新城疫讲稿课件

鸡新城疫及其防治进展鸡新城疫及其防治进展1新城疫(NewcastleDisease-ND)

世界上流行范围最广、对全球养禽业造成最严重经济损失的家禽传染病之一中国养禽业因此病造成的直接经济损失每年近十亿元人民币新城疫(NewcastleDisease-ND)2新城疫(ND)的发现

1926

年Kraneveld首先报道于印度尼西亚爪哇岛1927年Doyle报道于英国新城(Newcastle)

郡,并分离到病原,该病亦正式得名鸡新城疫新城疫(ND)的发现1926年Kraneveld首先3

鸡新城疫基本概念（一）根据鸡感染NDV临床表现，病毒的毒力及对鸡组织亲嗜器官性不同可分为1速发嗜内脏型（Doyle，1926印度1927年英国新城）所有年龄的鸡只的急性致死性传染病，主要是消化道出血，通常伴有下痢等症状。病原毒是亲内脏性（VVNDV），称为亚洲型或强毒嗜内脏。（一）根据鸡感染NDV临床表现，病毒的毒力及对鸡4

鸡新城疫基本概念2速发嗜肺脑型（Beach，1942）所有年龄的鸡只的急性致死性传染，其病毒是亲神经性的（NVNDV），病的特征以呼吸道和神经系统为住；呼吸困难，喘鸣音，食欲减退，1-2天后一般不超1周出现神经症状：腿翅麻痹，头颈斜歪或扭转，消化道无出血。由此速发性新城疫病毒被称为神经呼吸系统ND或鸡肺脑炎（avicmpneumoencephalitis）

以上两种新城疫病毒总称速发型新城疫病毒（Ｖaloginicvirus),是最早分离的ＮＤＶ，分布于世界各地，是毒力最强的毒株。2速发嗜肺脑型（Beach，1942）所有年龄5

鸡新城疫基本概念3中发型（MND，BeaudetteandBlack，1946）：由中等毒力的毒株或由某些作疫苗的弱毒株所致，主要是幼龄鸡的一种呼吸道系统和神经系统的急性传染病，以咳嗽为特征，很少有喘鸣音。年龄大的鸡很少死亡。中发型（Ｍesogenicstrain)如Ｍukteswarstrain即I系),Roakin,H株4缓发型新城疫（LND，HitchnerandJohnson1948)：某些作疫苗的弱毒株所致，是幼龄鸡的一种轻度或没有明显症状的呼吸系统传染病，任何年龄的鸡感染本型病后都很少死亡(Lentogenicstrain)此型中的一些毒株广泛用于制造疫苗，Ｂ１（II)F(III)Lasota(IV)5无症状型或缓发嗜肠型（LEND，Lancaster，1981）3中发型（MND，Beaudetteand6（二）根据致病性实验毒力划分MDTICPIIVPI强毒40--601.6---2.15>1中毒60--900.6---1.50.0—0.8低毒>90一般4-5天0.0---0.50.0MDT：最小致死量病毒致死鸡胚的平均时间ICPI：1日龄雏鸡脑内注射的致病指数IVPI：6周龄鸡静脉注射致病指数鸡新城疫基本概念（二）根据致病性实验毒力划分MDTICPIIVP7新城疫(ND)的病原属副粘病毒科副粘病毒属血清1型病毒目前只发现一个鸡新城疫病毒血清型致病力因毒株不同而有较大差异新城疫(ND)的病原8

ND流行特点的分子生物学机制1NDV基因组：NDV属于禽副粘病毒I型(APMV-I)成员，副粘病毒科、腮腺炎病毒属、负股单链RNA，基因组约15kb长，包括6组基因，编码6种结构蛋白。ND流行特点的分子生物学机制9NDV的形态结构NDNDV的形态结构ND10

NDVgenome（RNA)

NPPMFHNL3’5’

3’—核衣壳蛋白(NP)—磷蛋白(P)—基质蛋白(M)—融合蛋白(F)—血凝素-神经氨酸酶(HN)—高分子量蛋白(L)—5’

功能：F蛋白和HN蛋白与NDV致病性有关，其余4种蛋白与NDV复制有关。F1F2ND

NDVgenome（RN11HN蛋白通过识别、吸附宿主细胞表面受体来启动病毒的致病过程。F蛋白通过其融合多肽的穿膜作用使病毒囊膜与宿主细胞融合，产生致病作用；新合成的F蛋白是无活性的(F0)，只有当F0

裂解为F1

和F2时，才具有融合功能。ND

HN蛋白通过识别、吸附宿主细胞表面受体来启动病毒的致病过程12M蛋白可通过抑制宿主细胞蛋白质的合成，协同F蛋白和HN蛋白发挥致病作用。2、F基因序列决定NDV的毒力强弱应用RT—PCR(反转录—聚合酶链反应)方法证明：F基因裂解位点区编码的6个氨基酸序列(112-117)决定了NDV的毒力大小。ND

M蛋白可通过抑制宿主细胞蛋白质的合成，协同F蛋白和HN13弱毒株：112Gly-Arg/Lys-Gln-Gly/Ser-Arg-Leu117强毒株：112Arg

-Arg-Gln-Arg

/Lys-Arg-Phe117

其区别在于弱毒株6氨基酸序列中的中性氨基酸(如甘氨酸Gly、丝氨酸Ser、亮氨酸Leu)被碱性氨基酸(如精氨酸Arg、苯丙氨酸Phe)所取代，具有这一序列的F蛋白能被多种细胞产生的蛋白酶裂解，结果对多种细胞具有感染力。（GLN谷氨酰胺）

ND

弱毒株：112Gly-Arg/Lys-Gln-Gly/Ser143、F基因的遗传变异与NDV的变异和流行密切相关F蛋白氨基酸序列不仅决定NDV毒力大小，而且具有良好的免疫原性，因此，F基因成为研究NDV分子流行病学的首选基因。ND

3、F基因的遗传变异与NDV的变异和流行密切相关ND15NDV只有一个血清型。但根据F基因核苷酸序列差异，目前把NDV区分为9个基因型：即NDVI—NDVIX。其中I—VI属于老基因型，VII—IX属于新基因型。VII基因型又可划分为5个基因亚型：VIIa、VIIb、VIIc、VIId、VIIe。ND

