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第六章

蛋白质的生物合成biosynthesisofprotein1第六章

蛋白质的生物合成biosynthe罗塞塔石碑年仅11岁的法国少年,商博良决心解开碑文的秘密,真是令人惊奇不已。他为此勤奋工作21年,对照希腊文,终于读通埃及国王托勒密,及王后克里奥帕特拉,两个象形文字的秘密。2罗塞塔石碑年仅11岁的法国少年,2蛋白质的生物合成,即翻译:以mRNA为模板形成蛋白质的过程,将核酸中4种核苷酸序列编码的遗传信息,通过遗传密码破译的方式,

解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序。3蛋白质的生物合成,即翻译:3主要内容参与蛋白质生物合成的主要物质蛋白质生物合成的过程翻译后的加工4主要内容参与蛋白质生物合成的主要物质4蛋白质生物合成体系n氨基酸蛋白质mRNA和密码子、tRNA、rRNA酶、辅助因子、蛋白质因子、ATP、GTP、无机离子合成方向:NC端

5蛋白质生物合成体系n氨基酸(一)、mRNA——翻译的模板CAACUGCAGACAUAUAUGAUACAAUUUGAUCAGUAU5/3/-Gln-Leu-Gln-Thr-Tyr-Met-Ile-Gln-Phe-Asp-Gln-Tyr-

密码子6(一)、mRNA——翻译的模板CAACUGCAGACAUAUmRNA分子中,从5’-3’每三个相邻的碱基组成的三联体,代表某个氨基酸共有64种61种代表20中氨基酸3种(codon)AUG起始密码蛋氨酸密码子:细菌中GUG表示起始的甲酰蛋氨酸UAA(琥珀密码子)UAG(乳石密码子)UGA(赭石密码子)7mRNA分子中,从5’-3’每三个相邻的EstablishedtheinvitrosystemforrevealingthegeneticcodesDevisedmethodstosynthesizeRNAswithdefinedsequences8EstablishedtheinDevisedmetNirenberg以均聚物共聚物为模板指导多肽的合成,寻找到了破译遗传密码的途径PolyU

为模板,产生的多肽链为PolyPhePolyC

为模板,产生的多肽链为PolyPro

PolyA

为模板,产生的多肽链为PolyLys无细胞体系-去模版9Nirenberg以均聚物共聚物为模板指导多肽的合成,寻找到膜过滤技术Thefilter-bindingassayfordetectingthebindingofatrinucleotidetoaspecificaminoacyl-tRNAmolecule:about50codonswereassignedbythissimpleandelegantmethod.10膜过滤技术Thefilter-bindingassayCopolymerofrepeatingdinucleotidesalways

leadtosynthesisofpolypeptidesofrepeating

dipeptides:

ABABABABABABAB--

aa1---aa2---aa1---aa2----

Khorana以共聚物指导多肽的合成,加快了破译遗传密码的步伐11Copolymerofrepeatingdinucle遗传密码表第一碱基(5’端)第二碱基第三碱基(3’-端)终止终止**在mRNA起始部位的AUG为起始信号12遗传密码表第一碱基第二碱遗传密码三联体,不重复、不间断

13遗传密码三联体,13方向性通用性简并性连续性

摆动性

遗传密码的特点绝大多数密码子对各种生物都适用5’3’14方向性遗传密码的特点绝大多数密码子对各种生物都适用5’同一氨基酸具有多种密码子同义密码第1、2位第3位决定密码的特异性摆动简并性:同义密码子——对应于同一种AA的不同密码子

Met和Trp仅一个密码子简并性的生物意义在于减少有害突变15同一氨基酸具有多种密码子同义密码第1、2位第3位决定密码的特遗传密码表第一碱基(5’-端)第二碱基第三碱基(3’-端)终止终止**在mRNA起始部位的AUG为起始信号16遗传密码表第一碱基第二碱碱基的改变仍有可能编码原来的AA17碱基的改变仍有可能编码原来的AA17密码子与反密码子的配对I

