土壤脲酶（S-UE）活性检测试剂盒说明书-可见分光光度法UPLC-MS-4044

电话：400-998-2324邮箱：service_uplc_ms@163.com网址：本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！-上海液质检测技术有限公司第第页土壤脲酶（S-UE）活性检测试剂盒说明书注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。货号：UPLC-MS-4044规格：50T/24S

可见分光光度法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。试剂名称规格保存条件试剂一液体10mL×1瓶（自备）2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存试剂三液体65mL×1瓶2-8℃保存试剂四A液液体2mL×1瓶2-8℃保存试剂四B液液体8mL×1瓶2-8℃保存试剂五液体0.5mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：自备甲苯；2、试剂二：临用前取1瓶加入10mL蒸馏水，充分溶解待用，用不完的试剂2-8℃保存4周；3、试剂四：临用前将A液和B液按体积比1：4混合待用；用多少配多少；4EP9.5mL蒸馏水，混匀，待用；用不2-8℃保存两周；5、标准品：1mg/mL氮标准液。产品说明：S-UEUrea

NH4++H2CO3NH4++ClO-+Phenol

Alkalinesolution

IndophenolBlue(630nm)2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。需自备的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、30-50目筛、研钵、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上，调节波长至630nm，蒸馏水调零。2、培养试剂名称测定管对照管风干土样（g）0.250.25试剂一（μL）125125振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置15min试剂二（μL）625-蒸馏水（μL）-625试剂三（μL）12501250混匀，放入37℃水浴或恒温培养箱培养24h后，10000g常温离心10min，取上清液。310倍（0.1mL0.9mL蒸馏水），若最终计算得到的ΔA1则继续稀释。4、标准品的准备：吸取适量的标准溶液，用蒸馏水稀释至8、6、4、2、1、0.5、0.25、0（空白管）μg/mL。可参考下表。序号稀释前浓度（μg/mL）（µL）蒸馏水体积（µL）稀释后浓度（μg/mL）1100020198010210800400831060040064104006004545005002625005001715005000.580.55005000.259-05000备注：实验中每个标准管需360µL标准液。5、测氨量试剂名称测定管对照管标准管（μL）360360360试剂四（μL）120120120试剂五（μL）120120120充分混匀，室温放置20min蒸馏水（μL）400400400充分混匀，630nmAA测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管，每个测定管设一个对照管。标准曲线和空白管只需1-2次。三、S-UE活力的计算1、标曲绘制标准曲线的建立：根据标准管的浓度（x，μmol/L）和吸光度ΔA标准（y，ΔA标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测定（y，ΔA测定）带入公式计算样本浓度（x，μmol/L）。2、S-UE活力计算单位的定义：每天每g土样中产生1μgNH3-N定义为一个酶活