普通生物学实验课件植物部分

普通生物学实验EMAIL:glayertop2@163.comTEL物学部分王建芳Contents1.植物的徒手切片和植物各类组织的观察2.植物叶脉标本的制作3.叶绿体色素的提取、分离及含量测定4.植物种子活力的快速测定实验一植物徒手切片和植物各类组织观察一、植物徒手切片法实验目的

徒手切片的方法是我们从事教学、科研及生产技术工作中常用的最简便的观察植物内部构造的方法，这种方法不需要复杂的设备，又能随时迅速地观察植物的生活细胞及各器官内部组织的生活状况和天然的色彩，所以有很大的实用价值。实验一植物徒手切片和植物各类组织观察一、植物徒手切片材料与工具芹菜叶柄（长度2~3厘米）、刀片药品和试剂染色剂实验一植物徒手切片和植物各类组织观察一、植物徒手切片方法和步骤（1）切片前，在小培养皿中盛以清水，准备好滴管和刀片等用具和欲切的材料（芹菜叶柄）。（2）切片时用左手的三个指头拿住材料，并使其稍突出手指之上。右手持刀片，平放在左手的食指之上，刀口向内，且与材料断面平行，然后以均匀的动作，自左前方向右后方滑行切片，注意要用整个手臂向后拉（手腕不必用力）。切下薄片后，将薄片轻轻移入已盛水的培养皿中备用。（3）挑选最薄而透明的切片，取出放在载玻片上，制成临时装片观察，也可制成永久性的玻片标本。实验一植物徒手切片和植物各类组织观察一、植物徒手切片实验注意事项（1）选择材料时不易太硬也不要太软。（2）切片时动作要敏捷，材料要一次切下。（3）整个切片过程中应用清水湿润材料和刀面，使之滑润，否则材料容易破损。实验一植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织的观察实验介绍种子植物的组织结构按照其发育特点，可分为两大类，即分生组织和成熟组织。分生组织细胞在植物的一生中始终具有分裂能力，一方面增加新细胞到植物体中，另一方面使自己永存下去。成熟组织是由分生组织分裂的一些细胞在后来的生长发育过程中陆续分化而失去分裂能力，所形成的有特定功能的细胞。按成熟组织的功能又可以分成营养组织、保护组织、输导组织、机械组织和分泌组织。在不同种植物、植物体不同的器官和植物发育的不同阶段，组织结构有所不同。实验一植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织的观察实验介绍分生组织：植物根尖顶端有一帽状的根冠，其内圆锥状的部分染色深，细胞小，细胞核相对较大，细胞质较厚，没有明显的液泡，无分化，为原分生组织。原分生组织上方略有分化的组织，为初生分生组织，其表面是原表皮，表皮以内染色较淡的是基本分生组织，中央染色较深的部位为原形成层。实验一植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织的观察实验介绍

保护组织：是覆盖在植物体表面起保护作用的组织，由一层或数层细胞构成，其功能主要是避免水分过度散失，调节植物与环境的气体交换，抵御外界风雨和病虫害的侵袭，防止机械的或化学的损伤。根据其来源和形态的不同，保护组织又分为表皮（初生保护组织）和周皮（次生保护组织）。保护组织细胞排列整齐，具有保护内部柔嫩部分的功能。实验一植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织的观察实验介绍