A、C、UUA、GGC、U反密码子识别密码子第1位(摆动配对)(tRNA)(mRNA)摆动性:

反密码与密码间不严格遵守常见的碱基配对规律第3位18密码子与反密码子的配对I决定密码的特异性第1、2位摆动性第3位19决定密码的19沿5’-3’方向连续阅读插入碱基缺失碱基移码突变

连续性:无标点、不重叠每三个核苷酸只编码一个氨基酸20沿5’-3’方向连续阅读插入碱基缺失碱基移码突变连续性:无5′….UACGGACAUCUG….3′5′….UACCGGACAUCUG….3′酪甘组蛋酪精苏半胱5′….UACGACAUCUG….3′酪天异亮插入缺失215′….UACGGACAUCUG….3′5′….UACCG密码子在蛋白质中出现的频率22密码子在蛋白质中出现的频率22密码的防错系统如第二位的碱基

U

极性的氨基酸;

C

非极性或不带电荷的极性侧链氨基酸;

A或G

极性的氨基酸;密码子在密码表中的分布有一定的规则:通常情况:第二位决定氨基酸的极性,第三位决定密码子的简并性。23密码的防错系统如第二位的碱基密码子在密码表中的分使碱基的变化有时不会引起氨基酸的变化——编码相同的AA,若引起氨基酸变化也是同类型氨基酸相互取代——理化性质接近的AA,这样,合成的蛋白质功能差别不会太大。——极性并具有碱性氨基酸第一位A或C第二位A或G前两位的碱基是AG

(AGN)——极性并具有酸性氨基酸这样的分布规律?24使碱基的变化有时不会引起氨基酸的变化——极性并遗传密码表第一碱基(5’-端)第二碱基第三碱基(3’-端)终止终止**在mRNA起始部位的AUG为起始信号25遗传密码表第一碱基第二碱(二)、tRNA——搬运氨基酸1.结合氨基酸:由ATP供能,将氨基酸结合在tRNA3’-CCA位置.

一种氨基酸有几种tRNA携带;2.反密码子:

决定所带氨基酸,并准确在mRNA上对号入座.ser5’tyr5’26(二)、tRNA——搬运氨基酸1.结合氨基酸:由ATP供能,氨基酰tRNA的表示方法精氨基酰tRNA:

arg-tRNAarg甲硫氨基酰tRNA:

met-tRNAmet丙氨基酰tRNA:

ala-tRNAala27氨基酰tRNA的表示方法精氨基酰tRNA:甲硫氨基酰tRNA(三)、核糖体——蛋白质合成的场所rRNA+蛋白质大亚基小亚基原核50s+30s=70s

真核60s+40s=80s

PAP位-肽酰基tRNA结合位;

A位-氨酰tRNA结合位;不同的tRNA结合位点:28(三)、核糖体——蛋白质合成的场所rRNA核糖体分类一类附着于粗面内质网参与分泌蛋白的合成;另一类游离于胞质,参与细胞固有蛋白质的合成功能:装配机,转肽酶活性,促进氨基酸合成肽粗面内质网29核糖体分类一类附着于粗面内质网参与分泌蛋白的合成;粗二、翻译的五个阶段翻译起始肽链延长肽链终止氨基酸的活化肽链折叠和加工进位转肽脱落移位30二、翻译的五个阶段翻译起始肽链延长肽链终止与翻译五个阶段有关的物质31与翻译五个阶段有关的物质31参与翻译的蛋白质因子阶段原核真核功能

IF1

IF2

eIF2

参与起始复合物的形成

IF3

eIF3、eIF4C起始CBPI

与mRNA帽子结合

eIF4A

BF

参与寻找第一个AUG

eIF5

协助eIF2、eIF3、eIF4C的释放

eIF6

协助60S亚基从无活性的核糖体上解离

EF-Tu

eEF1

协助氨酰-tRNA进入核糖体延长EF-Ts

eEF1

帮助EF-Tu、eEF1周转

EF-G

eEF2

移位因子终止RF-1

eRF

释放完整的肽链

RF-2

RF-332参与翻译的蛋白质因子阶段原核1.氨基酸的活化——氨酰tRNA的生成氨酰-tRNA合成酶氨基酰-tRNA

+AMP+PPi氨基酸活化态氨基酸+ATP+tRNA二、翻译331.氨基酸的活化——氨酰tRNA的生成氨酰-tRNA合成酶氨基酸+ATP+tRNA氨基酰氨基酰-tRNA+AMP+ppi氨基酰tRNA合成酶ATPPPiH2N-CH-C-OHR

