2020年-2021年生物新高考地区高考题分类汇编(细胞工程)

20232023汇编（细胞工程）年1月浙江农作物秸秆的回收利用方式很多，其中之一是将秸秆碎化后作为食用菌的栽培基质。碎化秸秆中纤维所起的作用，相当于植物组织培育中固体培育基的（ A.琼脂+蔗糖 B.蔗糖+激素C.激素+无机盐 D.无机盐+琼脂【答案】A【分析】植物组织培育基主要成分是无机养分物（量元素和微量元素两部分组成）、有机物（维生素、蔗糖、琼脂等（）培育基中的碳水化合物通常是蔗糖，作为培育基内的碳源和能源主要是作为培育基的支持物，使培育基呈固体状态，而成为固体培育基。用菌菌丝生长过程中大量降解,秸秆栽培食用菌是秸秆利用的最佳途径。【详解】据题干的信息，“秸秆碎化后作为食用菌的栽培基质”，秸秆中的纤维素在食用菌菌丝生长过程中大量降解，供应碳源和能源，这相当于植物组织培育基中添加的蔗糖；秸秆中的这相当于植物组织培育基中添加的琼脂。故选A。2.（2023江苏）11.下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工的叙述，错误的是（ ）等物质发育成个体猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴将骨髓瘤细胞和B为杂交瘤细胞【答案】D【分析】1、胚胎移植的生理基础（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体供应了相同的生理环境； （2）胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集供应了可能；子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内；（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。2、浆细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖力量，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的力量，因此利用动物细胞融合技术将浆细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。【详解】A、细胞培育和早期胚胎培育的培育液中通常需添加血清等物质，A正确；BBCCD将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导融合后的细胞都是杂交瘤细胞，还有 B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，D错误。故选D。3.（2023江苏）5.植物组织培育技术常用于商业化生产其过程一般为:无菌培育物的建立→培育物增殖→生根培育→试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述错误的是（ ）为获得无菌培育物，外植体要消毒处理后才可接种培育体等结构提高培育基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根用同一植株体细胞离体培育获得的再生苗不会消灭变异【答案】D【分析】1、离体的植物组织或细胞，在培育一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规章，是一种高度液泡化的呈无定外形态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织连续进行培育，又可以重新分化成根或芽等可以发育成完整的植株体。2发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。【详解】A、植物组织培育过程中应留意无菌操作，为获得无菌培育物，外植体要经过表面消毒处理后，才能进行培育，所用的培育基必需彻底灭菌，A正确；B、组织培育过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构，胚状体若包裹上人工种皮，可制作成人工种子，B正确；C、生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成，因此提高培育基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根，C正确；D用同一植株体细胞离体培育获得的再生苗会消灭变异， 在愈伤组织的培育过程中可能发生基因突变等变异， D错误。故选D。4.（2023辽宁）3.下列有关病毒在生物学和医学领域应的叙述，错误的是（ ）灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体基因工程中常用噬菌体转化植物细胞经灭活或减毒处理的病毒可用于免疫预防【答案】C【分析】1、病毒是非细胞生物，只能寄生在活细胞中进行生命活动。病毒依据宿主细胞的种类可分为植物病毒、动物病毒和噬菌体；依据遗传物质来分，分为 DNA病毒和RNA病毒；病毒核酸和蛋白质组成。2、疫苗是将病原微生物（如细菌、立克次氏体、病毒等）及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。应用转基因技术生产的疫苗，主要成分是病毒的表面抗原蛋白，接种后能刺激机体免疫细胞产生抵制病毒的抗体。A还可以接受灭活的病毒，AB、病毒作为抗原可刺激机体发生特异性免疫，产生抗体，特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体， B正确；CTiT-DNA受体细胞的染色体上，CD、经过灭活或减毒处理的病毒可以作为免疫学中的疫苗，用于免疫预防，D正确。