NDV只有一个血清型。但根据F基因核苷酸序列差异，目前把N16大量的地方分离株测序结果表明，我国目前流行的NDV基因型非常复杂，既有老基因型，又有新基因型VII流行，更有我国独特的VIII和IX基因型的潜伏。90年代以来我国ND的流行主要是由基因VII、IX和VI型病毒引起的，其中VII型是最主要的流行毒株(约占70%)。ND

大量的地方分离株测序结果表明，我国目前流行的NDV基因型17根据F基因分型标准，常见的NDV毒株如：

Lasota株、clone30株、V4S株——基因II型

I系(Mukteswar株)——基因VII型中国NDV标准强毒株(F48E9株)——基因IX型虽然常用疫苗的基因型与流行毒株的基因型不符，但由于不同毒株间F基因具有较好的同源性(>80%)，因此不同基因型的NDV在免疫原性方面存在很强的交叉保护性。ND

根据F基因分型标准，常见的NDV毒株如：ND184、引起ND免疫失败的两种观点一种观点认为NDVF基因虽然有变异，但这种变异尚未发生质的飞跃——出现常规疫苗不能完全保护的现象。生产中存在的免疫失败主要是由于疫苗使用不当、饲养管理较差、免疫抑制疾病等综合原因导致的结果。(学院，刘秀梵)ND

4、引起ND免疫失败的两种观点ND19另一种观点认为，近年来由于鸡群大剂量、多次使用弱毒疫苗，NDV在强大的免疫压力下F基因发生变异，出现新的毒株，使得传统疫苗毒株不能有效地控制ND的流行。(研究所)

ND

另一种观点认为，近年来由于鸡群大剂量、多次使用弱毒疫苗，ND20HI210-12：可感染NDV，但无症状；HI26-10：可感染NDV，一过性的呼吸困难、呼噜，雏鸡少量死亡，产蛋鸡产蛋量大幅度下降，降幅可达40—60%，约1个月后恢复到原来的90%，不再上升，并且维持时间明显缩短。HI<26：容易受NDV侵袭，疫情很难控制，雏鸡死亡率达95%以上。ND

HI210-12：可感染NDV，但无症状；ND213.5关于成年鸡ND循环抗体对疫苗免疫效果的影响——新观点认为成鸡ND循环抗体对各种疫苗的免疫效果影响很小，无论是免疫弱毒活疫苗还是灭活疫苗，无论免疫前ND循环抗体水平是高还是低，免疫后循环抗体水平均有不同程度的提高，并不会下降。ND

3.5关于成年鸡ND循环抗体对疫苗免疫效果的影响——新观点22log2dND

log2dND23种类毒力接种方式HI应答反应log2Clone30、V4很弱首免点眼或喷雾接种后14天24--26B1（II）F（Ⅲ）弱首免点眼或喷雾8—9天可测出HI效价，12天24Lasota弱首免或二免点眼或喷雾，饮水肌注接种后4天可测出抗体，14天到高峰26—7然后下降，90天可维持在24左右Komarow或Mulkteswar（I）

中多用于复免或紧急免疫，肌注或饮水接种后3天可测出抗体，12天可达212，副作用强不作首免B1+B1或F+F弱3—9周内2次饮水6—12周可达24—7B1+I系或Komarow中3—9周内2次饮水6—10周可达25—11IV+VI

弱3—9周内2次饮水6—12周可达25—8IV+IV3—9周内2次滴鼻6—12周可达28—9单纯灭活苗

肌注≥27

B1+油苗弱3—9周内饮水+肌注6—12周可达24—11

IV+油苗

3—9周内饮水+肌注6—12周可达25—113—9周内滴鼻+肌注6—12周可达28—12B1（105EID50）

1日龄滴鼻接种后7天60%保护率B1（108EID50）

1日龄滴鼻接种后5天100%保护率二免也不要饮水，否则易发生非典型新城疫，由于水质的干扰、饮水时间，造成免疫不均衡。每种活苗的毒力不同、含毒量也不同，抗体应答不同，使用的途径和时机也不相同。易感鸡对接种不同疫苗的应答反应

种类毒力接种方式HI应答反应log2Clone30、V4很弱241/IntracerebralPathogenicityIndex

(脑内致病指数,ICPI)

10只一日龄SPF雏鸡,脑内注射8日内所能观察到的临床症状2/IntravenousPathogenicityIndex

(静脉致病指数,IVPI)

6周龄SPF鸡只10日内的临床症状

新城疫毒力的鉴定方法

新城疫毒力的鉴定方法25新城疫毒力的鉴定方法3/

MeanDeathTime(鸡胚平均死亡时间,MDT)

SPF鸡胚接种–导致死亡的时间4/

AbilitytoformplaquesinCEFcultures

在CEF(鸡胚成纤维细胞)培养中形成蚀斑的能力

必须或不必添加胰岛素新城疫毒力的鉴定方法26新城疫毒株毒力类型1/

Velogenicviscerotropic(速发嗜内脏型强毒):

ICPI–1.5~2.0

高致病力(死亡率80-100%),常见肠道出血2/

Velogenicneurotropic(速发嗜神经型强毒)：

ICPI–1.5~2.0高致病力(死亡率80-100%),常见神经及呼吸道症状，少见肠道症状新城疫毒株毒力类型273/Mesogenic(中等毒力型)：ICPI–0.5~1.5低死亡率，常见呼吸道症状，少见神经症状4/Lentogenic

pneumotropic(缓发嗜呼吸道型)：

ICPI–0.2~0.5轻微呼吸道症状5/Apathogenicenteric

(非致病性肠道型)：ICPI–0~0.2无毒力，主要在肠道增殖3/Mesogenic(中等毒力型)：ICPI–0.28病毒的侵入及局部增殖部位上呼吸道(鼻腔、喉头及气管等）

哈德氏腺

(HarderianGland)ND病毒的侵入及体内增殖过程第一步:病毒侵入野毒或疫苗病毒

病毒的侵入及上呼吸道(鼻腔、喉头ND病毒的侵入及体内增殖29病毒在血液中循环形成病毒血症ND病毒的侵入及体内增殖过程第二步:病毒血症

病毒在血液中循环ND病毒的侵入及体内增殖过程30在靶器管中定向增殖嗜呼吸道毒株嗜肠道型毒株ND病毒的侵入及体内增殖过程第三步:定向增殖

在靶器管中嗜呼吸道毒株嗜肠道型毒株ND病毒的侵入及体内增殖31哈德氏腺

(HarderianGland)

