五生化仪性能检测方法及交叉污染课件

生化分析仪维修技术培训

生化分析仪维修技术培训1生化分析仪性能检测方法

及交叉污染生化分析仪性能检测方法

及交叉污染2概述结果仪器试剂样本人员概述结果仪器试剂样本人员3检测程序介绍加注机构（样本、试剂）比色系统（光度计）反应系统（比色杯、搅拌、温控）检测程序介绍加注机构（样本、试剂）4检测程序介绍（加注系统）样本加注机构准确性：

体积、样品、不同条件（体积、前稀释）重复性：连续加样、清洗前后携带污染：

针内壁、针外壁、飞溅检测程序介绍（加注系统）样本加注机构准确性：5加注系统

（样本针）样本针加注准确性样本针加注精度样本针携带污染稀释样本加样准确度及精度加注系统（样本针）样本针加注准确性6样本针加注准确性样本量准确度2,3,5,10,15,30l≤

±

5.0%1.将吸光度约为20的氨基黑10B色素溶液当作样本放入样本盘。2.执行自动加样，将色素溶液加注到比色杯中。3.手工将比色杯内的色素溶液用水冲洗并加注到容量瓶中。4.准确用水将移入容量瓶的色素溶液定容，并测定吸光度。5.使用手工加入色素溶液到容量瓶并用水稀释成相应比例，再测定相应吸光度的方法做参考对照。6.每个样本量（2,3,5,10,15,30l）各重复5次，并测定吸光度值。7.比较自动加样和手工方法，然后检查加样的准确度。样本针加注准确性样本量准确度2,3,5,10,15,7样本针加注精度样本量精密度2,3,5,10,15,30lCV≤

1.5%1.将吸光度约为20的氨基黑10B色素溶液当作样本放入样本盘。2.执行自动加样，将色素溶液加注到比色杯中。3.手工将比色杯内的色素溶液用水冲洗并加注到容量瓶中。4.准确用水将移入容量瓶的色素溶液定容，并测定吸光度。5.使用手工加入色素溶液到容量瓶并用水稀释成相应比例，再测定相应吸光度的方法做参考对照。6.每个样本量（2,3,5,10,15,30l）各重复30次，并测定吸光度值。7.比较自动加样和手工方法，然后检查加样的精度度。样本针加注精度样本量精密度2,3,5,10,15,8样本针携带污染样本携带污染率高活性LDH对盐水LDH≤0.5%1.将LDH加入到质控样本中，使最终浓度达到10000IU/L左右。2.将高活性LDH样本及其后的生理盐水样本加入样本杯内，放置到样本盘上，然后开始LDH测定。3.比较高活性LDH值和第一杯生理盐水的LDH值，并按以下公式计算携带污染率：。携带污染率=[高活性LDH样本值][第一杯盐水LDH值]样本针携带污染样本携带污染率高活性LDH对盐水LDH9稀释样本加样准确度及精度样本量准确度精密度2,3,5,10,15,30l≤±

6.0%CV≤

1.0%1.将吸光度约为20的氨基黑10B色素溶液当作样本放入样本盘。2.按以下比例做样本前稀释，并指令仪器加注前稀释后的样本于比色杯内。

条件1：10倍稀释样本量：20l、稀释液量：180l

条件2：20倍稀释样本量：10l、稀释液量：190l

3.手工将比色杯内的色素溶液用水冲洗并加注到容量瓶中。4.准确用水将移入容量瓶的色素溶液定容，并测定吸光度。5.使用手工加入色素溶液（未经前稀释）到容量瓶,

并用水稀释成相应比例，再测定相应吸光度的方法做参考对照。6.每个样本量（2,3,5,10,15,30l）各重复30次，并测定吸光度值。7.比较自动和手工方法，检查前稀释后的加样准确性和精密度

。稀释样本加样准确度及精度样本量准确度精密度2,3,5,10检测程序介绍（加注系统）试剂加注机构准确性：

体积、试剂、不同条件（体积、试剂稀释）重复性：连续加样携带污染：

针内壁、针外壁、飞溅检测程序介绍（加注系统）试剂加注机构准确性：11加注系统

（试剂针）试剂针加注准确性试剂针加注精度试剂针携带污染试剂针水稀释加注系统（试剂针）试剂针加注准确性12试剂针加注准确性试剂量准确度

50l≤

±5%（50±2.5l）

270l≤

±3%（270±8.1l）

1.准备1%Hitergent溶液，将其当作试剂放置在仪器上

。2.指令仪器将其加注到杯子内（超过10个）

。3.用天平测定这些杯子的重量

。4.检查最小（50l）到最大（270l）试剂加注体积时的加注准确性

。试剂针加注准确性试剂量准确度50l≤±5%13试剂针加注精度试剂量精密度

50lCV≤1.0%270lCV≤0.5%1.准备1%Hitergent溶液，将其当作试剂放置在仪器上

。2.指令仪器将其加注到杯子内（超过30个）

。3.用天平测定这些杯子的重量

。4.检查最小（50l）到最大（270l）试剂加注体积时的加注精度

。试剂针加注精度试剂量精密度50lCV≤1.0%2714试剂针携带污染1.分别对可能受污染的项目（A）和可能引起污染的项目（B）进行校准。2.按以下方法测定质控样本中的B和A项目：

测定5个B项目测定5个A项目测定5个B项目测定5个A项目…。3.按以下公式计算携带污染量：试剂针携带污染=

（项目A的第一个数据）－（项目A第二至五个数据的均值）项目携带污染量磷酸盐缓冲液→IP≤

0.1mg/dL

ALT、AST→LDH≤

20IU/L试剂针携带污染1.分别对可能受污染的项目（A）和可能引起污染15试剂针水稀释1.将吸光度约为20的氨基黑10B色素溶液当作试剂放入试剂盘。2.指令仪器将色素溶液加注到比色杯中。3.手工将比色杯内的色素溶液用水冲洗并加注到容量瓶中。4.准确用水将移入容量瓶的色素溶液定容，并测定吸光度。5.使用手工加入色素溶液到容量瓶并用水稀释成相应比例，再测定相应吸光度的方法做参考对照。6.在50～270l的各体积均测定5次