故选C。5.（2023北京） 争辩者拟通过有性杂交的方法将簇毛麦（2n=14）的优良性状导入一般小麦（2n=42）给数以千计的小麦小花授粉，10离体培育，产生愈伤组织，进而获得含28条染色体的大量杂种株。以下表述错误的是（ ）簇毛麦与小麦之间存在生殖隔离培育过程中幼胚细胞经过脱分化和再分化杂种植株减数分裂时染色体能正常联会杂种植株的染色体加倍后能产生可育植株【答案】C【分析】1、生殖隔离是指由于各方面的缘由，使亲缘关系接近的类群之间在自然条件下不交配，即使能交配也不能产生后代或不能产生可育后代的现象。2、植物组织培育：①原理：植物细胞具有全能性。②过程：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）经过脱分化形成愈伤组织，又经过再分化形成胚状体，最终形成植株（新植体）。A乱，不行育，故二者之间存在生殖隔离，AB形成胚状体或丛芽，从而得到完整植株，BC、杂种植株细胞内由于没有同源染色体，故减数分裂时染色体无法正常联会，C错误；D、杂种植株的染色体加倍后能获得可育植株，D正确。故选C。6.（2023福建）11.科研人员利用植物体细胞杂交技术培育矮牵牛新品种，技术流程示意图如下。下列叙述正确的是（）愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合和细胞壁再生用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体【答案】D【分析】分析题图：首先用酶解法去壁，一般使用纤维素酶和果胶酶处理；然后诱导原生质体融合，接受的方法一般包括物理法（离心、振荡、电激）、化学法（用聚乙二醇处理）；培育融合的原生质体再生出新的细胞壁，形成杂种细胞。然后杂种细胞经过植物组织培育技术可以培育形成杂种植株。【详解】A、愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞脱分化形成的， 错误；B由于基因的选择性表达和基因间的互作效应， 获得的杂植株不肯定能够表现亲本的优良性状， B错误；C可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合， 但不能诱导胞壁的再生，C错误；D由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶， 故可以用维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体， D正确。故选D。7．（2023·1月浙江选考）下图为动物成纤维细胞的培育程示意图。下列叙述正确的是（ ）步骤①的操作不需要在无菌环境中进行CD．步骤④培育过程中不会发生细胞转化【答案】C【分析】动物细胞培育过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培育液中（原代培育）→放入二氧化碳培育箱培育→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培育液（传代培育）→放入二氧化碳培育箱培育。【详解】A、动物细胞培育过程需要无菌操作，故步骤①的操作需要在无菌环境中进行，A错误；B动物细胞培育过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动组织，分散成单个细胞，制成细胞悬液， B错误；C传代培育时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞， 使之散成单个细胞，再分瓶培育，C正确；DD故选C。8.（2023辽宁）13.下图是利用体细胞核移植技术克隆优奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（ ）后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同打算过程①需要供应9552

的混合气体过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理过程③将激活后的重组细胞培育至原肠胚后移植【答案】B【分析】分析图解：图示过程为体细胞克隆过程，取乙牛体细胞，对处于减数其次次分裂中期的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的细胞激活后培育到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。【详解】A传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同打算AB动物细胞培育中需要供应 95空（保证细胞的有氧呼吸）和5

（维持培育液的pH）的混合气体，B正确；2C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理， C错误；D、过程③将激活后的重组细胞培育至囊胚或桑椹胚后移植，D错误。故选B。9.（2023·6）CRISPR/Cas9基因编辑技术可将增加型绿色荧光蛋白（EGFP）基因定点插入到受精卵的染色体上，获得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小是（）胎需用不同成分的培育液基因编辑处理的受精卵经体外培育至 2细胞期，须将其入同期发情小鼠的子官，才可获得表达 EGFP的小鼠分别能表达EGFP大量的转基因小鼠通过观看早期胚胎的荧光，能表达 EGFP的即为雄性小鼠胚胎【答案】B【分析分析题意可知，通过基因编辑技术将 EGFP基因定插入到受精卵的Y染色体上，使含有该 Y染色体的小鼠能够发出绿色荧光，转基因鼠将 Y染色体传递给子代的雄性个体，通过观看荧光可确定早期胚胎的性别。