的功能哈德氏腺

(HarderianGland)

的功能32哈德氏腺位于眼球后下方的结膜囊、眶下窦和鼻腔连接处

哈德氏腺位于眼球后下方的结膜囊、眶下窦和鼻腔连接处33哈德氏腺的功能哈德氏腺可分泌:泪液:

++++IgA(粘膜分泌型免疫球蛋白): ++++IgG:

++IgM:

+细胞介导免疫:CD4+

及CD8+哈德氏腺的功能哈德氏腺可分泌:34属二级淋巴组织,孵化期17-18天时，已富含B细胞和T细胞捕获点眼、滴鼻和喷雾免疫的抗原而产生较强的局部免疫（IgA及细胞介导免疫）通过哈德氏腺内的B淋巴细胞向体内其他淋巴器官的循环与扩散而诱发全身免疫反应(IgG和IgM)

哈德氏腺的功能哈德氏腺的功能35

新城疫的防治原则

1、良好的生物安全措施(Biosecurity)2、有效的免疫接种(Vaccination)3、普及和推广免疫监测技术

36

新城疫活毒疫苗的分类中等毒力嗜呼吸道型:Mukteswar(I系) 1.40缓发嗜呼吸道型:LaSota(IV系)

0.44

ClonedLaSota(克隆30)0.36

HB1(II系)

0.20___________________________缓发嗜肠道型:VG/GA

0.35非致病性嗜肠道型:V4、PHY.LMV.42

0.00~0.16

嗜消化道型嗜呼吸道型{{ICPI值毒株名称病毒毒力类型病毒组织嗜型

新城疫活毒疫苗的分类中等毒力嗜呼吸道型:Mukte37嗜呼吸道型

如Mukteswar株（I系）、HB1株(II系)、F株（III系）、LaSota（IV系）和LaSota克隆株(Clone30)等。通称为传统型嗜呼吸道鸡新城疫活毒疫苗。嗜呼吸道型38嗜消化道型如V4株、VG/GA株(新威灵-AVINEW)、Ulster2C株(NDW)和PHY.LMV.42株等通称为：嗜消化道型鸡新城疫活毒疫苗。

39传统型嗜呼吸道疫苗

所产生的问题传统型嗜呼吸道疫苗

所产生的问题40免疫副反应

Post-VaccinationReactions

(PVR)

免疫副反应

Post-VaccinationReacti41免疫副反应(PVR)表现常见于以传统型嗜呼吸道鸡新城疫活毒疫苗(如II系，IV系等）免疫后2~3天的鸡群,被免疫鸡出现呼吸道罗音、喷嚏、神经症状、精神沉郁、采食量下降等。这些症状以喷雾免疫方法尤甚继发支原体及大肠杆菌感染,导致

“三炎”（肝周炎、心包炎及气囊炎）增加药物处理费用,提高生产成本

免疫副反应(PVR)表现42免疫副反应(PVR)原因传统型嗜呼吸道鸡新城疫活毒疫苗病毒主要在呼吸道增殖及疫苗毒株的残留毒力较高

免疫副反应(PVR)43严重程度主要取决于下列因素疫苗残留致病力(ICPI越高，免疫副反应越严重)鸡群健康状况（有无支原体潜在感染等）鸡群免疫状况（母源抗体水平及抗体均匀度）接种质量（雾滴越小，免疫副反应越严重）接种后鸡舍舒适度（鸡舍环境条件，如温度、通风等）免疫副反应(PVR)严重程度主要取决于下列因素免疫副反应(PVR)44免疫副反应(PVR)复合多价苗或嗜肠道型疫苗,

无免疫副反应或反应极其轻微因为嗜肠道型：肠道增殖，无呼吸道损伤或损伤极其轻微非致病性：几乎无任何残留毒性(ICPI值:0.00~0.16)免疫副反应(PVR)复合多价苗或嗜肠道型疫苗,无免疫副45目前新城疫免疫存在的问题

1、局部免疫的缺乏引起非典型新城疫；造成产蛋下降和蛋壳质量问题（产白壳蛋，软蛋），引起呼吸道症状，甚至死亡。2、二免、三免间隔时间太长，造成非典型症状甚至是神经症状和死亡，雏鸡活苗首免、二免、三免正确的间隔时间是15—20天（即5-7天19—21天35天60天120天）成鸡正确的间隔时间8—12周即56—84天；死苗即油苗保护20周3、大小鸡混养由于I系免疫散毒而引起小鸡得新城疫。

目前新城疫免疫存在的问题1、局部免疫的缺乏引起非典型新城疫46非典型新城疫的特点1发病日龄:主要集中在加强免疫前后(如20-30d，50-60d，300-350d等)，同时也有相当数量的鸡群发病日期提前，甚至到10d以前。尤其是30-50d的雏鸡和育成鸡，致死率可高达30—90%。2临床症状：蛋鸡主要表现为呼吸道症状、腹泻、生产性能下降，产蛋下降幅度在30—60%，甚至在70%以上，产软壳蛋、畸形蛋和蛋壳褪色等。3抗体水平：具有高水平的NDHI抗体的鸡群(8.5log2)仍可感染发病。4流行规模和时间：以地方性散发或小规模流行为主，多发于冬、春季节。

非典型新城疫的特点1发病日龄:主要集中在加强免疫前后(如47目前新城疫免疫存在的问题4、疫苗质量问题，油苗抗原含量少，乳化不好造成分层，油质量不好，吸收不好；冻干苗采用非SPF鸡胚生产而接种外源病毒。5、接种途径不科学，饮水免疫效果不确实。6、始终都用弱毒苗，不用油苗；或只用油苗，7、免疫抑制性疾病的存在降低鸡群的免疫应答。