，并测定吸光度值。7.比较自动加注和手工方法，然后计算稀释率

。试剂量准确度

50l≤

7.0%270l≤

7.0%试剂针水稀释1.将吸光度约为20的氨基黑10B色素溶液当作试16检测程序介绍（比色系统）光度计准确性

重复性

线性杂散光

检测程序介绍（比色系统）光度计准确性17比色系统

（光度计）光度计噪音光度计漂移光度计波动光度计线性吸光度准确性比色系统（光度计）光度计噪音18光度计噪音终点法速率法340/405nmAbs0.05×10-4340/405nmAbs0.05×10-4Abs2.050×10-4Abs2.020×10-4600/700nmAbs0.05×10-4600/700nmAbs0.05×10-4Abs2.030×10-4Abs2.020×10-41.将1%Hitergent作为样本和试剂准备于仪器中。2.设定分析参数。

样本量：10l

。试剂量：250l

。

K因数：10000

测定波长：340/405nm和600/700nm3.分析方法：终点法和速率法（大于10个测光点）4.测定30个样本，计算吸光度的标准差（SD）光度计噪音终点法速率法340/405Abs0.05×19光度计漂移1.将1%Hitergent作为样本和试剂准备于仪器中。2.设定分析参数。

样本量：10l

。试剂量：250l

。

K因数：10000

测定波长：340/405nm和600/700nm3.分析方法：速率法4.（比色杯内漂移）10分钟内重复测定同一比色杯内样本的吸光度20次，计算吸光度变化速度。5.（光度计漂移）连续测定150个样本的吸光度变化值，计算每10分钟吸光度变化值。波长（nm）漂移

340/405≤

5×10-4/10min600/700≤

5×10-4/10min光度计漂移1.将1%Hitergent作为样本和试剂准20光度计波动1.将1%Hitergent作为样本和试剂准备于仪器中。2.设定分析参数。

样本量：10l

。试剂量：250l

。

K因数：10000

测定波长：340/405nm和600/700nm3.分析方法：速率法4.（比色杯内波动）10分钟内重复测定同一比色杯内样本的吸光度20次，计算10分钟内最大和最小的吸光度差值。

5.（光度计波动）连续测定150个样本的吸光度变化值，计算10分钟内最大和最小的吸光度差值

。波长（nm）波动

340/405≤

3×10-3/10min600/700≤

3×10-3/10min光度计波动1.将1%Hitergent作为样本和试剂准21光度计线性1.用以下物质制作1/10到10/10的不同稀释比的色素溶液，最大吸光度在3.0左右

。2.色素：

还原型辅酶ⅠNADH(340nm)

P-NA/P-NP(405nm)

氨基黑10BAmidBlack10B(600nm)

硫酸铜CuSO4(800nm)3.将不同稀释比的色素溶液手工加入比色杯中，用“杯空白法”测定吸光度

4.按最小二乘法用1/10到3/10计算斜率。然后检查10/10的吸光度与拟合预期值的偏差

。

项目要求

340~800nm10/10比例吸光度与拟合预期值的偏差

≤

5.0%吸光度线性

≥

2.5光度计线性1.用以下物质制作1/10到10/10的不同稀释比22光度计线性偏差根据计算直线得到的值按最小二乘法用1/10到3/10计算斜率Abs.稀释比1/103/1010/10光度计线性偏差根据计算直线得到的值按最小二乘法用1/10到323吸光度准确性影响吸光度准确性的因素：

①标准物质

②光径

③分光机构

④杂散光方法：1.手工加入标准物质，测量吸光度值。2.测定水的吸光度值。3.计算标准物质吸光度值，求出与标准值的偏差。340nm标准物质合格不合格A级B级C级Abs.0.5≤

0.01≤

0.02≤

0.03＞

0.03Abs.1.0

≤

0.02≤

0.04≤

0.07＞

0.07吸光度准确性影响吸光度准确性的因素：340nm标准物质合格24检测程序介绍（反应系统）比色杯形状：

光径、变形（清洗液影响）表面：一致性（清洗影响）、突变（试剂影响）携带污染

检测程序介绍（反应系统）比色杯形状：25反应系统

（比色杯）比色杯脏污比色杯携带污染反应系统（比色杯）比色杯脏污26比色杯脏污1.在同一比色杯内反复测定某一项目40次，检查杯空白的改变

。容易引起比色杯污染的项目主要有：

（例如）

TTT、CRP、IgG、

IgA、IgM、B-LP、RF、ASO,

…2.