A受精卵在体外培育时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培育AB段，进行胚胎移植，可获得表达EGFPBC、分别能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植、早期胚胎培育、胚胎移植等技术，可获得大量的转基因小鼠，C正确；DYEGFPYD故选B。10.(2023 山东高考 15)一个抗原往往有多个不同的抗原打算簇，一个抗原打算簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗 p72的单抗也可以从该小鼠的血清中直接分别出多抗。下列说法正确的是（ 度的影响大单抗制备过程中通常将分别出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合利用该小鼠只能制备出一种抗 p72的单抗p72 部分结构转变后会消灭原单抗失效而多抗仍有效的状况【答案】D【解析】依据题干信息“一个抗原往往有多个不同的抗原打算簇，一个抗打算簇只能刺激机体产生一种抗体”，非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72上有多个抗原打算簇，所以可以刺激机体产生种抗体。每个抗原打算簇刺激产生的抗体是单抗。单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小， A误；单抗制备过程中通常将分别出的 B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，B错误；非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72上有多种抗原打算簇，一个抗打算簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入 p72后可以刺激小鼠产生多种抗 p72的单抗，C错误；p72部分结构转变只转变了部分抗原打算簇，因此由这部分抗原打算簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原打算簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D正确。11.（2023北京生物高考题）11.人体感染新冠病毒后，机体会产生多种特异性抗体。我国科学家从康复者的浆细胞中克隆出针对病毒表面抗原的抗体基因相关序列，构建表达载体并在相应系统中表达，可制备出全人源单克隆抗体。以下表述错误的是（ ）该单抗可直接用于新冠病毒的核酸检测在该单抗制备过程中利用了基因工程技术该单抗可与新冠病毒相应蛋白特异性结合可用抗原-抗体反应检测抗体基因表达产物【答案】A【分析】（从基因文库中猎取、PCR），表达载体的构建（启动子+目的基因+标记基因+终止子），将目的基因导入受体细胞（植物细胞用农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法，动物细胞用显微注）（导入检测用DNA病毒进入人体一段时间后，才会刺激人体产生Ig（免疫球蛋白MIgG（免疫球蛋白G），检测抗体间接证明已感染新冠病毒。【详解】A、由分析可知，该单抗不能直接用于新冠病毒的核酸检测，A错误；B、由题“针对病毒表面抗原的抗体基因相关序列，构建表载体并在相应系统中表达，制备出全人源单克隆抗体”可知，在该单抗制备过程中利用了基因工程技术， B正确；C、针对新冠病毒表面抗原制备出的单抗，可与新冠病毒相应蛋白特异性结合，C正确；D抗体基因表达产物检测的方法是接受抗原——抗体杂交应，若呈阳性，则说明已翻译出相应的蛋白质， D正确。故选A。12.（2023北京生物高考题）13.为培育具有市场竞争力的无籽柑橘争辩者设计如下流程。相关叙述不正确的是（ 过程①需使用胰蛋白酶处理实现过程②依靠膜的流淌性过程③需应用植物组培技术三倍体植株可产生无籽柑橘【答案】A【分析】分析图示可知，①过程为原生质体的制备过程，需要纤维素酶和果胶酶，②过程为原生质体的融合过程，需要诱导剂诱导融合，③过程为植物组织培育的过程。【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理，A错误；BBC、过程③需应用植物组培技术将杂种细胞培育形成个体，正确；D、三倍体植株含有三个染色体组，减数分裂时联会紊乱，可产生无籽柑橘，D正确。故选A。【2023年浙江1月高考卷，17】下列关于利用胚胎工培育优质奶牛的叙述，正确的是 ( )A.从雄性奶牛中采集到的成熟精子遇到卵子即可进入卵子内B.在体外完成受精后的受精卵，将其植入子宫即可完成着床C.随着卵裂的进行，卵裂球细胞的体积变小，卵裂球的体积和有机物总量显著增加D.在含有经辐射处理的胚胎成纤维细胞的培育体系中，胚胎干细胞不易发生分化答案：D解析：从雄性奶牛中采集到的成熟精子要经获能处理后才能进入卵子内，A错误；在体外完成受精后的受精卵，需培育至早期胚胎（如早期囊胚）才能将其植入子宫完成着床， B错误；着卵裂的进行卵裂球细胞的体积变小，卵裂球的体积不会增加，有机物总量削减，C错误；胚胎成纤维细胞可分泌一些能抑制细胞分化的物质，在含有经辐射处理的胚胎成纤维细胞的培育体系中，胚胎干细胞不易发生分化， D正确。【202313致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种缘由断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将一般小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示下列说法错误的是( )A.