分子生物学-转录课件

第十一章RNA的生物合成

Chapter12

BiosynthesisofRNA特点条件过程真核生物转录相关概念顺式作用元件反式作用因子真核生物转录后加工和修饰转录某段DNA的碱基顺序->RNA的碱基顺序转录transcription产物rRNA，tRNA，mRNA，snRNA和HnRNA细胞中的几乎所有的RNA第一节RNA转录合成的特点

一、不对称性模板链(有义链)templatestrand编码链(反义链)codingstrand默认书写顺序问题：为何多数生物均使用双链DNA若某DNA含X个基因，是否所有基因必须存在于一条链上5’5’模板链编码链5’5’3’3’二、不连续性和单向性不连续人类基因组中90－95%是不转录的方向5'→3'单顺反子只含一个基因的遗传信息多顺反子（常见于原核）含多个基因的遗传信息操纵子调控序列+结构基因（转录区）调控序列

启动子promoter

位于基因上游RNA聚合酶识别、结合启动子研究策略p270RNA-pol保护法原理核酸外切酶水解DNA链启动子结构特征－35区TTGACA-10区pribnowboxTATAAT共性富含AT为什么？开始转录(Pribnowbox)TATAATPuATATTAPy-10区1-30-5010-10-40-205335原核生物启动子保守序列TTGACAAACTGT-35区RNA-pol辨认位点(recognitionsite)55RNA聚合酶保护区结构基因33原核生物中转录起始区的共同序列条件底物和模板RNA聚合酶终止因子（原核生物）第二节RNA转录合成的条件

原核生物RNA聚合酶（DDRP）无需引物，方向5->3全酶=核心酶+σ核心酶=α2ββ’ωσ——识别启动子真核生物RNA聚合酶（P275）依α-鹅膏蕈(xun)碱的敏感性分类amanitin由10～12个亚基组成，结构复杂，功能不同DestroyingAngel

原核生物——终止因子ρ蛋白：六聚体蛋白质（46KD）识别出现在RNA链上的终止信号结合RNARNA被释放第三节过程

一、起始识别启动子形成起始复合物σ因子识别转录起始识别点－35区TTGACA序列形成全酶(覆盖范围-55,+20)-10区局部解链形成第一个磷酸二酯键ATP或GTP＋NTP

形成RNA-DNA-酶三元复合体三、终止依赖辅助因子的终止由终止因子(ρ因子)识别特异的终止信号，并促使RNA的释放。自动终止RNA转录产物形成发夹形及寡聚U的二级结构5´pppG5335RNA-pol思考题复制和转录的异同p266真核生物转录

元件DNA链上的碱基顺序

顺式作用元件cis-actingelement反式作用元件trans-actingelement

因子

蛋白质反式作用因子trans-actingfactorcis-actingelement仅对其所处DNA链上的基因表达起调控作用Hogness盒或TATA盒（启动子）

CAAT盒及GC盒等增强子等TATA盒CAAT盒GC盒

增强子

顺式作用元件结构基因-GCGC---CAAT---TATA转录起始真核生物启动子保守序列增强子enhancer可远离转录起始点在所调控基因的上下游均可trans-actingelement能对不在一条DNA链上的结构基因起作用编码产生调控蛋白trans-actingfactor转录因子transcriptionalfactors,TF直接或间接结合RNA聚合酶参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ

第四节真核生物RNA

转录后的加工修饰

一、mRNA的转录后加工5’端帽子结构(m7GpppGp）3’端多聚腺苷酸尾巴(polyAtail)剪接编辑5pppGp…5GpppGp…pppGppi鸟苷酸转移酶5

m7GpppGp…甲基转移酶SAM帽子结构的生成5ppGp…磷酸酶Pi加尾(addingtail)：细胞核核酸外切酶（3->5）修饰加polyAmRNA的半寿期剪接（splicing)和剪切(cleavage)断裂基因外显子内含子snRNA+多肽->小分子核蛋白体套索状结构去除内含子鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图DNAmRNA可变剪接alternativesplicingmRNA的编辑(mRNAediting)人类apoB基因mRNA（14500个核苷酸）肝脏apo