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浙江省pcr上岗证考试题及答案PCR检测上岗证试题一、选择题(共20题,每题2分)1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是()①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为()A、L

B、L

C、L

D、L3、多重PCR需要的引物对为()A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为()IA、模板B、引物C、dNTP

D、镁离子5、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增()A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高6、PCR技术的发明人是()A、Mullis

B、史蒂文.沙夫C、兰德尔.才木7、PCR产物短期存放可在()保存。A、A'CB、常温C、-80℃等D、高温8、PCR产物长期储存最好置于()A、4℃B、常温C、16℃)、20℃9、PCR的基本反应过程包括()A、变性、退火、延伸B、变性、延伸C、变性、退火10、在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括()A、扩增产物的污染B、天然基因组DNA的污染C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年发明()A、1983

B、1971

C、1987

D、199312、Taq

DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为()A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃13、以下哪种物质在PCR反应中不需要()A、Taq

DNA聚合酶B、dNTPs

C、镁离子D、RNA酶14、PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加()A、n

B、2n

C、2°D、n’15、PCR基因扩增仪最关键的部分是()A、温度控制系统B、荧光检测系统C、软件系统D、热盖16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则()A、各区合并B、注意风向C、因地制宜D、方便工作17、PCR实验室一般包括()A、试剂准备区B、标本制备区C、扩增区和产物分析区—D、A、B、C都含18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的()。A、白细胞DNAB、病毒蛋白质C、血浆抗体D、病毒核酸19、如果反应体系中加入模板DNA分子100个,则经过30个循环后,DNA分子的数量将达到()个A、100×30B、100×30×2

C、100×30°D、100×25°20、PCR扩增产物的分析方法主要有()A、凝胶电泳分析法B、点杂交法C、荧光探针定量PCR法D、A、B、C都是参考答案:1.C2.C3.B4.C5.A6.B7.C8.C9.C.

