SARS检测实验室生物安全操作指南

临床实验室生物

安全导则卫生部临床检验中心申子瑜病原微生物实验室安全管理条例

（征求意见稿）第一章总则

为了加强病原微生物实验室(以下称实验室)安全管理，保护实验室工作人员和公众的健康，制定本条例。本条例所称病原微生物：是指能够使人或者动物致病的微生物。

条例目标及适用范围保护实验室工作人员、社会公众和环境适应于从事病原微生物研究、教学、生产、诊断检测等所有实验室

国家对病原微生物按照其对人类和动物以及环境的危害程度实行分类管理，对实验室根据其对病原微生物的防护水平实行分级管理。国家实行统一的实验室生物安全标准。病原微生物的分类和管理l、国家将病原微生物分为四类2、第三类、第四类称为高致病性病原微生物3、卫生部负责制定并调整四类病原微生物的种类

第一类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人或者动物疾病的微生物。第二类病原微生物，是指能够引起人或者动物疾病，发生实验室暴露可能引起感染，但不会引起严重危害，且能够有效实施预防和治疗的微生物。

第三类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严重疾病，但不易在人或者动物间传播，且能够有效实施预防和治疗的微生物。第四类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严重疾病，容易在人或者动物间传播，或者没有有效的预防和治疗措施的微生物。第三类、第四类病原微生物统称为高致病性病原微生物。国家根据实验室防护水平，将实验室分为一级、二级、三级、四级。

临床诊断、检测检验工作可以在二级实验室中进行。但是，发现高致病性病原微生物的其病原学的分离鉴定工作应当转移到三级以上的实验室中进行。中华人民共和和国国家标准准

GB19489-2004

实验室室生物安全全通用要求一、实验室生生物安全防护护分级一级生物安全全防护实验室室，简称BSL1或P1二级生物安全全防护实验室室，简称BSL2或P2三级生物安全全防护实验室室，简称BSL3或P3四级生物安全全防护实验室室，简称BSL4或P4一级生物安全全防护实验室室实验室结构和和设施、安全全操作规程、、安全设备适适用于对健康成年人人已知无致病病作用的微生物，如如用于教学的的普通微生物物实验室等。。二级生物安全全防护实验室室实验室结构和和设施、安全全操作规程、、安全设备适适用于对人或环境具具有中等潜在在危害的微生物。三级生物安全全防护实验室室实验室结构和和设施、安全全操作规程、、安全设备适适用于主要通过呼吸途径径使人传染上上严重的甚至至是致死疾病病的致病微生生物及其毒素素，通常已有有预防传染的的疫苗。艾滋病毒的研研究（血清学学实验室除外外）应在三级级生物安全防防护实验室中中进行。四级生物安全全防护实验室室实验室结构和和设施、安全全操作规程、、安全设备适适用于对人体具有高高度的危险性性，通过气溶溶胶途径传播播或传播途径径不明，目前前尚无有效的的疫苗或治疗疗方法的致病病微生物及其其毒素。二、二级生物安全防护实验室

安全设备和个体防护

可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜(Ⅱ级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜(Ⅱ级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。

上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或安全离心杯，且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料，则可在实验室中进行。当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)。