目前新城疫免疫存在的问题4、疫苗质量问题，油苗抗原含量少，乳48目前新城疫免疫存在的问题8、免疫程序设计不和理。9、养鸡环境中有强毒存在10、目前这种形势生物安全措施没有保障。11、自己混合新支苗两种苗，相互干扰而影响免疫效果，如用单苗隔7-14天。（疫苗的联合应用主要问题在于存在免疫干扰，当混合比例适当时他们之间可以相互增强，即产生佐剂作用；当抗原比例不当时，可能发生免疫干扰，强者抑制弱者。另外，接受联合免疫的动物如果对制剂中某一抗原已具有相当的免疫力，在联合免疫时该抗原的免疫应答可能干扰其他抗原的免疫应答。因此，在联合免疫时需要考虑抗原的混合比例、棉衣方法和机体的免疫状态等方面的因素。）

目前新城疫免疫存在的问题8、免疫程序设计不和理。49

科学的免疫程序免疫的目的建立足够的局部免疫（修筑提坝）和全身免疫（组建不同兵种的防御与作战部队全身性细胞介导免疫力）以阻止由相关疾病带来的淘汰率和死亡率。对产蛋鸡，防止相关疾病引起的产蛋下降。对种鸡，在产蛋期激发高水平母源抗体以转移给后代。

科学的免疫程序免疫的目的50

科学的免疫程序免疫的目的1、局部免疫和细胞介导免疫修建堤坝（粘膜屏障）免疫传递主要在细胞中（占位）2、体液免疫（血液）免疫传递既在体液中也在细胞中（建立作战部队）局部免疫抗体IgA减少了病毒从粘摸屏障进入的可能（防止进入体内）全身体液免疫抗体IgG，IgM先减少了病毒在易感染器官的增殖（进入体内后被消灭死苗即油苗主要是血液抗体活苗即冻干苗既有体液免疫又有局部免疫

科学的免疫程序免疫的目的51

Youmiao

油苗与冻干活苗的比较运输及保存方便运输及保存条件较高仅能注射多种免疫途经无排毒及存在污染的可能排毒及存在污染的可能中和母源抗体不敏感中和母源抗体敏感主要激发体液免疫激发细胞免疫和体液免疫抗原量多，接种后不能增殖抗原量少，接种后能增殖灭活苗弱毒活苗弱毒活疫苗与油乳剂灭活苗的主要区别

Youmiao油苗与冻干活苗的比52机体初次免疫应答与再次免疫应答第一次免疫第二次免疫潜伏期7天潜伏期3-4天IgMIgG总体抗体水平机体初次免疫应答与再次免疫应答第一次免疫第二次免疫潜伏期7天53

产蛋尖峰—一般蛋鸡在25周，肉种鸡在30周是保护点。蛋种鸡每隔10周Lasota+H12030周（210天）40周（280）新油0.3ml注射

以后每隔10周一次Lasota+H120饮水或点眼。提高局部免疫力，预防非典型新城疫或传支引起的产蛋下降和蛋壳质量(白壳蛋，软蛋）问题。提前做免疫，使鸡在产蛋尖峰前产生强的保护力，这样避免产蛋高峰免疫，使之应激，影响产蛋蛋（种）鸡参考免疫程序

产蛋尖峰—一般蛋鸡在25周，肉种鸡在30周是保护541、禽流感高发季节20、60、130注射三次。2、新支二联IV+H120可用于雏鸡和产蛋鸡，IV+H52一般用于30日龄以上的鸡，也不用于产蛋鸡。3、鸡痘每千羽份用8-12毫升生理盐水稀释，用专用刺种针刺翼膜1下4、滴鼻，点眼用专用滴瓶，如果用12号针头500只用30毫升生理盐水5、H120非常安全,可用于1日龄的鸡和产蛋鸡蛋鸡参考免疫程序

1、禽流感高发季节20、60、130注射三次。蛋鸡参考免疫程555、

应用传喉疫苗必须采用点眼的方法，免疫后最少10天内最好不使用其他疫苗；4周龄内不准许接触未免疫鸡群。6、

I系一般用于60日龄以上的鸡，一般不用于产蛋鸡，不准许和油苗一起注射也不准许和鸡痘一起注射。7、应用传喉疫苗后最少4周龄内不准许接触未免疫鸡群。8、H52有致病性,不用于首免和产蛋鸡,多日龄混养地鸡

蛋鸡参考免疫程序

5、

应用传喉疫苗必须采用点眼的方法，免疫后最少10天内56

571新城疫：冬春季节减少新城疫苗气雾免疫的使用。2、春冬季节法氏囊病呈低发病状态，28日龄免疫后继发呼吸道疾病，采用减少免疫次数方法。3在法氏囊非流行区域，尽量少使用多价疫苗，如锐必法、法倍妥或法必妥。4鸡群免疫时间恰在大群疾病流行时，确诊后再做决策。肉仔鸡免疫点滴经验

1新城疫：冬春季节减少新城疫苗气雾免疫的使用。肉仔鸡免疫点58

原则为坚决免疫好新城疫，控制继发病，投药和免疫两不误。①新城疫首次免疫时，鸡群慢性呼吸道疾病发做。②21天新城疫免疫，鸡群慢性呼吸道疾病+大肠杆菌病发做。③法氏囊首次免疫时，鸡群有少量的呼吸道疾病。④法氏囊免疫时发现新城疫抗体低+大肠杆菌病。

5使用疫苗尽量使用SPF鸡胚源性的疫苗（新城疫、传支、法氏囊）。肉仔鸡免疫点滴经验

原则为坚决免疫好新城疫，控制继发病，投药和免疫两不误。肉59相关知识I系克隆-83是I系的克隆株I系中的小嗜斑IV(Lasota)Clone30,N79(IV克隆株),NGM88(IV的鹅胚化克隆株)VH一株野外毒株,其毒力相当于IVII(HB1株)是一株天然弱毒株F株(III)是从鸡体分离出来的弱毒株

相关知识I系克隆-83是I系的克隆株I系中的小嗜斑601、抗体水平应持久一致、即平衡离散度小，蛋鸡群体水平在8—10之间为最好，个体水平应在7以上，在6以下是应采取辅助免疫措施。HI210-12：可感染NDV，但无症状；HI26-10：可感染NDV，一过性的呼吸困难、呼噜，雏鸡少量死亡，产蛋鸡产蛋量大幅度下降，降幅可达40—60%，约1个月后恢复到原来的90%，不再上升，并且维持时间明显缩短。