输导组织：是植物体中担负物质长途运输的主要组织，是植物体中最复杂的系统。根从土壤中吸收的水分和无机盐，由输导组织运送到地上部分。叶的光合作用的产物，由输导组织运送到根、茎、花、果实中去。植物体各部分之间经常进行的物质的重新分配和转移，也要通过输导组织来进行。输导组织分为二类，一类为木质部，主要运输水分和溶解于其中的无机盐；另一类为韧皮部，主要运输有机营养物质。输导组织细胞的特点是细胞长形，常上下相连，形成适于输导的管道。木质部有导管，韧皮部有筛管和伴胞。

实验一植植物徒手切片片和植物各类类组织观察二、植物各类类组织的观察察实验介绍输导组织植物茎的结构木栓形成层双子叶植物茎的结构实验一植植物徒手切片片和植物各类类组织观察二、植物各类类组织的观察察实验介绍输导组织小麦茎的结构实验一植植物徒手切片片和植物各类类组织观察二、植物各类类组织的观察察实验介绍厚角组织：厚角组织是植植物机械组织的一类,厚角组织细胞胞最明显的特特征是细胞壁壁具有不均匀匀的增厚，壁壁的增厚通常常在几个细胞胞邻接处的角角隔上特别明明显，故称厚厚角组织。厚厚角组织分布布于茎、叶柄柄、叶片、花花柄等部分，，根中一般不不存在。厚角角组织的分布布具有一个明明显的特征，，即一般总是是分布于器官官的外围，或或直接在表皮皮下，或与表表皮只隔开几几层薄壁细胞胞。在茎和叶叶柄中厚角组组织往往成连连续的圆筒或或分离成束，，常在具脊状状突起的茎和和叶柄中棱的的部分特别发发达，例如在在薄荷的方茎茎中，南瓜、、芹菜具棱的的茎和叶柄中中。细胞为长长柱形，相互互重叠排列。。实验一植植物徒手切片片和植物各类类组织观察二、植物各类类组织的观察察实验介绍分泌组织：分泌组织是由由具有分泌作作用能分泌挥挥发油、树脂脂、蜜汁、乳乳汁等的细胞胞所组成。根根据分泌组织织分布在植物物的体表或植植物的休内，，可分为外部部分泌组织和和内部分泌组组织两大类。。

（一））外部分泌泌组织：位于于植物的体表表，其分泌物物直接排出于于体外，其中中有腺毛和蜜腺（二）内部分分泌组织：存存在于植物体体内，其分泌泌物贮在细胞胞内或细胞间间隙中。按其其组成，形状状和分泌物的的不同，可分分为：1．分泌细胞胞；2．分泌腔；；3．分泌道；；4．乳汁管。实验一植植物徒手切片片和植物各类类组织观察二、植物各类类组织的观察察实验目的能说出植物的的分生组织、、薄壁组织、、保护组织、、输导组织和和机械组织的的基本形态结结构特点，并并能从植物器器官中辨认各各种植物组织织。器材和试剂1.植物材料玉米根尖纵切切永久制片、、南瓜茎纵切切永久制片、、大叶黄杨叶叶、芹菜叶柄柄、柑橘果实实。2.实验器材显微镜、剪刀刀、镊子、刀刀片、载玻片片、盖玻片、、滴管、培养皿。实验一植植物徒手切片片和植物各类类组织观察实验步骤1.分生组织的观观察（1）取玉米根尖尖纵切永久制制片，先在低低倍镜下观察察，再用高倍倍镜。（2）注意观察：：初生分生组织织的细胞形态态特点，有无无正在分裂的的细胞；如果果观察到了正正在分裂的细细胞，注意观观察其分裂的的方向；初生生分生组织的的细胞之间有有无细胞间隙隙？（3）细胞特点：：细胞小，细胞胞核较大，没没有大液泡，，细胞呈正方方形，排列整整齐紧密。因因为正在分裂裂，细胞质密密度大，活动动旺盛，细胞胞壁薄。实验一植植物徒手切片片和植物各类类组织观察实验步骤2.保护组织的观观察（1）撕取大叶黄黄杨叶表皮制制成临时装片片，观察其表表皮细胞、气气孔器的形态态结构。（2）注意观察：：细胞间的排列列、细胞间有有无间隙。（3）细胞特点：：外有细胞壁，，内有大液泡泡；细胞之中中可观察到绿绿色颗粒状物物（叶绿体).另外，还可能能观察到唇状状的叶孔保护护细胞实验一植植物徒手切片片和植物各类类组织观察实验步骤3.输导组织的观观察（1）观察南瓜茎茎的纵切永久久制片，找出出木质部中的的导管、韧皮皮部中的筛管管和半胞，（2）注意观察：：筛板和长形成成群分布的一一类细胞，此此为木纤维。。