OH2N-CH-C~O-ACC-tRNAR

O氨基酰tRNA合成酶tRNA氨基酰tRNAGlyGlyGly

H2N-CH-C-AMP-ER

O34氨基酸+ATP+tRNA氨基酰氨基酰-tRNA+AM氨基酰tRNA的生成氨酰-tRNA合成酶35氨基酰tRNA的生成氨酰-tRNA合成酶35

特异性强,催化特定氨基酸与特异的tRNA结合,每种氨基酸有特异的合成酶催化,此种特异性保证了遗传信息翻译的准确性

氨酰-tRNA合成酶:

36

特异性强,催化特定氨基酸与特异的tRNA结合,

氨酰-t识别氨酰-RNA合成酶的位点:倒L结构中参与此作用核糖体识别位点:倒L结构中TψC环与此有关。DHU环反密码环氨基酸臂关于tRNA37识别氨酰-RNA合成酶的位点:DHU环关于tRNA37tRNA与酶结合的模型tRNA氨酰-tRNA合成酶ATP38tRNA与酶结合的模型tRNA氨酰-tRNA合成酶ATP38大肠杆菌tRNAAla氨基酸臂是酶的辨认位点

辨认位点:73位3位-70位碱基对可变环-形成空腔39大肠杆菌tRNAAla氨基酸臂是酶的辨认位点辨认位点:73

4种tRNA的辨认核苷酸404种tRNA的辨认核苷酸402、起始阶段起始复合体大亚基mRNAMet-tRNA(fMet-tRNA)小亚基IF-1,2,3GTP412、起始阶段起始复合体大亚基mRNAMet-tRNA小亚基I起始复合物的形成过程(原核)12小亚基大亚基42起始复合物的形成过程(原核)1反密码子密码子43反密码子密码子43肽链的延长动画44肽链的延长动画443.肽链的延长阶段1延长因子(EF)EF-TEF-GEF-TuEF-Ts2GTP条件:453.肽链的延长阶段1延长因子(EF)EF-TEF-Tu2肽链延长过程中4个重复反应进位转肽脱落移位肽链延长过程中的耗能46肽链延长过程中4个重复反应进位转肽脱落移位肽链延长过程中的耗转肽反应:47转肽反应:474、终止阶段A位出现终止密码子释放因子

进入A位肽酰转移酶

变为水解酶作用在GTP帮助下多肽链水解大、小亚基分离。释放因子对终止密码子识别:

RF1识别UAA、UAG

RF2识别UAA、UGA,

RF3协助二者起作用。484、终止阶段A位出现终止密码子4三、蛋白质合成后的靶向输送概念:蛋白质合成后定向到达其功能部位过程靶向输送蛋白质结构中存在分选信号信号序列(信号肽)——指N末端特异氨基酸序列,可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位的序列。信号序列(signalsequence)49三、蛋白质合成后的靶向输送概念:蛋白质合成后定向到达其功能部新生多肽链的需要加工才能转变为天然构象的功能蛋白。主要包括:

肽链折叠为天然的三维结构肽链一级结构的修饰高级结构修饰四、蛋白质翻译后修饰50新生多肽链的需要加工才能转变为天然构四、蛋白质翻译后修饰50(二)、多肽链折叠为天然构象的蛋白质分子伴侣(molecularchaperon)

分子伴侣是细胞一类保守蛋白质,可识别肽链的非天然构象,促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。

1.热休克蛋白(heatshockprotein,HSP):

HSP70、HSP40和GreE族

2.伴侣素(chaperonins):