测量杯空白。检查项目指标杯空白值≤

±800×10-4杯表面无明显划痕及吸附物比色杯脏污1.在同一比色杯内反复测定某一项目40次，检查杯空27比色杯携带污染1.分别对可能受污染的项目（A）和可能引起污染的项目（B）进行校准。2.按以下顺序测定质控血清

：

第一周期：前半部分测定A项目，后半部分测定B项目（引起污染的项目）。第二周期：全部测定A项目。（注）：每个项目至少测定20次。3.按以下公式计算携带污染量：比色杯携带污染=（第二周期的最大值）-（第一周期的平均值）

项目携带污染量磷酸盐缓冲液→IP≤

0.1mg/dL

ALT、AST→LDH≤

20IU/L比色杯携带污染1.分别对可能受污染的项目（A）和可能引起污染28检测程序介绍（反应系统）搅拌机构效果

充分性（直线性）均一不同黏度反应体系影响携带污染

检测程序介绍（反应系统）搅拌机构效果29反应系统

（搅拌机构）直线性较高黏度试剂对搅拌效果的影响搅拌机构携带污染反应系统（搅拌机构）直线性30搅拌机构直线性1.将值为1000mg/dl的GLU样本按1/10到10/10稀释，其中1/10到3/10为空白。然后测定吸光度

。2.将1/10到3/10的吸光度用最小二乘法算出斜率，计算10/10浓度的吸光度值与计算出的吸光度值之间的差别

。

项目要求

1000mg/dLGLU的偏差

＜

2.0%±（20mg/dL）搅拌机构直线性1.将值为1000mg/dl的GLU样本按31搅拌机构直线性偏差根据计算直线得到的值按最小二乘法用1/10到3/10计算斜率Abs.稀释比1/103/1010/10搅拌机构直线性偏差根据计算直线得到的值按最小二乘法用1/1032较高黏度试剂对搅拌效果的影响1.连续测定大于20个免疫比浊项目，并计算精密度

（例如）CRP项目携带污染量5.0mg/dLCV≤1.0%较高黏度试剂对搅拌效果的影响1.连续测定大于20个免疫比浊项33搅拌机构携带污染1.手工将380l100mmol/l的磷酸盐缓冲液加入到比色杯中。2.准备大于5个的生理盐水作为样本放于样本盘上，并做IP测定。3.按以下公式计算携带污染量：搅拌机构携带污染=（第一个IP结果）-（第2～5个IP结果的平均值）项目携带污染量磷酸盐缓冲液→IP≤

0.1mg/dL搅拌机构携带污染1.手工将380l100mmol/l34检测程序介绍（反应系统）温控机构反应槽温度

准确性、波动比色杯温度准确性、波动、传导速度冷藏室温度准确性、波动检测程序介绍（反应系统）温控机构反应槽温度35反应系统

（温控机构）反应槽温度准确性反应槽温度波动反应系统（温控机构）反应槽温度准确性36反应槽温度准确性1.开机30分钟后，用精度为0.01℃的温度计，测定反应槽温度；每2分钟一次，连续5次。2.计算5次的平均值。反应槽温度37±0.1℃反应槽温度准确性1.开机30分钟后，用精度为0.0137反应槽温度波动1.开机30分钟后，用精度为0.01℃的温度计，测定反应槽温度；每2分钟一次，连续10

次。2.计算10次的值距。反应槽温度值距≤

0.2℃反应槽温度波动1.开机30分钟后，用精度为0.01℃38生化分析仪的交叉污染生化分析仪的交叉污染39一，交叉污染的概念二，交叉污染的分类三，日立生化分析仪的防交叉污染程序四，交叉污染实验例证五，查明项目间交叉污染的实验步骤六，日立生化分析仪各机型交叉污染率列表生化分析仪的交叉污染一，交叉污染的概念生化分析仪的交叉污染40一，交叉污染的概念

随着自动生化分析仪的普及，越来越多的使用者将注意力集中到仪器的防交叉污染功能上。交叉污染也称携带污染。交叉污染是指在生化分析仪上测试的项目之间，共用了分析仪的硬件设备，硬件设备携带了前一测试项目的样品或试剂成分，这些成分未能被彻底清洗干净，接下来的实验项目测试时，其测量准确度受到不同程度的影响，而当共用的硬件设备通过某些方式，能够被彻底清洗干净时，测量准确度不再受到影响。

一，交叉污染的概念随着自动生化分析仪的普41一，交叉污染的概念交叉污染影响数据测定有一些特点：1，受影响项目相对固定（但近两年来，随着上机生化学项目种类的增多和试剂制造采用生化学基本原理的翻新，交叉污染项目的配对也在变化）；2，标本不固定（因标本的实验选项不同而不同）；3，污染现象常规复检不易再现（引发污染的项目未测定）；4，与仪器参数设置及维护保养相关（加样顺序、清洗机构、清洗液等）。一，交叉污染的概念交叉污染影响数据测定有一些特点：42二，交叉污染的分类（一），按照造成交叉污染的携带硬件，将其分为如下五大类：1，样品针的携带污染：见于不同类型的样品间，例如血清或血浆与尿液标本间；血清或血浆与穿刺液之间等。2，试剂针的携带污染：这种情况很常见，存在携带污染的项目很多，不在此一一列举。3，搅拌棒的携带污染：例如通常见到的速率法实验反应曲线跳点等。

二，交叉污染的分类（一），按照造成交叉污染的携带硬件，43二，交叉污染的分类4，反应杯的携带污染：见于试剂黏附力较强，不宜被洗脱的项目，常常引起杯空白升高，杯间差变大。含有很高量碱性清洗剂清洗不良的无机成分的试剂，残留成分影响下一分析。5，清洗装置的携带污染：清洗针吐水量不足，清洗白块不洁，底部沾有凝块等，均会造成此现象。

二，交叉污染的分类4，反应杯的携带污染：44二，交叉污染的分类（二），按照试剂的生化学反应原理，分为如下六大类。对于不同成因的交叉污染，其测试不良表现形式也不同。1，A试剂中含有极高浓度的待测物B（AB）：