10.C11.C

12.A

13.B

14.C-15.B

16.B

17.A

18.B

19.B20.C湖南省pcr上岗证考试题及答案一、单选题1、负责处方审核的人员应该具备什么资格?(D)A、药学初级职称B、药学中级职称C、药学相关专业本科以上学历D、执业药师2、企业应当按规定的程序和要求对到货药品(A)进行验收。A、逐批B、逐件C、逐箱D、逐盒3、哪个部门负责对购货单位采购人员的合法资格进行审核?(B)A、药店主任B、质量管理部门C、采购部门D、销售柜组4、从事中药饮片质量管理、验收、采购人员应当具有中药学(C)以上学历或者具有中药学专业初级以上专业技术职称。A、专科B、本科C、中专D、研究生5、供货单位为批发企业的,检验报告书应当加盖其(B)原印章。A、药品检验专用章B、质量管理专用章C、企业公章D、药品出库专用章6、中药饮片调剂人员应当具有中药学中专以上学历或者具备(D)资格。A、中药师B、主管中药师C、高级中药鉴别师D、中药调剂员7、药品到货时,收货人员应当核实运输方式是否符合要求,并对照随货同行单(票)和(B)核对药品,做到票、账、货相符。A、购销合同B、采购记录C、质量保证协议D、增值税专用发票精心整理学习帮手word完美格式8、随货同行单(票)应当包括供货单位、生产厂商、药品的通用名称、剂型、规格、批号、数量、收货单位、收货地址、发货日期等内容,并加盖供货单位(D)原印章。A、业务专用章B、财务专用章C、发票专用章D、药品出库专用章9、验收同一批号的药品应当至少检查(A)个最小包装,但生产企业有特殊质量控制要求或者打开最小包装可能影响药品质量的,可不打开最小包装。A、1B、2C、3D、510、企业应当对营业场所温度进行监测和调控,以使营业场所的温度符合(B)要求。A、阴凉B、常温C、高于20℃D、15℃~25℃之间11、企业应当定期以及在质量管理体系关键要素发生重大变化时,组织开展(C)。A、质量管理制度考核B、培训C、内审D、库存盘点12、企业应当采用前瞻或者回顾的方式,对药品流通过程中的(B)进行评估、控制、沟通和审核。A、利润B、质量风险C、质量状况D、储运条件广东省临床基因扩增检验实验室技术人员理论培训班理论考试卷一,填空(每题2分,共20分)1.DNA双螺旋中两条链走向就是反向平行得,即一股链就是5’→3’走向,另一股链为3’→5'走向;生物合成方向就是5’→3’。2.在极端得PH值或受热条件下,核酸分子中得氢键断裂,双螺旋结构解开,即为核酸变性。3.核酸分子得杂交其实就就是DNA变性、复性原理得应用、4.PCR扩增得三个基本阶段就是变性、退火、延伸,引物与模板得结合发生在退火阶段5.反转录酶催化得DNA合成反应按5’→3'方向进行,在DNA合成时也需要引物,引物为病毒颗粒中得mRNA。6.PCR测定中得“假阳性”得最主要得来源就是PCR产物得污染、7.请填出以下各种微量移液器可取溶液得体积范围P100.5—10ulP202—20ulP10020—100ulP20050—200ul如需吸取100ul液体,则最好使用P100加样器。8.在基因扩增检验中,使用得带滤塞吸头吸加液体,只要就是为了防止标本间交叉污染。9.TapMan荧光PCR测定原理中得关键点在于利用了Tap酶得5’→3’得外切酶活性,Ct值指得就是每个反应管内得荧光信号到达设定阈值时所经历得循环数。10.个体化医学得全面定义:分为疾病风险预测(基因检测)与个体化治疗(基因检测)两个方面,基因预测疾病风险就是指根据每个人得疾病基因组信息预测疾病得发生风险、个体化治疗就是指根据每个人得疾病基因组信息对已发生得疾病进行治疗。二,就是非题(正确得后面打√,错误得后面打×,并将错误处划线并改正,每题两分,未改正得1分,共20分)1.DNA双链中,碱基对总就是A-T,C-G配伍,其间以两个氢键相连。(×)G-C间以三个氢键相连2.使用有防“污染”作用得UNG得PCR试剂盒,PCR实验室就不必严格分区。(×)UNG酶只对低浓度得产物污染有效广东省临床基因扩增检验实验室技术人员理论培训班理论考试卷一,填空(每题2分,共20分)1.DNA双螺旋中两条链走向是反向平行的,即一股链是5’→3’走向,另一股链为3’→5’走向;生物合成方向是5’→3’。2.在极端的PH值或受热条件下,核酸分子中的氢键断裂,双螺旋结构解开,即为核酸变性。3.核酸分子的杂交其实就是DNA变性、复性原理的应用。4.PCR扩增的三个基本阶段是变性、退火、延伸,引物与模板的结合发生在退火阶段5.反转录酶催化的DNA合成反应按5’→3’方向进行,在DNA合成时也需要引物,引物为病毒颗粒中的mRNA。6.PCR测定中的“假阳性”的最主要的来源是PCR产物的污染。7.请填出以下各种微量移液器可取溶液的体积范围P10P202-20ulP10020-100ulP20050-200ul如需吸取100ul液体,则最好使用P100加样器。8.在基因扩增检验中,使用的带滤塞吸头吸加液体,只要是为了防止标本间交叉污染。9.TapMan荧光PCR测定原理中的关键点在于利用了Tap酶的5’→3’的外切酶活性,Ct值指的是每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。10.个体化医学的全面定义:分为疾病风险预测(基因检测)和个体化治疗(基因检测)两个方面,基因预测疾病风险是指根据每个人的疾病基因组信息预测疾病的发生风险。个体化治疗是指根据每个人的疾病基因组信息对已发生的疾病进行治疗。二,是非题(正确的后面打√,错误的后面打×,并将错误处划线并改正,每题两分,未改正得1分,共20分)1.DNA双链中,碱基对总是A-T,C-G配伍,其间以两个氢键相连。(×)G-C间以三个氢键相连2.使用有防“污染”作用的UNG的PCR试剂盒,PCR实验室就不必严格分区。(×)UNG酶只对低浓度的产物污染有效3.在全血、骨髓标本的采集时,可使用EDTA、枸缘酸钠或肝素抗凝。(×)不能使用肝素抗凝4.血清HBeAg的存在是HBV感染及感染程度的确证标志。(×)HBeAg是病毒复制的标志5.在PCR试剂盒中所使用的UTP与天然RNA分子中的U没什么区别。(√)6.基因扩增检验实验室“可移动紫外灯”的作用主要是便于实验室台面的消毒杀菌。(√)7.定量PCR与定性PCR测定原理的最主要区别点在于前者的测定点在PCR的指数扩增期,而后者多为扩增平台期。(√)8.加样器只要在其量程范围内,其吸液准确度均相同。(×)不同规格的加样器之间准确度不同9.室内质量控制(IQC)监测和控制的是实验室测定的精密度(重复性),而室间质量评价则通过不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的准确度。(√)10.临床检验中的系统误差通常表现为质控物测定SD的增大。(√)三,选择题(每题2分,共20分)1.在核酸提取时,常需使用氯化钠、醋酸钠等盐溶液,其目的是:(A)A中和核酸的负离子,使其易于沉淀B调节PH值C保证核酸的完整性D无特定目的2.临床上使用核酸扩增方法诊断沙眼衣原体感染,在标本收集上最为关键的是:(B)A标本的采取方式B标本的保存方式C标本的运送方式D标本采取的时间3.