GroEL和GroES家族51(二)、多肽链折叠为天然构象的蛋白质分子伴侣(molec依赖于热休克蛋白Hsp70的折叠;依赖于热休克蛋白Hsp70和分子伴侣复合体的折叠多肽链折叠的三种形式分子伴侣非依赖性折叠52依赖于热休克蛋白Hsp70的折叠;依赖于热休克蛋白Hsp7伴侣素GroEL/GroES系统促进蛋白质折叠过程53伴侣素GroEL/GroES系统促进蛋白质折叠过程53催化错配二硫键断裂,形成正确二硫键,使蛋白质形成热力学最稳定天然构象。蛋白二硫键异构酶(内质网活性高)

肽-脯氨酰顺反异构酶在肽链合成需形成顺式构型时,可使多肽在各脯氨酸弯折处形成准确折叠。——是蛋白质三维构象形成的限速酶折叠过程需要的酶54催化错配二硫键断裂,形成正确二硫键,蛋白二硫键异构酶(三)、一级结构的修饰

1.N端修饰原核生物脱甲酰基酶Met-fMet-氨基肽酶真核细胞55(三)、一级结构的修饰1.N端修饰原核生物脱甲M2.氨基酸残基的修饰:

磷酸化、羟基化、乙酰化、糖基化…3.水解加工:酶前体的活化亚基聚合Hb4亚基的聚合辅基连接疏水脂链的共价连接高级结构的修饰562.氨基酸残基的修饰:亚基聚合Hb4亚基的聚合高级五、蛋白质生物合成的干扰和抑制

Interference&InhibitionofProteinBiosynthesis

抗生素(antibiotics)指微生物产生的能够杀灭或抑制细菌的一类药物。抗代谢药物指能干扰生物代谢过程,从而抑制细胞过度生长的药物,如:6-MP。某些毒素

也作用于基因信息传递过程。57五、蛋白质生物合成的干扰和抑制

Interference&(一)、抗生素类抗生素作用点作用原理应用四环素族(金霉素新霉素、土霉素)链霉素、卡那霉素、新霉素氯霉素、林可霉素红霉素梭链孢酸

放线菌酮嘌呤霉素原核核蛋白体小亚基原核核蛋白体小亚基原核核蛋白体大亚基原核核蛋白体大亚基原核核蛋白体大亚基真核核蛋白体大亚基真核、原核核蛋白体抑制氨基酰-tRNA与小亚基结合改变构象引起读码错误、抑制起始抑制转肽酶、阻断延长抑制转肽酶、妨碍转位与EFG-GTP结合,抑制肽链延长抑制转肽酶、阻断延长氨基酰-tRNA类似物,进位后引起未成熟肽链脱落抗菌药抗菌药抗菌药抗菌药抗菌药医学研究抗肿瘤药抗生素抑制蛋白质生物合成的原理58(一)、抗生素类抗生素作用点作用原理应用四环素族(金霉素新四环素族氯霉素链霉素和卡那霉素嘌呤霉素放线菌酮59四环素族氯霉素链霉素和卡那霉素嘌呤霉素放线菌酮59(二)、其他干扰蛋白质生物合成的物质毒素(toxin)干扰素(interferon)60(二)、其他干扰蛋白质生物合成的物质毒素(toxin)60

白喉毒素(diphtheriatoxin)的作用机理白喉毒素++延长因子-2(有活性)延长因子-2(无活性)61白喉毒素(diphtheriatoxin)的作用机理白喉干扰素的作用机理干扰素诱导的蛋白激酶dsRNA1.诱导eIF2磷酸化而失活ATPeIF2ADPeIF2-P(失活)Pi磷酸酶起始因子62干扰素的作用机理干扰素诱导的蛋白激酶dsRNA1.诱导e2.干扰素间接活化一种核酸内切酶,此酶使病毒mRNA降解,从而阻断蛋白质合成降解mRNAdsRNA干扰素AAPAPPPP252552-5AAPPPATP2-5A合成酶RNaseLRNaseL活化632.干扰素间接活化一种核酸内切酶,此酶使病毒mRNA降解,从谢谢!64谢谢!64第六章