例如，AMY试剂中含有8mmol/L的酶激活剂Mg，可能对Mg的测试有影响；另外，最常见的ALT试剂中含有超过1000U/L的LDH做为工具酶，可能对

LDH测试产生影响；等等。二，交叉污染的分类（二），按照试剂的生化学反应原理，分为如下45二，交叉污染的分类2，A试剂中含有与待测物B具有相同吸收峰的C物质（AB）：例如，3，A试剂与B试剂具有不同的氧化还原特性（AB）：例如，CRE试剂中含有高浓度的氧化剂，P法LDH试剂中含有高浓度的NADH+H+，则LDH测试受影响。二，交叉污染的分类2，A试剂中含有与待测物B具有相46二，交叉污染的分类4，A试剂与B试剂发生非氧化还原型反应，消耗B试剂。5，A试剂与B试剂竞争待测物B，形成具有不同吸收峰的物质，从而影响测试。6，A试剂与B试剂反应，形成在B项目副波长处有强吸收峰的物质。二，交叉污染的分类4，A试剂与B试剂发生非氧化还原47三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

1，样品针的防交叉污染程序

2，试剂针的防交叉污染程序

3，反应杯的防交叉污染程序三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

1，样品针的防交48三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

日立机型防交叉污染程序样品针试剂针反应杯其他7600D无无无无7600P无有有无7180有有有无7170有有有无7080有有有无7060有有有无7020有有有无三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

日立机型防交叉污染程49三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

日立纯正清洗剂1，水2，Hitergent3，Hakali4，Hakali-D5，Hicarrynon6，Hichlogent三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

日立纯正清洗剂50四，交叉污染实验例证

1，样品针携带污染步骤一：为使实验现象明显，可安装一根旧的样品针。

步骤二：1、5、9号样品为同一份尿液，测试项目为微球蛋白，2、3、4、6、7、8、10、11、12号样品为同一份血清，测试项目为UREA。四，交叉污染实验例证

1，样品针携带污染51

结果：测试不良，2、6、10号样品测试结果偏高。步骤三：设置样品针防交叉污染程序：样品针吸取微球蛋白后，使用W1的清洗剂洗针，然后吸取样品做其他测试。

步骤四：同步骤二做测试。

结果：测试重复性良好。结论：交叉污染程序设置有效。四，交叉污染实验例证结果：测试不良，2、6、10号样品四，522，试剂针携带污染步骤一：为使实验现象明显，可安装一根旧的试剂针。

步骤二：1、5、9号样品为同一份样品，测试项目为Crea，2、3、4、6、7、8、10、11、12号样品为同一份血清，测试项目为HBDH。四，交叉污染实验例证2，试剂针携带污染四，交叉污染实验例证53步骤三：设置试剂针防交叉污染程序：试剂针吸取Crea后，使用特别的清洗剂洗针，然后吸取LDH试剂测试。步骤四：同步骤二做测试。结果：测试重复性良好。结论：交叉污染程序设置有效。四，交叉污染实验例证步骤三：设置试剂针防交叉污染程序：试四，交叉污染实验例证543，清洗装置和反应杯的携带污染步骤一：为使实验现象明显，可在清洗白块下粘贴一小块纱布。步骤二：1、2、3、4、5号为同一份样品，测试项目为Crea，测试完成后，停机。然后，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10号为同一份样品，重新开始测试，测试项目为LDH。

结果：测值均偏低，可能存在清洗装置携带污染。四，交叉污染实验例证3，清洗装置和反应杯的携带污染四，交叉污染实验例证55步骤三：做清洗装置的清扫。步骤四：同步骤二做测试。结果：1、2、3、4、5测试数据有改善，但仍偏低，6、7、8、9、10测试数据正常，可能存在反应杯携带污染，清洗装置携带污染消除。步骤五：设置反应杯防交叉污染程序：反应杯完成Crea测试后，使用特别的清洗剂洗杯，然后做其他测试。四，交叉污染实验例证步骤三：做清洗装置的清扫。四，交叉污染实验例证56步骤六：以7180为例，设置4个序号的同样Crea项目，4个序号的同样LDH项目，1—40号样品为同一样品，测试项目为4个Crea测试，41—80号样品为同一样品，测试项目为4个LDH，开始测试。结果：测试数据正常。结论：存在反应杯防交叉污染。四，交叉污染实验例证步骤六：以7180为例，设置4个序号的同四，交叉污染实验例证57五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

（一），样品针交叉污染的查明和避免样品：高值血清∆；1000倍稀释血清∇；纯净水⊙。方法：按顺序（1—29号）分析某项目，如AST，排序如下：∆∆∆⊙⊙⊙∆∆∆⊙⊙⊙∆∆∆⊙⊙⊙∆∆∆⊙⊙⊙∇∇∇∇∇

A交叉污染率(%):=---------------x100<0.3%为正常

Bx1000<2%为正常平均值A平均值B五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

（一），样品针交叉污58五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

（一），样品针交叉污染的查明和避免避免方法:给出分析项目名称指定特殊清洗液(Water、W1、W2、W3）

一般地，W1采用日立碱性清洗剂；W2采用日立酸性清洗剂；

W3可以采用试剂厂商提供的特殊清洗剂，此种清洗剂对日立分析仪无损害。五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

（一），样品针交叉污59五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

（二），试剂针和搅拌棒交叉污染的查明和避免*试剂针和搅拌棒交叉污染的查明：样品：病人新鲜血清方法：先做重复性检查，每个项目测试30次，按顺序（1—30号）分析特定项目A、B、C、D。将重复性数据填入下表：

ABCD均值SD-2SD+2SDA116.1515.8915.31316.316.00.415.216.8B22.3362.31102.61142.292.320.052.322.42C3216722511219152212203214226D439831123716353823442五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

（二），试剂针和搅拌60样品号测试项目采集数据样品号测试项目采集数据1A117C2A18A93A19C4B220B105A21C6C322C117A23C8D424D129B25D10A526A1311B27D12B628B1413B29D14C730C1515B31D16D832D16样品号测试项目采集数据样品号测试项目采集数据1A117C2A61五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

