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文档简介

生物技术与疾病诊断成员：蔡木纯、林乐珊、吴洁丹杨俊玲、郑冬莉免疫酶技术——ELISA酶联免疫吸附试验免疫酶技术(enzymeimmunoassay)：

是将抗原和抗体的特异性免疫反应与酶的催化反应相结合而建立的一种免疫检测技术。就是利用酶标记抗体或抗原，以检测相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。常用的ELISA诊断技术1.测定抗体的间接ELISA病原体或其它外源大分子唔知进入机体后都可能刺激机体产生相应的抗体，所以可以通过检测某种病原体的相应抗体来诊断机体是否曾经被某种滨海衣原体所感染，达到诊断的目的！

2.测定抗原的双抗体加薪ELISA病原体及其大分子唔知进入机体后都可能称为一种抗原，所以检测机体内的抗原同样可以诊断机体是否感染了相应的病原体。ELISA检测抗原Ag+Ab*↔Ag-Ab*ELISA检测抗体

Ab+Ag*↔Ab-Ag*ELISA试剂单克隆抗体技术单克隆抗体优点：高度纯一高度专一应用：疾病的诊断和治疗(生物导弹)生物大分子的鉴定、定位和分离纯化特定细胞或病毒的鉴定、定位和分离杂交瘤细胞的筛选：B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞脾细胞/脾细胞骨髓瘤细胞/骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞脾细胞筛选出不能长期存活不能长期存活培养上清中X抗体的检测克隆化培养单克隆杂交瘤细胞培养上清中X抗体的检测杂交瘤细胞可持续分泌单克隆抗体规模化培养获得大量单克隆抗体动物免疫细胞融合混合细胞的HAT筛选)分泌X抗体B淋巴细胞骨髓瘤细胞X抗原B淋巴细胞瘤的突变株培养数天后细胞死亡无限生长细胞分泌X抗体只有杂交瘤细胞可长期存活下来BALB/c杂交瘤技术操作流程图解基因诊断一.概念基因诊断：应用分子生物学技术,从DNA/RNA水平检测分析致病基因的存在,变异和表达状态从而对疾病作出诊断的技术二、基因诊断的特点针对性强：以探测疾病基因为目标，属于“病因诊断”。特异性高：以分子杂交技术为基本原理灵敏度高：基因探针带有十分敏感的检测标记，可从人类长达3×106kb的基因组中检测出某一基因的单碱基改变。而且待测标本微量。适应性强：基因探针可为任何来源，任何种类，探针序列可为已知亦可未知，检测目标可为内源基因亦可外源基因，诊断范围广早期诊断：基因诊断不仅可对有表型出现的疾病作出明

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