医疗器械微生物实验室及其设计要求

7/7医疗器械微生物实验室及其设计要求

《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械实施细则》和《医疗器械生产质量管理规范植入性医疗器械实施细则》中第八章监视和测量规定：生产企业应当建立符合要求并与生产产品相适应的无菌检验室。实际工作中不仅有无菌实验室，还包括阳性对照室、微生物限度室等，统称为微生物实验室。本文对微生物相关的基础知识进行初步探讨。

1微生物实验室简介

医疗器械实验室包括理化实验室和微生物实验室。理化实验室应设检验装置，主要检测物理性能和化学性能；微生物实验室，微生物检测按GB/T50073-2013《洁净厂房设计规范》、GB/T50591-2010《洁净室施工及验收规范》建立并实施；其中的生物学评价检验，企业一般不设检验室，而是委托检测机构进行检测。微生物实验室应进行基础的实验：（1）按照该产品的标准要求（GB/T14233.2《医用输液、输血、医用器具检验方法第2部分生物学试验方法》或中国药典），对产品进行无菌检验；（2）对原材料、半成品、成品的初始污染菌检测；（3）对洁净室（区）进行微生物限度检测，其中包括纯化水、台面、工作人员手等；（4）细菌内毒素检查。

2微生物实验室设计要求

微生物实验室设计包括：人员，培养基，菌种，器具及工作服清洗，实验室布局，洁净室换衣流程。2.1微生物实验人员（1）应当是专职人员，并且是本专业或与产品相适应的专业人员；（2）应当经过与岗位要求相适应的培训，具有相关的理论知识和实际操作技能；（3）应当定期进行卫生和微生物学基础知识、洁净作业等方面培训；（4）应当每年至少体检一次。患有传染性和感染性疾病的人员不得从事此工作。

2.2培养基

培养基应具有良好的促进菌落生长能力，在规定的条件和环境下灭菌和贮藏，通过接种不同的菌种并观察生长状态，进行灵敏度试验和培养基适用性检查。

2.3试验用菌种

菌株的采购、复活和传代应满足《中国药典》要求。实验室常用菌株采购一般为0代冻干粉、二代商用斜面菌株、定量菌株。《中国药典》2020版所需菌株来源于CMCC（中国医学细菌保藏管理中心）。试验菌株的传代应严格控制，不得超过5代，防止过度传代增加菌种变异风险。菌株在培养基上培养一次，即为一代。

下表为实验室常用菌株及编号

序号菌种名称菌种编号1金黄色葡萄球菌CMCC(B)260032铜绿假单孢菌CMCC(B)101043枯草芽孢杆菌CMCC(B)635014生孢梭菌CMCC(B)649415白色念珠菌CMCC(F)980016黑曲霉CMCC(F)98003

2.4器具及工作服清洗

实验器具：用纯化水清洗后（若有污垢，需用中性洗涤剂浸泡后，清洗干净，晾干），在121℃30min条件下，进行高压蒸汽灭菌处理。工作服：不同洁净区域和阳性间的工作服和工作鞋每周至少洗一次，并且要分开清洗，整理。洗涤剂为洗衣液和消毒液，用纯化水洗涤。

2.5实验室布局

根据《中国药典》要求：单向流空气区域、工作台面及受控环境应定期按GB/T16292-2010《医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》、GBT16293-2010《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》、GBT16294-2010《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度确认。其中包括无菌实验室、细菌限度室、阳性对照间等。

洁净度

无菌实验室和细菌限度室应配置超净工作台，且符合洁净度10000级条件下的100级洁净度环境。在实验过程中应检查工作台洁净度，步骤包括：取3只已灭菌培养基，在超净工作台左、中、右位置各放1个，打开盖子并暴露30分钟，取出做好标注，放入30-35℃培养箱中培养48小时后检查，结果3只培养基生长的菌落数平均应不超过1个。

刚进入医疗器械行业，举例两种实验室布局类型：图1和图2。

图1

图2

实验室布局设计的基本原则是既要最大可能防止微生物的交叉污染，又要防止实验过程对环境和人员造成危害。应充分考虑到微生物实验室操作规范和实验室安全要求。通常实验室划分成洁净或无菌操作区域和活菌操作区域，同时，根据试验目的不同，有效分隔不相容或相互产生干扰的实验活动，将交叉污染的风险降到最低。

2.6洁净室换衣流程

进出洁净室或实验室的更换衣服流程，洁净室或实验室人流通道和物流通道分开，避免出现交叉污染。物品进入洁