过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞BCD.耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段答案：C解析：由图可知，①为去除植物细胞的细胞壁，获得原生质体的过程，该过程需用纤维素酶和果胶酶处理细胞， A正确；题干可知，两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出，若其中一个细胞的染色体在融合前发生断裂，则形成的染色体片段在细胞融合后有的可能会存留在杂种细胞中，故为了使普通小麦获得中间偃麦草的耐盐性状，需要将中间偃麦草细胞中的染色体断裂，过程②用不同剂量的紫外线照射的目的是断裂中间偃麦草的染色体，B正确；图中过程③为两种原生质体的融合，常用的融合手段为物理法和化学法，灭活的病毒通常用来融合动物细胞，C错误；一般小麦不具有耐盐性状，因此筛选出的耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段， D正确。【2023年山东卷，14】经遗传改造的小鼠胚胎干细胞入囊胚，通过胚胎工程的相关技术可以获得具有不同遗传特性的试验小鼠。下列说法错误的是( )A.用促性腺激素处理雌鼠可以获得更多的卵子B.体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理C.胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段移植D.遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得答案：C解析：为获得更多卵子，需要用促性腺激素对雌性个体进行超数排卵处理，A正确；刚排出的精子不能与卵子受精，必需进行获能处理后才具备受精力量， B正确；胚胎移植前要检查胚质量，牛、羊等一般要培育到桑椹胚或囊胚阶段才进行移植，小鼠等可在更早的阶段移植，C错误；可通过转基因等技术获得遗传改造的小鼠胚胎干细胞，D正确。【2023年天津卷，1】在克隆哺乳动物过程中，通常作核移植受体细胞的是去核的( )A.卵原细胞B.初级卵母细C.次级卵母细胞 D.卵细胞答案：C解析：克隆哺乳动物时，一般将动物的一个体细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。通常作为核移植受细胞的是去核的次级卵母细胞， C正确。【2023年江苏卷，23】（不定项）小鼠胚胎干细胞经向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如下图所示。下列叙述错误的是( )为获得更多的囊胚，接受激素注射促进雄鼠产生更多的精子ab同用胰蛋白酶将细胞a细胞胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在 CO培育箱中进行2培育答案：ABC解析：限制获得更多早期胚胎的最大的问题是没有足够的卵母细胞，所以应当通过注射促性腺激素促进雌鼠超数排卵， A误；细胞a和细胞b是由同一个受精卵分裂分化形成的，所以两细胞的核基因应当是相同的，由于基因的选择性表达，囊胚期细bB胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织一段时间，消化了细胞间的蛋白质，从而获得分散的胚胎干细胞， C错误；动物细胞培育所需气体主要有氧气和二氧化碳，一般将动物细胞置于含95二氧化碳的混合气体的培育箱中进行培育，D18．（2023·湖南高考真题）M基因编码的MA的肝细胞中特异性表达。现设计试验，将外源DNA片段F插入MM基因失活的转基因克隆动物 流程如图所示。回答下列问题：在构建含有片段 F的重组质粒过程中，切割质粒 的工具酶是 这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的 断开。在无菌无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的代和传代培育时，需要定期更换培育液，目的是 。与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低缘由是 从早期胚胎中分别获得的胚胎干细胞，在形态上表现为 （答出两点即可），功能上具 。鉴定转基因动物：以免疫小鼠的 淋巴细胞骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的试验思路 。【答案】（1）限制性核酸内切酶（限制酶）磷酸二酯键危害动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对简洁，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性格外困难 细胞体积小细胞核大，核仁明显（任选两点作答） 发育的全能性（4）B用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B巴细胞与骨髓瘤细胞融合，看筛选出杂交瘤细胞能否产生MMA【分析】1、基因工程技术的基本步骤：目的基因的猎取：方法有从基因文库中猎取、利用 技术扩增和人工合成；达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；将目的基因导入受体细胞：依据受体细胞不同，导入的基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的 DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术②检测目的基因是否转录出了 mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术个体水平上的鉴定抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。