4.在实验室中应应穿着工作服服或罩衫等防防护服。离开开实验室时，，防护服必须须脱下并留在在实验室内。。不得穿着外外出，更不能能携带回家。。用过的工作作服应先在实实验室中消毒毒，然后统一一洗涤或丢弃弃。5.当当手可能接触触感染材料、、污染的表面面或设备时应应戴手套。如如可能发生感感染性材料的的溢出或溅出出，宜戴两副副手套。不得得戴着手套离离开实验室。。工作完全结结束后方可除除去手套。一一次性手套不不得清洗和再再次使用。三、实验室设设计和建造的的特殊要求每个实验室应应设洗手池，，宜设置在靠靠近出口处。。实验验室室围围护护结结构构内内表表面面应应易易于于清清洁洁。。地地面面应应防防滑滑、、无无缝缝隙隙。。实验验台台表表面面应应不不透透水水，，耐耐腐腐蚀蚀、、耐耐热热。。实验验室室中中的的家家具具应应牢牢固固。。为为易易于于清清洁洁，，各各种种家家具具和和设设备备之之间间应应保保持持一一定定间间隙隙。。应应有有专专门门放放置置生生物物废废弃弃物物容容器器的的台台(架架)。。实验验室室应应有有可可开开启启的的窗窗户户，，应应设设置置纱纱窗窗。。在实实验验室室所所在在的的建建筑筑内内应应高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌器器，，并并按按期期检检查查和和验验证证，，以以保保证证符符合合要要求求。。应设设置置洗洗眼眼设设施施，，必必要要时时应应有有应应急急喷喷淋淋装装置置。。实验验室室门门宜宜带带锁锁、、可可自自动动关关闭闭，，门门有有可可视视窗窗。。实验室出出口应有有在黑暗暗中可明明确辨识识的标识识。应通风，，如使用用窗户自自然通风风，应有有防虫纱纱窗。二级生物物安全防防护实验验室操作作要点实验室人人口须贴贴上生物物危险标标志，注注明危险险因子、、生物安安全级别别、负责责人姓名名和电话话、进人人实验室室的特殊殊要求及及离开实实验室的的程序；；禁止非工工作人员员进人实实验室。。参观实实验室等等特殊情情况须经经实验室室负责人人批准后后方可进进入；禁止在工工作区饮饮食、吸吸烟、处处理隐形形眼镜、、化妆及及储存食食物；接触微生生物或含含有微生生物的物物品后，，脱掉手手套后和和离开实实验室前前要洗手手；以移液器器吸取液液体，禁禁止口吸吸；制定尖锐锐器具的的安全操操作规程程；按照实验验室安全全规程操操作，降降低溅出出和气溶溶胶的产产生；每天至少少消毒一一次工作作台面，，活性物物质溅出出后要随随时消毒毒；9.所所有培培养物、、废弃物物在运出出实验室室之前必必须进行行灭活，，如高压压灭活。。需运出出实验室室灭活的的物品必必须放在在专用密密闭防漏漏的容器器内储存存、运输输及消毒毒灭菌；；10.如如有条件件工作人人员应接接受必要要的免疫疫接种(如卡卡介苗等等)；11.必必要时收收集从事事危险性性工作人人员的基基本血清清留底，，并根据据需要定定期收集集血清样样本，应应有检测测报告，，如有问问题及时时处理；；12.将将生物安安全程序序纳入标标准操作作规范或或生物安安全手册册，由实实验室负负责人专专门保管管，工作作人员在在进入实实验室之之前要阅阅读规范范并按照照规范要要求操作作；13.工工作人员员要接受受有关的的潜在危危险知识识的培训训，掌握握预防暴暴露以及及暴露后后的处理理程序。。每年要要接受一一次最新新的培训训；14.实实验设备备在运出出修理或或维护前前必须进进行消毒毒；15.人人员暴露露于病毒毒时，及及时向实实验室负负责人汇汇报并记记录。安全管理理制度实验室内内务管理理制度尖锐器具具安全使使用制度度实验室消消毒防护护制度标本采集集运输制制度废弃物处处理制度度工作人员员防护制制度差错事故故处理制制度尖锐器具具安全使使用制度度除特殊情情况外，，禁止在在实验室室使用针针、注射射器及其其他利器器。尽可可能使用用塑料器器材代替替玻璃器器材。尽可能能应用用一次次性注注射器器，用用过的的针头头禁止止折弯弯、剪剪断、、折断断、重重新盖盖帽、、从注注射器器取下下，禁禁止用用手直直接操操作。。用过过的针针头必必须直直接放放入防防穿透透的容容器中中。非非一次次性利利器必必须放放入厚厚壁容容器中中并运运送到到特定定区域域消毒毒，最最好进进行高高压消消毒。。尽可能能使用用无针针注射射器和和其他他安全全装置置。禁止用用手处处理破破碎的的玻璃璃器具具。装装有污污染针针、利利器及及破碎碎玻璃璃的容容器在在丢弃弃之前前必须须消毒毒。四、为为何需需使用用生物物安全全柜?考虑对对操作作人员员，操操作样样品，，操作作环境境的保保护。。美国国国家卫卫生研研究院院NIH标标准与与美国国国家疾疾病控控制中中心CDC实验验室生生物安安全级级别标标准中中要求求：应用于于临床床、诊诊断、、教学学、研研究、、或者者生产产设施施，开开展有有关内内源性性和外外源性性病源源的工工作，，若因因暴露露而吸吸入该该病源源,会会引引发严严重的的、可可能致致死的的疾病病。需使用用ClassII级级生物物安全全柜实验人人员受受过专专业训训练应有管管道化化的排排气系系统，，排出出的空空气不不再建议生物安全柜每年经过测试和确证