（3）细胞特点：：细胞长形，常常上下相连，，形成适于输输导的管道。。实验一植植物徒手切片片和植物各类类组织观察实验步骤4.厚角组织的观观察（1）将芹菜叶柄柄制成的临时时装片置于显显微镜下，观观察叶柄的棱棱角处，在表表皮和维管束束之间有一团团厚角组织，，细胞壁较厚厚，并有光泽泽。（2）细胞特特点：细胞稍长长，具有有明显加加厚的初初生壁，，其加厚厚的部分分多在细细胞相互互毗连的的角隅处处，有的的植物细细胞壁加加厚在切切向壁或或近胞间间隙的部部位。实验一植植物物徒手切切片和植植物各类类组织观观察实验步骤骤5.分泌组织织（1）取柑橘橘外果皮皮，观察察其上透透明的小小囊，挤挤压果皮皮，观察察小囊中中有什么么物质溢溢出？将将果皮制制成切片片，在显显微镜下下观察，，小囊为为一空腔腔，其中中有什么么物质？？（2）细胞特特点：是由细胞胞分化来来的特化化细胞。。这种细细胞的体体积一般般较相邻邻细胞大大，形状状各异，，它们常常呈单个个细胞分分散在植植物体内内其他较较不特化化的细胞胞间，在在各类器器官中存存在。实验一植植物物徒手切切片和植植物各类类组织观观察三、思考考题1.初生分生生组织、、保护组组织的细细胞之间间有无细细胞间隙隙？2.木质部和和韧皮部部在输送送过程中中的作用用有什么么区别？？筛管和和导管的的细胞是是死细胞胞还是活活细胞？？3.厚角组织织的细胞胞是死细细胞还是是活细胞胞？实验一植植物物徒手切切片和植植物各类类组织观观察作业1.完成实验验报告ThankYou!实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定一、植物物组织的的水势测测定水势表示示水的化化学势，，水分在在渗透系系统中总总是由水势高处处向水势势低处流流动。植植物生活活细胞是是一个渗渗透系统统，当将将植物细细胞或组组织放入入外界溶溶液中时时，水分分将以水水势差为为动力在在两者间间流动，，最终达达到动态态平衡。。如果植植物组织织的水势势小于外外界溶液液的水势势，植物物细胞吸吸水，使使外界溶溶液浓度度增大；；反之，，植物细细胞失水水，使外外液浓度度变小。。若植物物组织与与外界溶溶液水势势相同，，将不改改变外部部溶液的的浓度，，此时外外液的渗渗透势就就等于植植物组织织的水势势。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定一、植物物组织的的水势测测定实验原理理利用外界界溶液的的浓度不不同其比比重也不不同的原原理来确确定与植植物组织织水势相相同的外外液，根根据公式式计算植植物组织织的水势势。实验方法法小液流法法实验目的的掌握植物物组织水水势的测测定方法法，并了了解渗透透系统中中水势大大小是水水分移动动方向的的决定因因素。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定一、植物物组织的的水势测测定实验器材材吸水纸、、容量管管（或10ml量筒）、、试管、、带盖小小瓶、胶胶头细玻玻璃弯管管、移液液管、剪剪刀、橡橡皮塞、、试管架架、温度度计、镊镊子。试剂与材材料植物叶片片（大叶叶黄杨叶叶）、1mol/L蔗糖溶液液、染色色试剂。。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定一、植物物组织的的水势测测定实验步骤骤1.外界溶液液的配制制与渗透透作用①配制0.1~0.8mol/L8个梯度的的蔗糖溶溶液各10ml，注入8只试管中中，并分分别加上上塞子后后编号，，作为对对照组。。