之所以要将基因扩增检验实验室的产物分析区设置为负压状态,目的是:(B)A防止生物传染危险物的逸出B防止扩增产物从该区进入上游区域C防止该区灰尘的逸出D无特殊目的4.核酸探针的标志性特征是:(D)A一小段已知序列的单链核酸B一小段未知序列的单链核酸C一小段已知序列的双链核酸D有同位素或非同位素标记物5.核酸提取纯化中,RNase最主要的潜在污染源是:(D)A实验室环境B实验用品如吸头、离心管等C实验人员的手D以上A和B6.PCR方法检测病原微生物所扩增的区段,一般为:(B)A整个病原体基因组B病原体基因组内的保守区域C病原体基因组内的任一区域D以上都不是7.无创产前基因诊断为胎儿做出基因检测,需从孕妇外周血中分离获取及少量的:(B)A孕妇有核红细胞B胎儿有核红细胞C白细胞D以上均可8.临床PCR测定的重复性不好的原因如下,但除外:(B)A试剂盒核酸提取方法对扩增抑制物去除不干净B标准品浓度不准C核酸扩增仪空间温度不均D加样重复性差9.有关于动力学定量PCR方法中对扩增效率的测定,下述哪一条是错误的:(B)A必须在扩增的指数期内测定B可在扩增的任何阶段进行C与扩增产物的测定有关D尽可能多选几个测定点10.临床基因扩增检验的室内质量控制与通常的临床定性免疫测定IQC的最大不同在于:(D)A弱阳性质控血清的设置B强阳性质控血清的设置C阴性质控血清的设置D以上均是四,问答题(40分)1.有一基因扩增检验实验室在检测临床血清标本HCVRNA时,以HCV扩增片段的cDNA为标准品,检测结果除了试剂盒所带的cDNA标准品为阳性外,所有临床标本及弱阳性质控原血清样本、阳性质控样本均为阳性,并且阳性强度都较为接近。显然该次RT-PCR扩增检测存在问题。那么,你能帮助该实验室分析一下可能的检测失败的原因吗并设计一个相应的验证试验证实。(20分)2.今有一传染病医院为监测肝炎病人抗病毒治疗效果,现有一间面积为50平方米的房间,想建立一个临床基因扩增检验实验室开展HBVDNA和HCVRNA检测项目,经向有关专家咨询,专家建议其按卫生部要求将实验室分为三个区(图示如下),选用荧光PCR方法,仪器设备按要求配备,可选用有SDA批准的荧光PCR试剂盒,你认为该专家的实验室设置有无原则性问题,对临床实际检测工作是否方便如否,则请指出可能会有那些不方便要是向你咨询,你会如何建议(请将你设计的实验时设置画出)(20分)不方面,此设计进入样本制备区一定要通过试剂准备区,容易增加污染的风险,且缓冲间的设计也不合理,违背了PCR实验室设计中“各区独立,方便工作”等原则。我的设计如下:PCR培训班考试试题一、选择题(共20题,每题2分)1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是(A)①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为(D)A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物对为(D)A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为(B)A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子5、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增(C)A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高6、PCR技术的发明人是(A)A、MullisB、史蒂文.沙夫C、兰德尔.才木7、PCR产物短期存放可在(A)保存。A、4℃B、常温C、-80℃D、高温8、PCR产物长期储存最好置于(D)。A、4℃B、常温C、16℃D、-20℃9、PCR的基本反应过程包括(A)A、变性、退火、延伸B、变性、延伸C、变性、退火10、在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括(D)A、扩增产物的污染B、天然基因组DNA的污染C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年发明(A)A、1983B、1971C、1987D、199312、TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为(C)A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃13、以下哪种物质在PCR反应中不需要(D)A、TaqDNA聚合酶B、dNTPsC、镁离子D、RNA酶14、PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加(C)A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因扩增仪最关键的部分是(A)A、温度控制系统B、荧光检测系统C、软件系统D、热盖16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则(A)A、各区合并B、注意风向C、因地制宜D、方便工作17、PCR实验室一般包括(D)A、试剂准备区B、标本制备区C、扩增区和产物分析区D、A、B、C都含18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的(D)。A、白细胞DNAB、病毒蛋白质C、血浆抗体D、病毒核酸19、如果反应体系中加入模板DNA分子100个,则经过30个循环后,DNA分子的数量将达到(D)个。A、100×30B、100×30×2C、100×302D、100×23020、PCR扩增产物的分析方法主要有(D)A、凝胶电泳分析法B、点杂交法C、荧光探针定量PCR法D、A、B、C都是二、判断题(共20题,每题2分)1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。(√)2、在PCR反应中,dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作为DNA合成的原料。(√)3、DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋。(√)4、PCR反应中,复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。(√)5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。(√)6、PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等。(√)7、PCR

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