生物安安全设设备分分类1.超超净台台2.抽抽风橱橱3.CLASSI一一级级生物物安全全柜4.CLASSII二二级级生物物安全全柜5.CALSSIII三三级生生物安安全柜柜（又又称手手套柜柜）1、超超净台台正压柜柜气流从从顶部部或底底部经过过过滤器器后从从操作作区正正面流向工工作台台面，，被样品污污染的的气流流排出出柜外外，没有循循环气气流。。超净台台保护护样品品不受受污染染，适用于于普通通实验验室或或1级级生物物安全全水平平中对人员员和环环境无无保护护要求求的实实验。2、CLASSI一一级生生物安安全柜柜负压柜柜气流经经操作作人员员向内内进入入工作作台面面，被被污染染的气气流通通过HEPA过过滤器器外排排出柜柜外，，没有有循环环气流流。CLASSI级BSC保护操操作人人员和和环境境不受污污染，，适用于于生物物安全全水平平中对实验验样品品无保保护要要求的的实验验。3、CLASSII二级级生物安全全柜层流负压柜柜它们可以安安全的保护护样品、人人员和环境境。II级生生物安全柜柜分为A型型（30%排在室内内）和B型；B型中又分分为B1（（70%接管道外外排）、、B2（100%接接管道外排排）、B3（30%接接管道外排排）。CLASSIIA生生物安全柜柜（1）进入入气流最低低流速平均均为0.38米/秒秒)；（2）30%气流流经HEPA过滤后外外排在室内；（3）被被污染的的管道和和气流通通道为正正压状态态生物安全全柜空气气流向CLASSIIB1生生物安全全柜（1）进进入的气气流最低低流速平平均为0.5米米/秒；；（2）70%气气流通过过专用的的管道经经HEPA过滤滤后接管管道外排排至室外外；（3）所所有受生生物污染染的管道道和气流流通道均均在负压压状态下下或被负负压的管管道或气气流通道道包围。。CLASSIIB2生物安安全柜（1）进进入气流流最低流流速平均均为0.5米/秒；（2）所所有向内内进入的的气流和和向下的的气流均均通过HEPA过滤后后排到室室外而不不在柜内内循环，，也不能能排入实实验室；；100%接管道道外排。（3）所所有的被被污染的的管道和和气流通通道都在在负压状状态下或或被直接接外排的的负压压管道或或气流管管道所包包围。CLASSIIB3生物安安全柜（1）进进入的气气流最低低流速为为0.5米/秒秒；（2）外排到室室外的气气流（30%））经过HEPA高效过过滤；（3）所所有经生生物污染染的管道道和气流流通道均均为负压压状态；；（4）与与CLASSIIA型气气流方向向相同，，但与CLASSA型不同同的是，，它30%外外排气是是接管道道排到室外外的。II级生生物安全全柜Airflow4.CLASSIII生物安安全柜（（手套套柜）全封闭的的、气密密结构的的通风柜柜；通过橡胶胶手套进进行操作作；柜内保持持至少120Pa的负负压；供气通过过HEPA抽入入内；外排的气气流经过过双层HEPA过滤或或经HEPA后再经经燃烧处处理。CLASSIII型型BSC适适用于于BSL3、、BSL4的生物物实验验。高效空气过滤工作人员安全无涡流单向流空气实验对象不受污染手套箱式操作口抽风橱无是是否否I级有是否否否II级有是是是否III级有是是是是生物安安全装装置异异同Ⅰ级、、Ⅱ级级和ⅢⅢ级生生物安安全柜柜的区区别BSC表面风速（m/s）%气流在循环排除排风系统Ⅰ级0.360100硬管道Ⅱ级A1型0.38-0.517030派到室内或套管式的连接向室外排风的Ⅱ级A2型0.517030派到室外或套管式的连接Ⅱ级B1型0.513070硬管道Ⅱ级B2型0.510100硬管道Ⅲ级型NA0100硬管道根据保保护类类型的的需要要选择择适宜宜的生生物安安全柜柜保护类型BSC的选择针对危险组1-3微生物的人员保护Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级针对危险组4微生物的人员保护，手套箱实验室Ⅲ级针对危险组1-3微生物的人员保护,防护服实验室Ⅰ级、Ⅱ级产品保护Ⅱ级,仅当涉及层流时用Ⅲ级针对微量的不稳定的放射性核/化学药品的保护Ⅱ级B1,向室外排风的Ⅱ级A2针对不稳定的放射性核/化学药品的保护Ⅰ级、Ⅱ级B2，Ⅲ级对各级级生物物安全全水平平实验验室的的要求求生物安全柜生物安全级别一级二级三级四级Ⅰ级不需要随意需要不需要Ⅱ级不需要最好有需要需要，在防护服实验室中使用Ⅲ级不需要不需要最好有需要，在安全柜室使用五、废废弃物物处理理国务院院《医医疗废废物管管理条条例》》卫生部部令《《医疗疗卫生生机构构医疗疗废物物管理理办法法》卫生部部文件件《医医疗疗废物物分类类目录录》》什么是是医疗疗废物物？医疗废废物医医疗卫卫生机机构在在医疗疗、预预防、、保健健以及及其他他相关关活动动中产产生的的具有有直接接或者者间接接感染染性、、毒性性以及及其他他危害害性的