝色（钼蓝与钨蓝混合物）——特殊氨基酸的反应-S-S-和-SH的氧化还原反应R-SH：HS-CH2CH2OH巯基乙醇（mercaptoethanol）HS-CH2COOH巯基乙酸（mercaptoaceticacid）HS-CH2(CHOH)2-CH2SH二硫苏糖醇（dithiothreitol,DTT）1氨基酸的制备1）蛋白质水解（1）酸水解（2）碱水解（3）酶水解2）化学合成3）生物法——微生物发酵（四）氨基酸制备、分析分离和应用

1）分配层析法：分配系数Kd=CACB2氨基酸的分离分析（1）纸层析

（2）薄层层析（3）凝胶层析（4）高效液相层析（HPLC：灵敏度10-12mol)

2）离子交换层析法原理：离子交换树脂为支持物，活性基团与溶液中的离子交换，在洗脱过程中，各种离子以不同的速度移动，从而分离。分离主要与各离子所带电荷有关