②将8只带盖小小瓶编号号，分别别从对照照组中相相同编号号的试管管中取蔗蔗糖溶液液4ml注入各瓶瓶，加上上塞子作作为实验验组。③用剪刀刀将植物物叶片剪剪成大小小相同（（约0.5cm2）的小块块，每瓶瓶中投入入40小块（约约占1/4溶液体积积），塞塞好塞子子，放置置30min。在此期期间摇动动小瓶数数次。④用针尖尖挑取少少许染色色剂加入入上述带带盖小瓶瓶中，摇摇匀，此此时溶液液为浅蓝蓝色。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定一、植物物组织的的水势测测定实验步骤骤2.等渗溶液液确定①用胶头头细玻璃璃弯管从从各带盖盖小瓶中中依次吸吸取少量量的浅蓝蓝色溶液液，并用用吸水纸纸吸掉管管外壁上上的溶液液，然后后将弯管管伸入相相同的编编号的对对照组试试管液体体中部，，缓慢放放出溶液液一滴，，观察有有色液滴滴的移动动方向。。②若有色色液滴向向上移动动，表明明组织失失水，使使蔗糖溶溶液浓度度降低、、比重减减小；若若有色液液滴向下下移动，，表明组组织吸水水，使蔗蔗糖溶液液浓度升升高、比比重增大大；如果果有色液液滴静止止不动，，则表明明蔗糖溶溶液与植植物组织织水势相相等，记记录该蔗蔗糖溶液液的浓度度。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定一、植物物组织的的水势测测定实验步骤骤3.结果计算算依据上述述蔗糖溶溶液的浓浓度，根根据公式式计算植植物组织织的水势势。计算公式式：ψw=-iRTc式中ψw为植物组组织水势势，以bar表示；i为解离系系数，蔗蔗糖是1；R为气体常常数，0.083L··bar/mol·K；T为绝对温温度，K（即273℃+t，t为实验室室温度））；c为等渗溶溶液浓度度，mol/L。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定一、植物物组织的的水势测测定思考1.小液流法法测定植植物组织织水势时时,为什么操操作时,应强调所所用试管管、毛细细管应保保持干燥燥?2.剪取植物物叶片，，并投入入试管中中时动作作为什么么要迅速速？3.加入甲烯烯蓝不应应太多？？实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定二、植物物组织渗渗透势的的测定实验原理理当植物组组织细胞胞内的汁汁液与其其周围的的某种溶溶液处于于渗透平平衡状态态，植物物细胞内内的压力力势为零零时，细细胞汁液液的渗透透势就等等于该溶溶液的渗渗透势。。这种渗渗透势相相等的溶溶液称为为等渗溶溶液。该该溶液的的浓度称称为等渗渗浓度。。当一系列列梯度浓浓度溶液液观察细细胞质壁壁分离现现象时，，细胞的的等渗浓浓度介于于刚刚引引起初始始质壁分分离的最最低浓度度和尚不不能引起起质壁分分离的最最高浓度度之间的的溶液浓浓度。代代入公式式即可计计算其渗渗透势。。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定二、植物物组织渗渗透势的的测定试验方法法质壁分离离法实验目的的观察植物物组织在在不同浓浓度溶液液中细胞胞质壁分分离的产产生过程程，了解解其用于于测定植植物组织织渗透势势的原理理与方法法。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定二、植物物组织渗渗透势的的测定实验器材材显微镜、、载玻片片、盖玻玻片、镊镊子、解解剖针、、刀片、、酒精灯灯、滤纸纸、滴管管、移液液管、小小培养皿皿。材料与试试剂洋葱鳞片片、1mol/L蔗糖溶液液。