HI<26：容易受NDV侵袭，疫情很难控制，雏鸡死亡率达95%以上。）三、普及和推广免疫监测技术

1、抗体水平应持久一致、即平衡离散度小，蛋鸡群体水平在8—1612、HI效价高不等于黏膜抵抗力高，只代表体液循环抗体（IgG）高，体液循环抗体并不能达到呼吸道局部，不能干扰IgA的产生。3、母原抗体只干扰体液免疫，不能干扰局部免疫力，因为局部免疫力产生于呼吸道黏膜局部，利用哈德氏腺淋巴细胞产生。三、普及和推广免疫监测技术

2、HI效价高不等于黏膜抵抗力高，只代表体液循环抗体（IgG62三、普及和推广免疫监测技术新城疫抗体抗体水平半衰期母原抗体23（8）--25（32）4--5首免抗体24（16）--25（32）15二免抗体II24（16）--27（128）30IV高一些40三免抗体25（32）--28（256）60油苗抗体首免普遍高2—3个滴度3—4个月

5—8个月4、母原抗体水平与免疫后抗体水平

三、普及和推广免疫监测技术新城疫抗体抗体水平半衰期母原抗体2635、不同品种不同来源的雏鸡首免时间应不同，方法是再首免前测一次抗体，推出免疫时间,雏鸡作适宜的确定方法:初免日龄=4.5×（1日龄的HI的对数值—4）+5例如1日龄为1：64则初免日龄是14=4.5（6-4）+5如果经测定1日龄HI效价低于1：16，则应在1日龄免。三、普及和推广免疫监测技术

5、不同品种不同来源的雏鸡首免时间应不同，方法是再首免前测一646、一般首免不必检测，只要间隔10到20天重免即可（活苗的正确的雏鸡的免役间隔时间，成鸡指5周龄以后活苗间隔8到12周）除非怀疑免疫不成功。7、二免、三免后10到20天检测抗体，用油苗后30到40天采血，采的过早效价未到高峰。三、普及和推广免疫监测技术

6、一般首免不必检测，只要间隔10到20天重免即可（活苗的正65三、普及和推广免疫监测技术采血注意事项：1、最好早晨喂食前采，血量确保1毫升。2、最好用青霉素瓶，洗净、消毒、烘干、并用胶塞。3、应用注射器，每只鸡一个，不要用针头刺破血管接血，容易污染，并可能与毛囊中NDV起抗原抗体反应，而影响效价。4、血液要放成斜面，不能直立，否则不易析出血清，不凝固的血不能用。5、要有足够的比例，太少了没有代表性，10-15/500只，15—20/1000，20—25/2000-4000，30＞5000从不同角落选样抽血。

三、普及和推广免疫监测技术采血注意事项：66三、普及和推广免疫监测技术结果判定:A、如果低于23--2（8-4）倍，高的高于28（

256）则有野毒感染。B、

普遍高于27（128）高则上千，则已耐过，不必免疫。C、如果没有免疫或者免疫后2个月效价仍在上升，则有野毒感染。D、

非免疫鸡群或者即将过期鸡群22—24（4-16），有效期24—27（

16-128），高免鸡群26-210（

64-1024）。E、

首免10天后应比接种前上升1—2个滴度。三、普及和推广免疫监测技术结果判定:67鸡新城疫及其防治进展鸡新城疫及其防治进展68新城疫(NewcastleDisease-ND)

世界上流行范围最广、对全球养禽业造成最严重经济损失的家禽传染病之一中国养禽业因此病造成的直接经济损失每年近十亿元人民币新城疫(NewcastleDisease-ND)69新城疫(ND)的发现

1926

年Kraneveld首先报道于印度尼西亚爪哇岛1927年Doyle报道于英国新城(Newcastle)

郡,并分离到病原,该病亦正式得名鸡新城疫新城疫(ND)的发现1926年Kraneveld首先70

鸡新城疫基本概念（一）根据鸡感染NDV临床表现，病毒的毒力及对鸡组织亲嗜器官性不同可分为1速发嗜内脏型（Doyle，1926印度1927年英国新城）所有年龄的鸡只的急性致死性传染病，主要是消化道出血，通常伴有下痢等症状。病原毒是亲内脏性（VVNDV），称为亚洲型或强毒嗜内脏。（一）根据鸡感染NDV临床表现，病毒的毒力及对鸡71

鸡新城疫基本概念2速发嗜肺脑型（Beach，1942）所有年龄的鸡只的急性致死性传染，其病毒是亲神经性的（NVNDV），病的特征以呼吸道和神经系统为住；呼吸困难，喘鸣音，食欲减退，1-2天后一般不超1周出现神经症状：腿翅麻痹，头颈斜歪或扭转，消化道无出血。由此速发性新城疫病毒被称为神经呼吸系统ND或鸡肺脑炎（avicmpneumoencephalitis）

以上两种新城疫病毒总称速发型新城疫病毒（Ｖaloginicvirus),是最早分离的ＮＤＶ，分布于世界各地，是毒力最强的毒株。2速发嗜肺脑型（Beach，1942）所有年龄72

鸡新城疫基本概念3中发型（MND，BeaudetteandBlack，1946）：由中等毒力的毒株或由某些作疫苗的弱毒株所致，主要是幼龄鸡的一种呼吸道系统和神经系统的急性传染病，以咳嗽为特征，很少有喘鸣音。年龄大的鸡很少死亡。中发型（Ｍesogenicstrain)如Ｍukteswarstrain即I系),Roakin,H株4缓发型新城疫（LND，HitchnerandJohnson1948)：某些作疫苗的弱毒株所致，是幼龄鸡的一种轻度或没有明显症状的呼吸系统传染病，任何年龄的鸡感染本型病后都很少死亡(Lentogenicstrain)此型中的一些毒株广泛用于制造疫苗，Ｂ１（II)F(III)Lasota(IV)5无症状型或缓发嗜肠型（LEND，Lancaster，1981）3中发型（MND，Beaudetteand73（二）根据致病性实验毒力划分MDTICPIIVPI强毒40--601.6---2.15>1中毒60--900.6---1.50.0—0.8低毒>90一般4-5天0.0---0.50.0MDT：最小致死量病毒致死鸡胚的平均时间ICPI：1日龄雏鸡脑内注射的致病指数IVPI：6周龄鸡静脉注射致病指数鸡新城疫基本概念（二）根据致病性实验毒力划分MDTICPIIVP74新城疫(ND)的病原属副粘病毒科副粘病毒属血清1型病毒目前只发现一个鸡新城疫病毒血清型致病力因毒株不同而有较大差异新城疫(ND)的病原75