蛋白质的生物合成biosynthesisofprotein65第六章

蛋白质的生物合成biosynthe罗塞塔石碑年仅11岁的法国少年,商博良决心解开碑文的秘密,真是令人惊奇不已。他为此勤奋工作21年,对照希腊文,终于读通埃及国王托勒密,及王后克里奥帕特拉,两个象形文字的秘密。66罗塞塔石碑年仅11岁的法国少年,2蛋白质的生物合成,即翻译:以mRNA为模板形成蛋白质的过程,将核酸中4种核苷酸序列编码的遗传信息,通过遗传密码破译的方式,

解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序。67蛋白质的生物合成,即翻译:3主要内容参与蛋白质生物合成的主要物质蛋白质生物合成的过程翻译后的加工68主要内容参与蛋白质生物合成的主要物质4蛋白质生物合成体系n氨基酸蛋白质mRNA和密码子、tRNA、rRNA酶、辅助因子、蛋白质因子、ATP、GTP、无机离子合成方向:NC端

69蛋白质生物合成体系n氨基酸(一)、mRNA——翻译的模板CAACUGCAGACAUAUAUGAUACAAUUUGAUCAGUAU5/3/-Gln-Leu-Gln-Thr-Tyr-Met-Ile-Gln-Phe-Asp-Gln-Tyr-

密码子70(一)、mRNA——翻译的模板CAACUGCAGACAUAUmRNA分子中,从5’-3’每三个相邻的碱基组成的三联体,代表某个氨基酸共有64种61种代表20中氨基酸3种(codon)AUG起始密码蛋氨酸密码子:细菌中GUG表示起始的甲酰蛋氨酸UAA(琥珀密码子)UAG(乳石密码子)UGA(赭石密码子)71mRNA分子中,从5’-3’每三个相邻的EstablishedtheinvitrosystemforrevealingthegeneticcodesDevisedmethodstosynthesizeRNAswithdefinedsequences72EstablishedtheinDevisedmetNirenberg以均聚物共聚物为模板指导多肽的合成,寻找到了破译遗传密码的途径PolyU

为模板,产生的多肽链为PolyPhePolyC

为模板,产生的多肽链为PolyPro

PolyA

为模板,产生的多肽链为PolyLys无细胞体系-去模版73Nirenberg以均聚物共聚物为模板指导多肽的合成,寻找到膜过滤技术Thefilter-bindingassayfordetectingthebindingofatrinucleotidetoaspecificaminoacyl-tRNAmolecule:about50codonswereassignedbythissimpleandelegantmethod.74膜过滤技术Thefilter-bindingassayCopolymerofrepeatingdinucleotidesalways

leadtosynthesisofpolypeptidesofrepeating

dipeptides:

ABABABABABABAB--

aa1---aa2---aa1---aa2----

Khorana以共聚物指导多肽的合成,加快了破译遗传密码的步伐75Copolymerofrepeatingdinucle遗传密码表第一碱基(5’端)第二碱基第三碱基(3’-端)终止终止**在mRNA起始部位的AUG为起始信号76遗传密码表第一碱基第二碱遗传密码三联体,不重复、不间断

77遗传密码三联体,13方向性通用性简并性连续性

摆动性

遗传密码的特点绝大多数密码子对各种生物都适用5’3’78方向性遗传密码的特点绝大多数密码子对各种生物都适用5’同一氨基酸具有多种密码子同义密码第1、2位第3位决定密码的特异性摆动简并性:同义密码子——对应于同一种AA的不同密码子

Met和Trp仅一个密码子简并性的生物意义在于减少有害突变79同一氨基酸具有多种密码子同义密码第1、2位第3位决定密码的特遗传密码表第一碱基(5’-端)第二碱基第三碱基(3’-端)终止终止**在mRNA起始部位的AUG为起始信号80遗传密码表第一碱基第二碱碱基的改变仍有可能编码原来的AA81碱基的改变仍有可能编码原来的AA17密码子与反密码子的配对I