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定二、植物物组织渗渗透势的的测定方法步骤骤1.配制0.1~0.8mol/L浓度的8个梯度的的蔗糖溶溶液各10ml，分别盛盛于小培培养皿中中，并加加上盖子子。2.从部位相相近的鳞鳞片上斯斯取大小小相近（（约几个个平方毫毫米）的的内表皮皮，从浓浓度高的的蔗糖溶溶液开始始，依次次每隔3min投放3片内表皮皮到一种种浓度的的溶液中中（以便便有充足足的时间间观察，，并使组组织在不不同的溶溶液中处处理时间间一致）），并使使之完全全浸没，，室温下下放置30min。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定二、植物物组织渗渗透势的的测定方法步骤骤3.按浓度由由高到低低依次取取出处理理过的表表皮，放放在有1~2滴相应浓浓度蔗糖糖溶液的的载玻片片上，盖盖上盖玻玻片，在在显微镜镜下观察察质壁分分离的情情况（每每次镜检检约100个细胞）），并记记录不同同浓度溶溶液处理理下质壁壁分离的的程度。。4.依据不同同溶液中中植物细细胞质壁壁分离的的程度，，确定一一个引起起50%的细胞角角隅上出出现质壁壁分离（（作为初初始质壁壁分离））的溶液液浓度，，或确定定引起细细胞质壁壁分离最最低浓度度和不引引起质壁壁分离最最高浓度度的平均均值，作作为等渗渗浓度。。用新的的溶液和和植物材材料进行行重复试试验过程程，以确确保结果果的准确确性。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定二、植物物组织渗渗透势的的测定结果计算算依据所确确定的等等渗浓度度，根据据下式计计算该植植物组织织的平均均渗透势势。计算公式式ψs=-iRTc式中ψs为平均渗渗透势，，以bar表示；i为解离系系数，蔗蔗糖是1；R为气体常常数，0.083L··bar/mol·K；T为绝对温温度，K（即273℃+t，t为实验室室温度））；c为等渗溶溶液浓度度，mol/L。实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定二、植物物组织渗渗透势的的测定思考题1.如何提高高质壁分分离法测测定植物物组织渗渗透势试试验的准准确性？？2.不同浓度度的NaCl可否用于于测定植植物组织织的渗透透势？实验二植植物物组织的的水势和和渗透势势的测定定作业完成试验验报告实验三叶叶绿体色色素的提提取、分分离及含含量测定定一、叶绿绿体色素素的提取取、分离离实验原理理植物色素素包含脂脂溶性的的叶绿体体色素和和水溶性性的细胞胞液色素素。叶绿绿体色素素是植物物进行光光合作用用吸收光光能的重重要物质质基础。。叶绿体体色素主主要包括括叶绿素素a、叶绿素b、叶黄素和和胡萝卜素素，它们与与类囊体膜膜蛋白结合合成色素蛋蛋白复合体体而存在。。根据叶绿体体色素的脂脂溶性特性性，常用乙乙醇、丙酮酮等有机溶溶剂离析而而从植物材材料将其提提取。叶绿绿体色素是是由化学结结构和相对对分子质量量不同的多多种成分组组成，依据据它们在有有机溶剂中中的溶解性性和在吸附附剂上的吸吸附性差异异，可分离离出它们的的各组分。实验三三叶叶绿体体色素素的提提取、、分离离及含含量测测定一、叶叶绿体体色素素的提提取、、分离离实验目目的以植物物叶片片组织织为材材料，，提取取叶绿绿体色色素；；以纸纸层析析法分分离其其成分分。实验器器材天平、、剪刀刀、研研钵、、离心心机、、玻璃璃棒、、量筒筒、烧烧杯、、滤纸纸、小小烧杯杯。材料与与试剂剂植物叶叶片、、丙酮酮、碳碳酸钙钙粉、、石英英砂、、层析析液[按石油油醚：：丙酮酮（25：3）比例例配置置（V/V）]。