ND流行特点的分子生物学机制1NDV基因组：NDV属于禽副粘病毒I型(APMV-I)成员，副粘病毒科、腮腺炎病毒属、负股单链RNA，基因组约15kb长，包括6组基因，编码6种结构蛋白。ND流行特点的分子生物学机制76NDV的形态结构NDNDV的形态结构ND77

NDVgenome（RNA)

NPPMFHNL3’5’

3’—核衣壳蛋白(NP)—磷蛋白(P)—基质蛋白(M)—融合蛋白(F)—血凝素-神经氨酸酶(HN)—高分子量蛋白(L)—5’

功能：F蛋白和HN蛋白与NDV致病性有关，其余4种蛋白与NDV复制有关。F1F2ND

NDVgenome（RN78HN蛋白通过识别、吸附宿主细胞表面受体来启动病毒的致病过程。F蛋白通过其融合多肽的穿膜作用使病毒囊膜与宿主细胞融合，产生致病作用；新合成的F蛋白是无活性的(F0)，只有当F0

裂解为F1

和F2时，才具有融合功能。ND

HN蛋白通过识别、吸附宿主细胞表面受体来启动病毒的致病过程79M蛋白可通过抑制宿主细胞蛋白质的合成，协同F蛋白和HN蛋白发挥致病作用。2、F基因序列决定NDV的毒力强弱应用RT—PCR(反转录—聚合酶链反应)方法证明：F基因裂解位点区编码的6个氨基酸序列(112-117)决定了NDV的毒力大小。ND

M蛋白可通过抑制宿主细胞蛋白质的合成，协同F蛋白和HN80弱毒株：112Gly-Arg/Lys-Gln-Gly/Ser-Arg-Leu117强毒株：112Arg

-Arg-Gln-Arg

/Lys-Arg-Phe117

其区别在于弱毒株6氨基酸序列中的中性氨基酸(如甘氨酸Gly、丝氨酸Ser、亮氨酸Leu)被碱性氨基酸(如精氨酸Arg、苯丙氨酸Phe)所取代，具有这一序列的F蛋白能被多种细胞产生的蛋白酶裂解，结果对多种细胞具有感染力。（GLN谷氨酰胺）

ND

弱毒株：112Gly-Arg/Lys-Gln-Gly/Ser813、F基因的遗传变异与NDV的变异和流行密切相关F蛋白氨基酸序列不仅决定NDV毒力大小，而且具有良好的免疫原性，因此，F基因成为研究NDV分子流行病学的首选基因。ND

3、F基因的遗传变异与NDV的变异和流行密切相关ND82NDV只有一个血清型。但根据F基因核苷酸序列差异，目前把NDV区分为9个基因型：即NDVI—NDVIX。其中I—VI属于老基因型，VII—IX属于新基因型。VII基因型又可划分为5个基因亚型：VIIa、VIIb、VIIc、VIId、VIIe。ND

NDV只有一个血清型。但根据F基因核苷酸序列差异，目前把N83大量的地方分离株测序结果表明，我国目前流行的NDV基因型非常复杂，既有老基因型，又有新基因型VII流行，更有我国独特的VIII和IX基因型的潜伏。90年代以来我国ND的流行主要是由基因VII、IX和VI型病毒引起的，其中VII型是最主要的流行毒株(约占70%)。ND

大量的地方分离株测序结果表明，我国目前流行的NDV基因型84根据F基因分型标准，常见的NDV毒株如：

Lasota株、clone30株、V4S株——基因II型

I系(Mukteswar株)——基因VII型中国NDV标准强毒株(F48E9株)——基因IX型虽然常用疫苗的基因型与流行毒株的基因型不符，但由于不同毒株间F基因具有较好的同源性(>80%)，因此不同基因型的NDV在免疫原性方面存在很强的交叉保护性。ND

根据F基因分型标准，常见的NDV毒株如：ND854、引起ND免疫失败的两种观点一种观点认为NDVF基因虽然有变异，但这种变异尚未发生质的飞跃——出现常规疫苗不能完全保护的现象。生产中存在的免疫失败主要是由于疫苗使用不当、饲养管理较差、免疫抑制疾病等综合原因导致的结果。(学院，刘秀梵)ND

4、引起ND免疫失败的两种观点ND86另一种观点认为，近年来由于鸡群大剂量、多次使用弱毒疫苗，NDV在强大的免疫压力下F基因发生变异，出现新的毒株，使得传统疫苗毒株不能有效地控制ND的流行。(研究所)

ND

另一种观点认为，近年来由于鸡群大剂量、多次使用弱毒疫苗，ND87HI210-12：可感染NDV，但无症状；HI26-10：可感染NDV，一过性的呼吸困难、呼噜，雏鸡少量死亡，产蛋鸡产蛋量大幅度下降，降幅可达40—60%，约1个月后恢复到原来的90%，不再上升，并且维持时间明显缩短。HI<26：容易受NDV侵袭，疫情很难控制，雏鸡死亡率达95%以上。ND

HI210-12：可感染NDV，但无症状；ND883.5关于成年鸡ND循环抗体对疫苗免疫效果的影响——新观点认为成鸡ND循环抗体对各种疫苗的免疫效果影响很小，无论是免疫弱毒活疫苗还是灭活疫苗，无论免疫前ND循环抗体水平是高还是低，免疫后循环抗体水平均有不同程度的提高，并不会下降。ND

3.5关于成年鸡ND循环抗体对疫苗免疫效果的影响——新观点89log2dND

log2dND90种类毒力接种方式HI应答反应log2Clone30、V4很弱首免点眼或喷雾接种后14天24--26B1（II）F（Ⅲ）弱首免点眼或喷雾8—9天可测出HI效价，12天24Lasota弱首免或二免点眼或喷雾，饮水肌注接种后4天可测出抗体，14天到高峰26—7然后下降，90天可维持在24左右Komarow或Mulkteswar（I）