*试剂针及搅拌棒交叉污染的避免方法1，调整加样顺序(AB)项目序号Ch.No.2424

加样顺序（希望）:A10分

B5分

B5A10加样顺序（实际）:A10B5A10B5反应时间长的项目先加样，建议反应时间均设置

为10分钟。2，设置避免交叉污染程序选择相关项目指定清洗液清洗液用量注意：清洗液用量应大于引发污染的试剂用量。五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

*试剂针及搅拌棒交叉62五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

（三），反应杯交叉污染的查明和避免

*反应杯交叉污染的查明：

1，造成杯空白升高，杯间差变大。杯号2345678空白1123341-25-266738项目ABCDEFG空白22653529-325622366清洗空白33921220653331-3五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

（三），反应杯交叉污63五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

2，残留成分对下一分析的影响

第1循环测定全部项目，第2、3、4、5循环测定受干扰项目。杯号全部项目受干扰项目X测定4次第1循环第2循环第3循环第4循环第5循环1A100101991012B101991011003C991001011004D99100981025E1121081051026F100100102997G9710110299五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤

2，残留成分对下一分64五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤*反应杯交叉污染的避免方法：1，确定常规操作中的清洗不存在问题

2，特殊清洗程序的设置指定引发污染的项目

指定清洗液种类和用量

五，查明及避免项目间交叉污染的实验步骤*反应杯交叉污染的避免65六，日立生化分析仪各机型交叉污染率列表比较机型比较项目样品针试剂针反应杯搅拌棒70200.07%0.2ppm0.14ppm0.1ppm706070800.003%0.5ppm0.1ppm71700.02%0.4ppm0.15ppm0.3ppm71800.0003%0.2ppm0.18ppm7600P0.01%3.0ppm0.09ppm7600D0.04%No0.11ppmISENa0.9mmol/LK0.038mmol/LCl1.12mmol/L六，日立生化分析仪各机型交叉污染率列表比较机型比较项66生化分析仪维修技术培训

生化分析仪维修技术培训67生化分析仪性能检测方法

及交叉污染生化分析仪性能检测方法

及交叉污染68概述结果仪器试剂样本人员概述结果仪器试剂样本人员69检测程序介绍加注机构（样本、试剂）比色系统（光度计）反应系统（比色杯、搅拌、温控）检测程序介绍加注机构（样本、试剂）70检测程序介绍（加注系统）样本加注机构准确性：

体积、样品、不同条件（体积、前稀释）重复性：连续加样、清洗前后携带污染：

针内壁、针外壁、飞溅检测程序介绍（加注系统）样本加注机构准确性：71加注系统

（样本针）样本针加注准确性样本针加注精度样本针携带污染稀释样本加样准确度及精度加注系统（样本针）样本针加注准确性72样本针加注准确性样本量准确度2,3,5,10,15,30l≤

±

5.0%1.将吸光度约为20的氨基黑10B色素溶液当作样本放入样本盘。2.执行自动加样，将色素溶液加注到比色杯中。3.手工将比色杯内的色素溶液用水冲洗并加注到容量瓶中。4.准确用水将移入容量瓶的色素溶液定容，并测定吸光度。5.使用手工加入色素溶液到容量瓶并用水稀释成相应比例，再测定相应吸光度的方法做参考对照。6.每个样本量（2,3,5,10,15,30l）各重复5次，并测定吸光度值。7.比较自动加样和手工方法，然后检查加样的准确度。样本针加注准确性样本量准确度2,3,5,10,15,73样本针加注精度样本量精密度2,3,5,10,15,30lCV≤

1.5%1.将吸光度约为20的氨基黑10B色素溶液当作样本放入样本盘。2.执行自动加样，将色素溶液加注到比色杯中。3.手工将比色杯内的色素溶液用水冲洗并加注到容量瓶中。4.准确用水将移入容量瓶的色素溶液定容，并测定吸光度。5.使用手工加入色素溶液到容量瓶并用水稀释成相应比例，再测定相应吸光度的方法做参考对照。6.每个样本量（2,3,5,10,15,30l）各重复30次，并测定吸光度值。7.比较自动加样和手工方法，然后检查加样的精度度。样本针加注精度样本量精密度2,3,5,10,15,74样本针携带污染样本携带污染率高活性LDH对盐水LDH≤0.5%1.将LDH加入到质控样本中，使最终浓度达到10000IU/L左右。2.将高活性LDH样本及其后的生理盐水样本加入样本杯内，放置到样本盘上，然后开始LDH测定。3.比较高活性LDH值和第一杯生理盐水的LDH值，并按以下公式计算携带污染率：。携带污染率=[高活性LDH样本值][第一杯盐水LDH值]样本针携带污染样本携带污染率高活性LDH对盐水LDH75稀释样本加样准确度及精度样本量准确度精密度2,3,5,10,15,30l≤±

6.0%CV≤

1.0%1.将吸光度约为20的氨基黑10B色素溶液当作样本放入样本盘。2.按以下比例做样本前稀释，并指令仪器加注前稀释后的样本于比色杯内。

条件1：10倍稀释样本量：20l、稀释液量：180l

条件2：20倍稀释样本量：10l、稀释液量：190l

3.手工将比色杯内的色素溶液用水冲洗并加注到容量瓶中。4.准确用水将移入容量瓶的色素溶液定容，并测定吸光度。5.使用手工加入色素溶液（未经前稀释）到容量瓶,

并用水稀释成相应比例，再测定相应吸光度的方法做参考对照。6.每个样本量（2,3,5,10,15,30l）各重复30次，并测定吸光度值。7.比较自动和手工方法，检查前稀释后的加样准确性和精密度