A、C、UUA、GGC、U反密码子识别密码子第1位(摆动配对)(tRNA)(mRNA)摆动性:

反密码与密码间不严格遵守常见的碱基配对规律第3位82密码子与反密码子的配对I决定密码的特异性第1、2位摆动性第3位83决定密码的19沿5’-3’方向连续阅读插入碱基缺失碱基移码突变

连续性:无标点、不重叠每三个核苷酸只编码一个氨基酸84沿5’-3’方向连续阅读插入碱基缺失碱基移码突变连续性:无5′….UACGGACAUCUG….3′5′….UACCGGACAUCUG….3′酪甘组蛋酪精苏半胱5′….UACGACAUCUG….3′酪天异亮插入缺失855′….UACGGACAUCUG….3′5′….UACCG密码子在蛋白质中出现的频率86密码子在蛋白质中出现的频率22密码的防错系统如第二位的碱基

U

极性的氨基酸;

C

非极性或不带电荷的极性侧链氨基酸;

A或G

极性的氨基酸;密码子在密码表中的分布有一定的规则:通常情况:第二位决定氨基酸的极性,第三位决定密码子的简并性。87密码的防错系统如第二位的碱基密码子在密码表中的分使碱基的变化有时不会引起氨基酸的变化——编码相同的AA,若引起氨基酸变化也是同类型氨基酸相互取代——理化性质接近的AA,这样,合成的蛋白质功能差别不会太大。——极性并具有碱性氨基酸第一位A或C第二位A或G前两位的碱基是AG

(AGN)——极性并具有酸性氨基酸这样的分布规律?88使碱基的变化有时不会引起氨基酸的变化——极性并遗传密码表第一碱基(5’-端)第二碱基第三碱基(3’-端)终止终止**在mRNA起始部位的AUG为起始信号89遗传密码表第一碱基第二碱(二)、tRNA——搬运氨基酸1.结合氨基酸:由ATP供能,将氨基酸结合在tRNA3’-CCA位置.

一种氨基酸有几种tRNA携带;2.反密码子:

决定所带氨基酸,并准确在mRNA上对号入座.ser5’tyr5’90(二)、tRNA——搬运氨基酸1.结合氨基酸:由ATP供能,氨基酰tRNA的表示方法精氨基酰tRNA:

arg-tRNAarg甲硫氨基酰tRNA:

met-tRNAmet丙氨基酰tRNA:

ala-tRNAala91氨基酰tRNA的表示方法精氨基酰tRNA:甲硫氨基酰tRNA(三)、核糖体——蛋白质合成的场所rRNA+蛋白质大亚基小亚基原核50s+30s=70s

真核60s+40s=80s

PAP位-肽酰基tRNA结合位;

A位-氨酰tRNA结合位;不同的tRNA结合位点:92(三)、核糖体——蛋白质合成的场所rRNA核糖体分类一类附着于粗面内质网参与分泌蛋白的合成;另一类游离于胞质,参与细胞固有蛋白质的合成功能:装配机,转肽酶活性,促进氨基酸合成肽粗面内质网93核糖体分类一类附着于粗面内质网参与分泌蛋白的合成;粗二、翻译的五个阶段翻译起始肽链延长肽链终止氨基酸的活化肽链折叠和加工进位转肽脱落移位94二、翻译的五个阶段翻译起始肽链延长肽链终止与翻译五个阶段有关的物质95与翻译五个阶段有关的物质31参与翻译的蛋白质因子阶段原核真核功能

IF1

IF2

eIF2

参与起始复合物的形成

IF3

eIF3、eIF4C起始CBPI

与mRNA帽子结合

eIF4A

BF

参与寻找第一个AUG

eIF5

协助eIF2、eIF3、eIF4C的释放

eIF6

协助60S亚基从无活性的核糖体上解离

EF-Tu

eEF1

协助氨酰-tRNA进入核糖体延长EF-Ts

eEF1

帮助EF-Tu、eEF1周转

EF-G

eEF2

移位因子终止RF-1

eRF

释放完整的肽链

RF-2

RF-396参与翻译的蛋白质因子阶段原核1.氨基酸的活化——氨酰tRNA的生成氨酰-tRNA合成酶氨基酰-tRNA

+AMP+PPi氨基酸活化态氨基酸+ATP+tRNA二、翻译971.氨基酸的活化——氨酰tRNA的生成氨酰-tRNA合成酶氨基酸+ATP+tRNA氨基酰氨基酰-tRNA+AMP+ppi氨基酰tRNA合成酶ATPPPiH2N-CH-C-OHR