中多用于复免或紧急免疫，肌注或饮水接种后3天可测出抗体，12天可达212，副作用强不作首免B1+B1或F+F弱3—9周内2次饮水6—12周可达24—7B1+I系或Komarow中3—9周内2次饮水6—10周可达25—11IV+VI

弱3—9周内2次饮水6—12周可达25—8IV+IV3—9周内2次滴鼻6—12周可达28—9单纯灭活苗

肌注≥27

B1+油苗弱3—9周内饮水+肌注6—12周可达24—11

IV+油苗

3—9周内饮水+肌注6—12周可达25—113—9周内滴鼻+肌注6—12周可达28—12B1（105EID50）

1日龄滴鼻接种后7天60%保护率B1（108EID50）

1日龄滴鼻接种后5天100%保护率二免也不要饮水，否则易发生非典型新城疫，由于水质的干扰、饮水时间，造成免疫不均衡。每种活苗的毒力不同、含毒量也不同，抗体应答不同，使用的途径和时机也不相同。易感鸡对接种不同疫苗的应答反应

种类毒力接种方式HI应答反应log2Clone30、V4很弱911/IntracerebralPathogenicityIndex

(脑内致病指数,ICPI)

10只一日龄SPF雏鸡,脑内注射8日内所能观察到的临床症状2/IntravenousPathogenicityIndex

(静脉致病指数,IVPI)

6周龄SPF鸡只10日内的临床症状

新城疫毒力的鉴定方法

新城疫毒力的鉴定方法92新城疫毒力的鉴定方法3/

MeanDeathTime(鸡胚平均死亡时间,MDT)

SPF鸡胚接种–导致死亡的时间4/

AbilitytoformplaquesinCEFcultures

在CEF(鸡胚成纤维细胞)培养中形成蚀斑的能力

必须或不必添加胰岛素新城疫毒力的鉴定方法93新城疫毒株毒力类型1/

Velogenicviscerotropic(速发嗜内脏型强毒):

ICPI–1.5~2.0

高致病力(死亡率80-100%),常见肠道出血2/

Velogenicneurotropic(速发嗜神经型强毒)：

ICPI–1.5~2.0高致病力(死亡率80-100%),常见神经及呼吸道症状，少见肠道症状新城疫毒株毒力类型943/Mesogenic(中等毒力型)：ICPI–0.5~1.5低死亡率，常见呼吸道症状，少见神经症状4/Lentogenic

pneumotropic(缓发嗜呼吸道型)：

ICPI–0.2~0.5轻微呼吸道症状5/Apathogenicenteric

(非致病性肠道型)：ICPI–0~0.2无毒力，主要在肠道增殖3/Mesogenic(中等毒力型)：ICPI–0.95病毒的侵入及局部增殖部位上呼吸道(鼻腔、喉头及气管等）

哈德氏腺

(HarderianGland)ND病毒的侵入及体内增殖过程第一步:病毒侵入野毒或疫苗病毒

病毒的侵入及上呼吸道(鼻腔、喉头ND病毒的侵入及体内增殖96病毒在血液中循环形成病毒血症ND病毒的侵入及体内增殖过程第二步:病毒血症

病毒在血液中循环ND病毒的侵入及体内增殖过程97在靶器管中定向增殖嗜呼吸道毒株嗜肠道型毒株ND病毒的侵入及体内增殖过程第三步:定向增殖

在靶器管中嗜呼吸道毒株嗜肠道型毒株ND病毒的侵入及体内增殖98哈德氏腺

(HarderianGland)

的功能哈德氏腺

(HarderianGland)

的功能99哈德氏腺位于眼球后下方的结膜囊、眶下窦和鼻腔连接处

哈德氏腺位于眼球后下方的结膜囊、眶下窦和鼻腔连接处100哈德氏腺的功能哈德氏腺可分泌:泪液:

++++IgA(粘膜分泌型免疫球蛋白): ++++IgG:

++IgM:

+细胞介导免疫:CD4+

及CD8+哈德氏腺的功能哈德氏腺可分泌:101属二级淋巴组织,孵化期17-18天时，已富含B细胞和T细胞捕获点眼、滴鼻和喷雾免疫的抗原而产生较强的局部免疫（IgA及细胞介导免疫）通过哈德氏腺内的B淋巴细胞向体内其他淋巴器官的循环与扩散而诱发全身免疫反应(IgG和IgM)

哈德氏腺的功能哈德氏腺的功能102

新城疫的防治原则

1、良好的生物安全措施(Biosecurity)2、有效的免疫接种(Vaccination)3、普及和推广免疫监测技术

103

新城疫活毒疫苗的分类中等毒力嗜呼吸道型:Mukteswar(I系) 1.40缓发嗜呼吸道型:LaSota(IV系)

0.44

ClonedLaSota(克隆30)0.36

HB1(II系)

0.20___________________________缓发嗜肠道型:VG/GA

0.35非致病性嗜肠道型:V4、PHY.LMV.42

0.00~0.16

嗜消化道型嗜呼吸道型{{ICPI值毒株名称病毒毒力类型病毒组织嗜型

新城疫活毒疫苗的分类中等毒力嗜呼吸道型:Mukte104嗜呼吸道型

如Mukteswar株（I系）、HB1株(II系)、F株（III系）、LaSota（IV系）和LaSota克隆株(Clone30)等。通称为传统型嗜呼吸道鸡新城疫活毒疫苗。嗜呼吸道型105嗜消化道型如V4株、VG/GA株(新威灵-AVINEW)、Ulster2C株(NDW)和PHY.LMV.42株等通称为：嗜消化道型鸡新城疫活毒疫苗。

106传统型嗜呼吸道疫苗

所产生的问题传统型嗜呼吸道疫苗

所产生的问题107免疫副反应

Post-VaccinationReactions

(PVR)

免疫副反应

Post-VaccinationReacti108免疫副反应(PVR)表现常见于以传统型嗜呼吸道鸡新城疫活毒疫苗(如II系，IV系等）免疫后2~3天的鸡群,被免疫鸡出现呼吸道罗音、喷嚏、神经症状、精神沉郁、采食量下降等。这些症状以喷雾免疫方法尤甚继发支原体及大肠杆菌感染,导致