2、核移植：原理：动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植【详解】基因工程中切割DNA（限制酶），故在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒的工具酶是限制性核酸内切酶（限制酶）。限制性内切核酸内切酶是作用于其所识别序列中两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。在无菌无毒等适宜环境中进行动物 A成纤维细胞的代和传代培育时，需要定期更换培育液，目的是清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率低。胚胎干细胞在形态上表现为细胞体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上具有先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应， 之后从小鼠脾脏中猎取已经免疫的 B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培育基筛选出杂交瘤细胞，制备 M蛋白的单克隆抗体；若要利用此抗体确定克隆动物 A中M基因是否失活，假如 基因已经失活，则克隆动物 A中无法产生M蛋白的单克隆抗体，则可利用抗原—抗体杂交技术进行检测。用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，看筛选出杂交瘤细胞能否产生M蛋白的单克隆抗体，假如不能产生，说明 M因在克隆动物A中已失活。【点睛】本题结合图示考查基因工程、核移植、胚胎移植、单克隆抗体的相关学问，涉及学问点较多，但难度不大，要求考生把握基础学问，属于考纲中识记与理解层次。19.（2023·6浙江月选考）（15分）回答下列（二）小题：（二）斑马鱼是一种模式动物，体外受精发育，胚胎透亮     、便于观看，可用于水质监测，基因功能分析以及药物毒性与安全性评价等。由于人类活动产生的生活污水日益增多，大量未经处的污水直接排入河流、湖泊会引起水体 ，导致藻类大量繁殖形成水华。取水样喂养斑马鱼，可用斑马鱼每周的体重和死亡率等指标监测水体污染程度。为了争辩某基因在斑马鱼血管发育过程中的分子调控机制用DNA连接酶将该基因连接到质粒载体形成 导入到大肠杆菌菌株 DH5α中为了能够连接上该目的基因、并有利于获得含该目的基因的 DH5α阳性细胞克降质粒载体应含有（答出2点即可）。提取质粒后，接受 法，将该基因导入到斑马鱼受精卵细胞中，培育并观看转基因斑马鱼胚胎血管的发育状况。（3） 分散斑马伍囊胚的内细胞团，取分散细胞作为初始材料进行

，以提高斑马鱼胚胎细胞克隆的形成率。答案：（二）（1）富养分化重组DNA分子 限制性核酸内切酶的识别序列、抗素抗性基因 显微注射胰蛋白酶 原代 饲养层细胞【解析】【分析】2、基因工程的基本操作步骤为：猎取目的基因、形成重组DNA分子、将重组DNA分子导入受体细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达。【详解】（二）生活污水富含 N、P，未经处理就大量排放，会导致体富养分化，导致藻类大量繁殖形成水华或赤潮。具有相同粘性末端的目的基因和载体 DNA（如质粒经DNA连接酶处理后，会形成重组 DNA分子。与目的基因相同的限制性核酸内切酶识别序列，可以确保限制性内切酶处理后与目的基因形成相同的粘性末端，以便于和目的基因的连接。标记基因（抗生素抗性基因）的存在，便于筛选含有目的基因的受体细胞。动物基因工程，通常接受显微注射法将重组 DNA分子导入物受精卵中。可分解细胞间质的蛋白质，让细胞分散，便于培育。将分散的细胞初次在卡氏瓶中培育，称之为原代培育。提高细胞克隆形成率的措施有：选择适宜的培育基、添加血清（胎牛血清最好）、饲养层细胞（滋养细胞如经射线照射本身失去增殖力的小鼠成纤维细胞）支持生长、激素（胰岛素等）刺激、使用 CO培育箱、调2节pH等。20．（2023·1）回答下列（二）小题：（二）三叶青为蔓生的藤本植物，以根入药。由于野生三叶目前我国野生三叶青已格外珍稀。为爱护三叶青的 多样性和保证药材的品质，科技工作者依据生态工程原理，利用 技术，实现了三叶青的林下种植。依据基因工程原理，利用发根农杆菌侵染三叶青带伤口的叶片，叶片产生酚类化合物，诱导发根农杆菌质粒上 vir 系基因表达形成 和限制性核酸内切酶等，进而从质粒上复制并切割出一段可转移的 DNA片段（T-DNA）T-DNA进入叶片细胞并整合到染色体上，T-DNA上rol系列基因表达，产生相应的植物激素，促使叶片细胞持续不断地分裂形成 ，再分形成毛状根。剪取毛状根，转入含头孢类抗生素的固体培育基上进行多次 培育培育基中添加抗生素的主要目的是 最终取毛状根转入液体培育基、置于摇床上进行悬浮培育，通过把握摇床的 和温度，调整培育基成分中的 ，得大量毛状根，用于提取药用成分。【答案】（二）（1）遗传 间种DNA聚合酶 愈伤组织继代 杀灭发根农杆菌 转速 养分元以及生长调整剂的种类和浓度【解析】（二）（1）性和生态系统多样性，为爱护三叶青的遗传多样性和保证药材的品质；三叶青的林下种植，是利用间种技术。）分析题意可知，从质粒上复制并切割出一段可转移的DNA片段（T-DNA），DNA复制需要DNA聚合酶，故可知，酚类化合物诱导发根农杆菌质粒上 vir系列基因表达，形成 DNA聚合和限制性核酸内切酶等。依据植物组织培育技术过程可知，相应植物激素可以促使叶片细胞脱分