实验三三叶叶绿体体色素素的提提取、、分离离及含含量测测定一、叶叶绿体体色素素的提提取、、分离离实验步步骤1.叶绿体体色素素的提提取①称取取新鲜鲜的植植物叶叶片2g，洗净净，擦擦干，，去中中脉，，剪碎碎后放放入研研钵中中。②加入入少许许石英英砂和和CaCO3，再加加入无无水丙丙酮10ml，研磨磨成匀匀浆，，再加加丙酮酮15ml，摇匀匀。③离心心，取取上清清液，，即可可得到到叶绿绿体色色素提提取液液（保保存于于暗处处备用用）。。实验三三叶叶绿体体色素素的提提取、、分离离及含含量测测定一、叶叶绿体体色素素的提提取、、分离离实验步步骤2.叶绿体体色素素的分分离——纸层析析法①层析析样纸纸制备备将优质质滤纸纸剪成成3cm×9cm的长条条，将将一端端剪成成高约约1cm的三角角形。。②点样样用细玻玻璃棒棒蘸取取叶绿绿体色色素提提取液液，于于层析析纸的的三角角形一一端在在三角角形底底边上上划一一条样样线，，风干干后在在原处处重复复点样样几次次。③展层层在在小小烧杯杯中加加入3~5ml层析液液，然然后将将层析析纸已已经点点样的的一端端放入入小烧烧杯里里，注注意层层析液液不可可触及及样线线，并并盖好好盖子子，于于阴暗暗处展展层约约10min，即可可在层层析纸纸上分分辨出出4种不同同的清清楚色色层。。④用铅铅笔在在层析析纸上上指出出4种色层层的轮轮廓，，并注注明色色层的的名称称和颜颜色，，附在在实验验报告告中实验三叶叶绿体色素素的提取、分分离及含量测测定一、叶绿体色色素的提取、、分离思考1.严密提取色素素时加入CaCO3有什么作用？？2.色素扩散速度度与什么有关关？实验三叶叶绿体色素素的提取、分分离及含量测测定二、叶绿体色色素含量的测测定实验原理叶绿体色素溶溶液各组成成成分在可见光光谱中具有不不同的特征吸吸收峰。因此此，应用分光光光度计在某某一特定波长长下所测定的的吸光度，根根据经验公式式即可计算出出色素溶液中中各色素浓度度，不同溶剂剂所提取的色色素吸收光谱谱有差异，因因此，应使用用不同的计算算公式。叶绿体色素的的提取常用丙丙酮和乙醇有有机溶剂。用用80%丙酮提取叶绿绿素a和叶绿素b以及类胡萝卜卜素分别在663nm、646nm和470nm波长下有最大大吸收峰，而而用95%乙醇提取则在在665nm、649nm和470nm波长下具有最最大吸收峰，，据此所测得得的吸光度值值代入不同的的经验公式，，计算出叶绿绿素a和b的浓度，及叶叶绿素总浓度度和类胡萝卜卜素的总浓度度，并依据所所使用的单位位植物组织（（鲜重、干重重、或面积）），计算出色色素的含量。。实验三叶叶绿体色素素的提取、分分离及含量测测定二、叶绿体色色素含量的测测定实验目的掌握分光光度度计法对植物物叶绿体色素素提取液中叶叶绿素a和b的浓度及其叶叶绿素总浓度度和类胡萝卜卜素的总浓度度测定与计算算方法，以及及植物材料中中各种色素含含量的计算方方法。实验器材分光光度计实验三叶叶绿体色素素的提取、分分离及含量测测定二、叶绿体色色素含量的测测定实验步骤1.吸光度的测定定①将色素提取取液重新混匀匀。②以丙酮溶液液做空白对照照，分别在波波长为663、646和470nm下测定提取液液的吸光度值值，即A663、A646和A470。实验三叶叶绿体色素素的提取、分分离及含量测测定二、叶绿体色色素含量的测测定实验步骤2.结果计算①叶绿素浓度度的计算计算公式：Ca=12.21A663-2.81A646Cb=20.13A646-5.03A663CT=Ca+Cb=17.32A646-7.18A663Cx.c=（1000A470-3.27Ca-104Cb）/229式中中，，Ca、Cb和CT、Cx.c分别别为为叶叶绿绿素素a、b浓度度和和叶叶绿绿素素及及类类胡胡萝萝卜卜素素的的总总浓浓度度，，mg．