。稀释样本加样准确度及精度样本量准确度精密度2,3,5,76检测程序介绍（加注系统）试剂加注机构准确性：

体积、试剂、不同条件（体积、试剂稀释）重复性：连续加样携带污染：

针内壁、针外壁、飞溅检测程序介绍（加注系统）试剂加注机构准确性：77加注系统

（试剂针）试剂针加注准确性试剂针加注精度试剂针携带污染试剂针水稀释加注系统（试剂针）试剂针加注准确性78试剂针加注准确性试剂量准确度

50l≤

±5%（50±2.5l）

270l≤

±3%（270±8.1l）

1.准备1%Hitergent溶液，将其当作试剂放置在仪器上

。2.指令仪器将其加注到杯子内（超过10个）

。3.用天平测定这些杯子的重量

。4.检查最小（50l）到最大（270l）试剂加注体积时的加注准确性

。试剂针加注准确性试剂量准确度50l≤±5%79试剂针加注精度试剂量精密度

50lCV≤1.0%270lCV≤0.5%1.准备1%Hitergent溶液，将其当作试剂放置在仪器上

。2.指令仪器将其加注到杯子内（超过30个）

。3.用天平测定这些杯子的重量

。4.检查最小（50l）到最大（270l）试剂加注体积时的加注精度

。试剂针加注精度试剂量精密度50lCV≤1.0%2780试剂针携带污染1.分别对可能受污染的项目（A）和可能引起污染的项目（B）进行校准。2.按以下方法测定质控样本中的B和A项目：

测定5个B项目测定5个A项目测定5个B项目测定5个A项目…。3.按以下公式计算携带污染量：试剂针携带污染=

（项目A的第一个数据）－（项目A第二至五个数据的均值）项目携带污染量磷酸盐缓冲液→IP≤

0.1mg/dL

ALT、AST→LDH≤

20IU/L试剂针携带污染1.分别对可能受污染的项目（A）和可能引起污染81试剂针水稀释1.将吸光度约为20的氨基黑10B色素溶液当作试剂放入试剂盘。2.指令仪器将色素溶液加注到比色杯中。3.手工将比色杯内的色素溶液用水冲洗并加注到容量瓶中。4.准确用水将移入容量瓶的色素溶液定容，并测定吸光度。5.使用手工加入色素溶液到容量瓶并用水稀释成相应比例，再测定相应吸光度的方法做参考对照。6.在50～270l的各体积均测定5次

，并测定吸光度值。7.比较自动加注和手工方法，然后计算稀释率

。试剂量准确度

50l≤

7.0%270l≤

7.0%试剂针水稀释1.将吸光度约为20的氨基黑10B色素溶液当作试82检测程序介绍（比色系统）光度计准确性

重复性

线性杂散光

检测程序介绍（比色系统）光度计准确性83比色系统

（光度计）光度计噪音光度计漂移光度计波动光度计线性吸光度准确性比色系统（光度计）光度计噪音84光度计噪音终点法速率法340/405nmAbs0.05×10-4340/405nmAbs0.05×10-4Abs2.050×10-4Abs2.020×10-4600/700nmAbs0.05×10-4600/700nmAbs0.05×10-4Abs2.030×10-4Abs2.020×10-41.将1%Hitergent作为样本和试剂准备于仪器中。2.设定分析参数。

样本量：10l

。试剂量：250l

。

K因数：10000

测定波长：340/405nm和600/700nm3.分析方法：终点法和速率法（大于10个测光点）4.测定30个样本，计算吸光度的标准差（SD）光度计噪音终点法速率法340/405Abs0.05×85光度计漂移1.将1%Hitergent作为样本和试剂准备于仪器中。2.设定分析参数。

样本量：10l

。试剂量：250l

。

K因数：10000

测定波长：340/405nm和600/700nm3.分析方法：速率法4.（比色杯内漂移）10分钟内重复测定同一比色杯内样本的吸光度20次，计算吸光度变化速度。5.（光度计漂移）连续测定150个样本的吸光度变化值，计算每10分钟吸光度变化值。波长（nm）漂移

340/405≤

5×10-4/10min600/700≤

5×10-4/10min光度计漂移1.将1%Hitergent作为样本和试剂准86光度计波动1.将1%Hitergent作为样本和试剂准备于仪器中。2.设定分析参数。

样本量：10l

。试剂量：250l

。

K因数：10000

测定波长：340/405nm和600/700nm3.分析方法：速率法4.（比色杯内波动）10分钟内重复测定同一比色杯内样本的吸光度20次，计算10分钟内最大和最小的吸光度差值。

5.（光度计波动）连续测定150个样本的吸光度变化值，计算10分钟内最大和最小的吸光度差值

。波长（nm）波动

340/405≤

3×10-3/10min600/700≤

3×10-3/10min光度计波动1.将1%Hitergent作为样本和试剂准87光度计线性1.用以下物质制作1/10到10/10的不同稀释比的色素溶液，最大吸光度在3.0左右

。2.色素：

还原型辅酶ⅠNADH(340nm)

P-NA/P-NP(405nm)

氨基黑10BAmidBlack10B(600nm)

硫酸铜CuSO4(800nm)3.将不同稀释比的色素溶液手工加入比色杯中，用“杯空白法”测定吸光度

4.按最小二乘法用1/10到3/10计算斜率。然后检查10/10的吸光度与拟合预期值的偏差

。

项目要求

340~800nm10/10比例吸光度与拟合预期值的偏差

≤

5.0%吸光度线性

≥

2.5光度计线性1.用以下物质制作1/10到10/10的不同稀释比88光度计线性偏差根据计算直线得到的值按最小二乘法用1/10到3/10计算斜率Abs.稀释比1/103/1010/10光度计线性偏差根据计算直线得到的值按最小二乘法用1/10到389吸光度准确性影响吸光度准确性的因素：