“三炎”（肝周炎、心包炎及气囊炎）增加药物处理费用,提高生产成本

免疫副反应(PVR)表现109免疫副反应(PVR)原因传统型嗜呼吸道鸡新城疫活毒疫苗病毒主要在呼吸道增殖及疫苗毒株的残留毒力较高

免疫副反应(PVR)110严重程度主要取决于下列因素疫苗残留致病力(ICPI越高，免疫副反应越严重)鸡群健康状况（有无支原体潜在感染等）鸡群免疫状况（母源抗体水平及抗体均匀度）接种质量（雾滴越小，免疫副反应越严重）接种后鸡舍舒适度（鸡舍环境条件，如温度、通风等）免疫副反应(PVR)严重程度主要取决于下列因素免疫副反应(PVR)111免疫副反应(PVR)复合多价苗或嗜肠道型疫苗,

无免疫副反应或反应极其轻微因为嗜肠道型：肠道增殖，无呼吸道损伤或损伤极其轻微非致病性：几乎无任何残留毒性(ICPI值:0.00~0.16)免疫副反应(PVR)复合多价苗或嗜肠道型疫苗,无免疫副112目前新城疫免疫存在的问题

1、局部免疫的缺乏引起非典型新城疫；造成产蛋下降和蛋壳质量问题（产白壳蛋，软蛋），引起呼吸道症状，甚至死亡。2、二免、三免间隔时间太长，造成非典型症状甚至是神经症状和死亡，雏鸡活苗首免、二免、三免正确的间隔时间是15—20天（即5-7天19—21天35天60天120天）成鸡正确的间隔时间8—12周即56—84天；死苗即油苗保护20周3、大小鸡混养由于I系免疫散毒而引起小鸡得新城疫。

目前新城疫免疫存在的问题1、局部免疫的缺乏引起非典型新城疫113非典型新城疫的特点1发病日龄:主要集中在加强免疫前后(如20-30d，50-60d，300-350d等)，同时也有相当数量的鸡群发病日期提前，甚至到10d以前。尤其是30-50d的雏鸡和育成鸡，致死率可高达30—90%。2临床症状：蛋鸡主要表现为呼吸道症状、腹泻、生产性能下降，产蛋下降幅度在30—60%，甚至在70%以上，产软壳蛋、畸形蛋和蛋壳褪色等。3抗体水平：具有高水平的NDHI抗体的鸡群(8.5log2)仍可感染发病。4流行规模和时间：以地方性散发或小规模流行为主，多发于冬、春季节。

非典型新城疫的特点1发病日龄:主要集中在加强免疫前后(如114目前新城疫免疫存在的问题4、疫苗质量问题，油苗抗原含量少，乳化不好造成分层，油质量不好，吸收不好；冻干苗采用非SPF鸡胚生产而接种外源病毒。5、接种途径不科学，饮水免疫效果不确实。6、始终都用弱毒苗，不用油苗；或只用油苗，7、免疫抑制性疾病的存在降低鸡群的免疫应答。

目前新城疫免疫存在的问题4、疫苗质量问题，油苗抗原含量少，乳115目前新城疫免疫存在的问题8、免疫程序设计不和理。9、养鸡环境中有强毒存在10、目前这种形势生物安全措施没有保障。11、自己混合新支苗两种苗，相互干扰而影响免疫效果，如用单苗隔7-14天。（疫苗的联合应用主要问题在于存在免疫干扰，当混合比例适当时他们之间可以相互增强，即产生佐剂作用；当抗原比例不当时，可能发生免疫干扰，强者抑制弱者。另外，接受联合免疫的动物如果对制剂中某一抗原已具有相当的免疫力，在联合免疫时该抗原的免疫应答可能干扰其他抗原的免疫应答。因此，在联合免疫时需要考虑抗原的混合比例、棉衣方法和机体的免疫状态等方面的因素。）

目前新城疫免疫存在的问题8、免疫程序设计不和理。116

科学的免疫程序免疫的目的建立足够的局部免疫（修筑提坝）和全身免疫（组建不同兵种的防御与作战部队全身性细胞介导免疫力）以阻止由相关疾病带来的淘汰率和死亡率。对产蛋鸡，防止相关疾病引起的产蛋下降。对种鸡，在产蛋期激发高水平母源抗体以转移给后代。

科学的免疫程序免疫的目的117

科学的免疫程序免疫的目的1、局部免疫和细胞介导免疫修建堤坝（粘膜屏障）免疫传递主要在细胞中（占位）2、体液免疫（血液）免疫传递既在体液中也在细胞中（建立作战部队）局部免疫抗体IgA减少了病毒从粘摸屏障进入的可能（防止进入体内）全身体液免疫抗体IgG，IgM先减少了病毒在易感染器官的增殖（进入体内后被消灭死苗即油苗主要是血液抗体活苗即冻干苗既有体液免疫又有局部免疫

科学的免疫程序免疫的目的118

Youmiao

油苗与冻干活苗的比较运输及保存方便运输及保存条件较高仅能注射多种免疫途经无排毒及存在污染的可能排毒及存在污染的可能中和母源抗体不敏感中和母源抗体敏感主要激发体液免疫激发细胞免疫和体液免疫抗原量多，接种后不能增殖抗原量少，接种后能增殖灭活苗弱毒活苗弱毒活疫苗与油乳剂灭活苗的主要区别

Youmiao油苗与冻干活苗的比119机体初次免疫应答与再次免疫应答第一次免疫第二次免疫潜伏期7天潜伏期3-4天IgMIgG总体抗体水平机体初次免疫应答与再次免疫应答第一次免疫第二次免疫潜伏期7天120

产蛋尖峰—一般蛋鸡在25周，肉种鸡在30周是保护点。蛋种鸡每隔10周Lasota+H12030周（210天）40周（280）新油0.3ml注射

以后每隔10周一次Lasota+H120饮水或点眼。提高局部免疫力，预防非典型新城疫或传支引起的产蛋下降和蛋壳质量(白壳蛋，软蛋）问题。提前做免疫，使鸡在产蛋尖峰前产生强的保护力，这样避免产蛋高峰免疫，使之应激，影响产蛋蛋（种）鸡参考免疫程序

产蛋尖峰—一般蛋鸡在25周，肉种鸡在30周是保护1211、禽流感高发季节20、60、130注射三次。2、新支二联IV+H120可用于雏鸡和产蛋鸡，IV+H52一般用于30日龄以上的