L-1。实验验三三叶叶绿绿体体色色素素的的提提取取、、分分离离及及含含量量测测定定二、、叶叶绿绿体体色色素素含含量量的的测测定定实验验步步骤骤2.结果果计计算算②叶叶绿绿体体色色素素含含量量的的计计算算叶绿绿体体色色素素的的含含量量实验验三三叶叶绿绿体体色色素素的的提提取取、、分分离离及及含含量量测测定定作业业完成成实实验验报报告告实验验四四植植物物种种子子活活力力的的快快速速测测定定植物物种种子子的的活活力力是是指指种种子子萌萌发发出出芽芽的的潜潜能能，，它它决决定定种种子子的的品品质质和和实实用用价价值值大大小小。。测测定定种种子子活活力力的的常常规规方方法法是是测测定定种种子子的的发发芽芽率率。。种种子子发发芽芽率率是是指指在在适适宜宜的的条条件件下下，，规规定定时时间间内内发发芽芽的的种种子子占占供供试试种种子子的的百百分分率率。。常常规规发发芽芽率率的的测测定定所所需需时时间间长长，，限限制制了了在在实实际际生生产产实实践践中中的的应应用用。。实验验四四植植物物种种子子活活力力的的快快速速测测定定试验验方方法法TTC法（（氯氯化化三三苯苯基基四四氮氮唑唑法法））BTB法（（溴溴麝麝香香草草酚酚蓝蓝法法））红墨墨水水染染色色法法实验验四四植植物物种种子子活活力力的的快快速速测测定定TTC法是是利利用用具具有有活活力力的的种种子子呼呼吸吸时时所所产产生生的的NADH2和NADPH2与渗渗入入胚胚细细胞胞内内的的TTC反应应，，将将无无色色TTC还原原成成红红色色的的三三苯苯基基甲甲腙腙（（TTF），，从从而而使使种种胚胚着着色色（（无无生生活活力力的的种种子子浸浸泡泡TTC时种种胚胚不不着着色色）），，以以鉴鉴别别种种子子活活力力的的方方法法。。BTB法是是利利用用具具有有活活力力的的种种子子呼呼吸吸时时所所释释放放的的CO2溶于于水水后后所所解解离离成成的的H+和HCO3-，使使活活细细胞胞周周围围的的酸酸度度增增加加，，导导致致蓝蓝色色的的BTB转变变为为黄黄色色（（死死种种子子不不能能使使BTB变色色）），，以以鉴鉴别别种种子子活活力力的的方方法法。。红墨墨水水染染色色法法是是依依据据活活种种子子的的胚胚细细胞胞具具有有物物质质选选择择性性吸吸收收，，用用红红墨墨水水浸浸泡泡活活种种子子其其胚胚不不被被染染色色（（而而死死种种子子胚胚细细胞胞膜膜丧丧失失半半透透性性其其胚胚可可被被染染色色）），，来来鉴鉴别别种种子子活活力力的的方方法法。。实验验四四植植物物种种子子活活力力的的快快速速测测定定实验验目目的的掌握握植植物物种种子子活活力力测测定定的的基基本本原原理理，，及及几几种种快快速速测测定定种种子子活活力力的的方方法法。。实验验器器材材烧杯杯、、培培养养皿皿、、刀刀片片、、镊镊子子、、恒恒温温箱箱、、电电炉炉、、琼琼脂脂。。材料料与与试试剂剂植物物种种子子0.5%TTC溶液液（（以以少少量量酒酒精精溶溶解解后后再再以以水水定定容容））、、0.1%BTB溶液液（（配配制制后后需需用用滤滤纸纸过过滤滤，，滤滤液液若若为为黄黄色色，，可可滴滴加加数数滴滴氨氨水水使使之之变变为为蓝蓝色色或或蓝蓝绿绿色色，，棕棕色色瓶瓶保保存存备备用用））、、5%红墨墨水水。。实验验四四植植物物种种子子活活力力的的快快速速测测定定实验验步步骤骤氯化化三三苯苯基基四四氮氮唑唑法法（（TTC法））①将将种种子子在在30~35℃℃温水水中中浸浸泡泡6~8h，使使种种子子充充分分吸吸涨涨，，呼呼吸吸加加强强。。②取取吸吸涨涨种种子子100粒，