OH2N-CH-C~O-ACC-tRNAR

O氨基酰tRNA合成酶tRNA氨基酰tRNAGlyGlyGly

H2N-CH-C-AMP-ER

O98氨基酸+ATP+tRNA氨基酰氨基酰-tRNA+AM氨基酰tRNA的生成氨酰-tRNA合成酶99氨基酰tRNA的生成氨酰-tRNA合成酶35

特异性强,催化特定氨基酸与特异的tRNA结合,每种氨基酸有特异的合成酶催化,此种特异性保证了遗传信息翻译的准确性

氨酰-tRNA合成酶:

100

特异性强,催化特定氨基酸与特异的tRNA结合,

氨酰-t识别氨酰-RNA合成酶的位点:倒L结构中参与此作用核糖体识别位点:倒L结构中TψC环与此有关。DHU环反密码环氨基酸臂关于tRNA101识别氨酰-RNA合成酶的位点:DHU环关于tRNA37tRNA与酶结合的模型tRNA氨酰-tRNA合成酶ATP102tRNA与酶结合的模型tRNA氨酰-tRNA合成酶ATP38大肠杆菌tRNAAla氨基酸臂是酶的辨认位点

辨认位点:73位3位-70位碱基对可变环-形成空腔103大肠杆菌tRNAAla氨基酸臂是酶的辨认位点辨认位点:73

4种tRNA的辨认核苷酸1044种tRNA的辨认核苷酸402、起始阶段起始复合体大亚基mRNAMet-tRNA(fMet-tRNA)小亚基IF-1,2,3GTP1052、起始阶段起始复合体大亚基mRNAMet-tRNA小亚基I起始复合物的形成过程(原核)12小亚基大亚基106起始复合物的形成过程(原核)1反密码子密码子107反密码子密码子43肽链的延长动画108肽链的延长动画443.肽链的延长阶段1延长因子(EF)EF-TEF-GEF-TuEF-Ts2GTP条件:1093.肽链的延长阶段1延长因子(EF)EF-TEF-Tu2肽链延长过程中4个重复反应进位转肽脱落移位肽链延长过程中的耗能110肽链延长过程中4个重复反应进位转肽脱落移位肽链延长过程中的耗转肽反应:111转肽反应:474、终止阶段A位出现终止密码子释放因子

进入A位肽酰转移酶

变为水解酶作用在GTP帮助下多肽链水解大、小亚基分离。释放因子对终止密码子识别:

RF1识别UAA、UAG

RF2识别UAA、UGA,

RF3协助二者起作用。1124、终止阶段A位出现终止密码子4三、蛋白质合成后的靶向输送概念:蛋白质合成后定向到达其功能部位过程靶向输送蛋白质结构中存在分选信号信号序列(信号肽)——指N末端特异氨基酸序列,可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位的序列。信号序列(signalsequence)113三、蛋白质合成后的靶向输送概念:蛋白质合成后定向到达其功能部新生多肽链的需要加工才能转变为天然构象的功能蛋白。主要包括:

肽链折叠为天然的三维结构肽链一级结构的修饰高级结构修饰四、蛋白质翻译后修饰114新生多肽链的需要加工才能转变为天然构四、蛋白质翻译后修饰50(二)、多肽链折叠为天然构象的蛋白质分子伴侣(molecularchaperon)

分子伴侣是细胞一类保守蛋白质,可识别肽链的非天然构象,促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。

1.热休克蛋白(heatshockprotein,HSP):

HSP70、HSP40和GreE族

2.伴侣素(chaperon

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