①标准物质

②光径

③分光机构

④杂散光方法：1.手工加入标准物质，测量吸光度值。2.测定水的吸光度值。3.计算标准物质吸光度值，求出与标准值的偏差。340nm标准物质合格不合格A级B级C级Abs.0.5≤

0.01≤

0.02≤

0.03＞

0.03Abs.1.0

≤

0.02≤

0.04≤

0.07＞

0.07吸光度准确性影响吸光度准确性的因素：340nm标准物质合格90检测程序介绍（反应系统）比色杯形状：

光径、变形（清洗液影响）表面：一致性（清洗影响）、突变（试剂影响）携带污染

检测程序介绍（反应系统）比色杯形状：91反应系统

（比色杯）比色杯脏污比色杯携带污染反应系统（比色杯）比色杯脏污92比色杯脏污1.在同一比色杯内反复测定某一项目40次，检查杯空白的改变

。容易引起比色杯污染的项目主要有：

（例如）

TTT、CRP、IgG、

IgA、IgM、B-LP、RF、ASO,

…2.

测量杯空白。检查项目指标杯空白值≤

±800×10-4杯表面无明显划痕及吸附物比色杯脏污1.在同一比色杯内反复测定某一项目40次，检查杯空93比色杯携带污染1.分别对可能受污染的项目（A）和可能引起污染的项目（B）进行校准。2.按以下顺序测定质控血清

：

第一周期：前半部分测定A项目，后半部分测定B项目（引起污染的项目）。第二周期：全部测定A项目。（注）：每个项目至少测定20次。3.按以下公式计算携带污染量：比色杯携带污染=（第二周期的最大值）-（第一周期的平均值）

项目携带污染量磷酸盐缓冲液→IP≤

0.1mg/dL

ALT、AST→LDH≤

20IU/L比色杯携带污染1.分别对可能受污染的项目（A）和可能引起污染94检测程序介绍（反应系统）搅拌机构效果

充分性（直线性）均一不同黏度反应体系影响携带污染

检测程序介绍（反应系统）搅拌机构效果95反应系统

（搅拌机构）直线性较高黏度试剂对搅拌效果的影响搅拌机构携带污染反应系统（搅拌机构）直线性96搅拌机构直线性1.将值为1000mg/dl的GLU样本按1/10到10/10稀释，其中1/10到3/10为空白。然后测定吸光度

。2.将1/10到3/10的吸光度用最小二乘法算出斜率，计算10/10浓度的吸光度值与计算出的吸光度值之间的差别

。

项目要求

1000mg/dLGLU的偏差

＜

2.0%±（20mg/dL）搅拌机构直线性1.将值为1000mg/dl的GLU样本按97搅拌机构直线性偏差根据计算直线得到的值按最小二乘法用1/10到3/10计算斜率Abs.稀释比1/103/1010/10搅拌机构直线性偏差根据计算直线得到的值按最小二乘法用1/1098较高黏度试剂对搅拌效果的影响1.连续测定大于20个免疫比浊项目，并计算精密度

（例如）CRP项目携带污染量5.0mg/dLCV≤1.0%较高黏度试剂对搅拌效果的影响1.连续测定大于20个免疫比浊项99搅拌机构携带污染1.手工将380l100mmol/l的磷酸盐缓冲液加入到比色杯中。2.准备大于5个的生理盐水作为样本放于样本盘上，并做IP测定。3.按以下公式计算携带污染量：搅拌机构携带污染=（第一个IP结果）-（第2～5个IP结果的平均值）项目携带污染量磷酸盐缓冲液→IP≤

0.1mg/dL搅拌机构携带污染1.手工将380l100mmol/l100检测程序介绍（反应系统）温控机构反应槽温度

准确性、波动比色杯温度准确性、波动、传导速度冷藏室温度准确性、波动检测程序介绍（反应系统）温控机构反应槽温度101反应系统

（温控机构）反应槽温度准确性反应槽温度波动反应系统（温控机构）反应槽温度准确性102反应槽温度准确性1.开机30分钟后，用精度为0.01℃的温度计，测定反应槽温度；每2分钟一次，连续5次。2.计算5次的平均值。反应槽温度37±0.1℃反应槽温度准确性1.开机30分钟后，用精度为0.01103反应槽温度波动1.开机30分钟后，用精度为0.01℃的温度计，测定反应槽温度；每2分钟一次，连续10

次。2.计算10次的值距。反应槽温度值距≤

0.2℃反应槽温度波动1.开机30分钟后，用精度为0.01℃104生化分析仪的交叉污染生化分析仪的交叉污染105一，交叉污染的概念二，交叉污染的分类三，日立生化分析仪的防交叉污染程序四，交叉污染实验例证五，查明项目间交叉污染的实验步骤六，日立生化分析仪各机型交叉污染率列表生化分析仪的交叉污染一，交叉污染的概念生化分析仪的交叉污染106一，交叉污染的概念

随着自动生化分析仪的普及，越来越多的使用者将注意力集中到仪器的防交叉污染功能上。交叉污染也称携带污染。交叉污染是指在生化分析仪上测试的项目之间，共用了分析仪的硬件设备，硬件设备携带了前一测试项目的样品或试剂成分，这些成分未能被彻底清洗干净，接下来的实验项目测试时，其测量准确度受到不同程度的影响，而当共用的硬件设备通过某些方式，能够被彻底清洗干净时，测量准确度不再受到影响。

