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ICS65.020.30CCSB4113河 北 省 地 方 标 准DB13/T5573—2022鸡粪肠球菌病综合诊断技术规程20222022053120220701河北省市场监督管理局发布前 言GB/T本文件由河北省农业农村厅提出。本文件起草单位：河北工程大学、河北征宇制药有限公司。鸡粪肠球菌病综合诊断技术规程范围本文件规定了鸡粪肠球菌病临床诊断、实验室诊断和综合判定等技术要求。本文件适用于鸡、鸭、鹅、鸽子、鹌鹑等粪肠球菌病诊断。（）GB16548 下列术语和定义适用于本文件。粪肠球菌Enterococcusfaecalis为革兰氏阳性，过氧化氢阴性球菌。缩略语下列缩略语适用于本文件。下列缩略语适用于本文件。BEAA：叠氮钠-结晶紫-七叶苷培养基；PCR：聚合酶链式反应；H-E染色：苏木精-伊红染色；TSA：胰蛋白胨大豆琼脂培养基；TSB：胰蛋白胨大豆液体培养基；SDS：十二烷基磺酸钠；当禽出现以下部分或全部情形时，可作为初步诊断的依据。采用荧光定量PCR检测技术，结合临床症状确诊。PCR6.1.1样品采集11.5mLEP20DNA0.2g0.05g～0.1g于1.5mLEP500μL（400mMTris-HCl[pH8.0]，60mMEDTA）[pH8.0]，150mMNaCl，1SDS）150μL（pHg170%50μLmMTris，1mM参照GenBanksodAPrimerExpress5.0预360bp）：上游引物F：5ʹ-ACTTATGTGACTAACTTAACC-3ʹ下游引物R：5ʹ-TAATGGTGAATCTTGGTTTGG-3ʹPCR采用25μLPremixEx0.51.0μL，25μL935min；9315s，5815s，7230s，进行40727min，于4PCR结合临床症状、病理变化和荧光定量PCR检测结果，可确诊鸡粪肠球菌病。7剖检尸体和污染物处理病害鸡只及其产品的生物安全处理应符合GB16548的规定。PCR“S”值Tm86结合临床症状、病理变化和荧光定量PCR检测结果，可确诊鸡粪肠球菌病。7剖检尸体和污染物处理病害鸡只及其产品的生物安全处理应符合GB16548的规定。附录A（

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