一，交叉污染的概念随着自动生化分析仪的普107一，交叉污染的概念交叉污染影响数据测定有一些特点：1，受影响项目相对固定（但近两年来，随着上机生化学项目种类的增多和试剂制造采用生化学基本原理的翻新，交叉污染项目的配对也在变化）；2，标本不固定（因标本的实验选项不同而不同）；3，污染现象常规复检不易再现（引发污染的项目未测定）；4，与仪器参数设置及维护保养相关（加样顺序、清洗机构、清洗液等）。一，交叉污染的概念交叉污染影响数据测定有一些特点：108二，交叉污染的分类（一），按照造成交叉污染的携带硬件，将其分为如下五大类：1，样品针的携带污染：见于不同类型的样品间，例如血清或血浆与尿液标本间；血清或血浆与穿刺液之间等。2，试剂针的携带污染：这种情况很常见，存在携带污染的项目很多，不在此一一列举。3，搅拌棒的携带污染：例如通常见到的速率法实验反应曲线跳点等。

二，交叉污染的分类（一），按照造成交叉污染的携带硬件，109二，交叉污染的分类4，反应杯的携带污染：见于试剂黏附力较强，不宜被洗脱的项目，常常引起杯空白升高，杯间差变大。含有很高量碱性清洗剂清洗不良的无机成分的试剂，残留成分影响下一分析。5，清洗装置的携带污染：清洗针吐水量不足，清洗白块不洁，底部沾有凝块等，均会造成此现象。

二，交叉污染的分类4，反应杯的携带污染：110二，交叉污染的分类（二），按照试剂的生化学反应原理，分为如下六大类。对于不同成因的交叉污染，其测试不良表现形式也不同。1，A试剂中含有极高浓度的待测物B（AB）：

例如，AMY试剂中含有8mmol/L的酶激活剂Mg，可能对Mg的测试有影响；另外，最常见的ALT试剂中含有超过1000U/L的LDH做为工具酶，可能对

LDH测试产生影响；等等。二，交叉污染的分类（二），按照试剂的生化学反应原理，分为如下111二，交叉污染的分类2，A试剂中含有与待测物B具有相同吸收峰的C物质（AB）：例如，3，A试剂与B试剂具有不同的氧化还原特性（AB）：例如，CRE试剂中含有高浓度的氧化剂，P法LDH试剂中含有高浓度的NADH+H+，则LDH测试受影响。二，交叉污染的分类2，A试剂中含有与待测物B具有相112二，交叉污染的分类4，A试剂与B试剂发生非氧化还原型反应，消耗B试剂。5，A试剂与B试剂竞争待测物B，形成具有不同吸收峰的物质，从而影响测试。6，A试剂与B试剂反应，形成在B项目副波长处有强吸收峰的物质。二，交叉污染的分类4，A试剂与B试剂发生非氧化还原113三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

1，样品针的防交叉污染程序

2，试剂针的防交叉污染程序

3，反应杯的防交叉污染程序三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

1，样品针的防交114三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

日立机型防交叉污染程序样品针试剂针反应杯其他7600D无无无无7600P无有有无7180有有有无7170有有有无7080有有有无7060有有有无7020有有有无三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

日立机型防交叉污染程115三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

日立纯正清洗剂1，水2，Hitergent3，Hakali4，Hakali-D5，Hicarrynon6，Hichlogent三，日立生化分析仪的防交叉污染程序

日立纯正清洗剂116四，交叉污染实验例证

1，样品针携带污染步骤一：为使实验现象明显，可安装一根旧的样品针。

步骤二：1、5、9号样品为同一份尿液，测试项目为微球蛋白，2、3、4、6、7、8、10、11、12号样品为同一份血清，测试项目为UREA。四，交叉污染实验例证

1，样品针携带污染117

结果：测试不良，2、6、10号样品测试结果偏高。步骤三：设置样品针防交叉污染程序：样品针吸取微球蛋白后，使用W1的清洗剂洗针，然后吸取样品做其他测试。

步骤四：同步骤二做测试。

结果：测试重复性良好。结论：交叉污染程序设置有效。四，交叉污染实验例证结果：测试不良，2、6、10号样品四，1182，试剂针携带污染步骤一：为使实验现象明显，可安装一根旧的试剂针。

步骤二：1、5、9号样品为同一份样品，测试项目为Crea，2、3、4、6、7、8、10、11、12号样品为同一份血清，测试项目为HBDH。四，交叉污染实验例证2，试剂针携带污染四，交叉污染实验例证119步骤三：设置试剂针防交叉污染程序：试剂针吸取Crea后，使用特别的清洗剂洗针，然后吸取LDH试剂测试。步骤四：同步骤二做测试。结果：测试重复性良好。结论：交叉污染程序设置有效。四，交叉污染实验例证步骤三：设置试剂针防交叉污染程序：试四，交叉污染实验例证1203，清洗装置和反应杯的携带污染步骤一：为使实验现象明显，可在清洗白块下粘贴一小块纱布。步骤二：1、2、3、4、5号为同一份样品，测试项目为Crea，测试完成后，停机。然后，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10号为同一份样品，重新开始测试，测试项目为LDH。

结果：测值均偏低，可能存在清洗装置携带污染。四，交叉污染实验例证3，清洗装置和反应杯的携带污染四，交叉污染实验例证121步骤三：做清洗装置的清扫。步骤四：同步骤二做测试。结果：1、2、3、4、5测试数据有改善，但仍偏低，6、7、8、9、10测试数据正常，可能存在反应杯携带污染，清洗装置携带污染消除。步骤五：设置反应杯防交叉污染程序：反应杯完成Crea测试后，使用特别的清洗剂洗杯，然后做其他测试。四，交叉污染实验例证步骤三：做清洗装置的清扫。四，交叉污染实验例证122步骤六：以7180为例，设置4个序号的同样Crea项目，4个序号的同样LDH项目，1—40号样品为同一样品，测试项目为4个Crea测试，41—80号样品为同一样品，测试项目为4个LDH，开始测试。结果：测试数据正常。结论：存在反应杯防交叉污染。四，交叉污染实验例证步骤六：以7180为例，设置4个序号的同四，交叉污染实验