免疫学性能验证课件

免疫检验的质量控制及性能验证2015.08.12质量控制报告单申请样本采集/接收样本检测检测结果的获得结果分析及报告发放影响检验结果的要素人员设施和环境条件实验室设备温湿度控制培训、比对设备操作、校准内部质量控制操作规程试剂性能验证SOP文件室内质控程序EP5A2EP15A2EP6AEP17AEP12ClinicalLaboratoryandStandardsInstitute(CLSI)涉及免疫评价方法医学实验室精密度和准确度的确认定量测定方法精密度方法定量测定方法线性的评价检出限与定量限的评价定性检测评价临床实验室标准化协会EP17A空白限、检测低限、定量限的验证Limitofblank(LOB)空白限Limitofdetection(LOD)检出限Limitofquantitation(LOQ)定量限LOB<LOD≤LOQ是一定概率下(α)测量空白时可能得到的最高检测结果，低浓度LOD的样本在一定概率下(β)能得到的最低测量结果。误判概率α、β：声称在给定物质中存在某成分的误判概率为α时（Ⅰ类错误，假阳性），声称不存在该成分的误判概率为β（Ⅱ类错误，假阴性）。α、β默认值为0.05。空白限（LOB）α=假阳性可能β=假阴性可能相对频率0LoBLoDLoQ总误差报告αβ不能检出能检出能检出可检测<LoB<LoD<LoQ空白限（LOB）测定空白样本20次测定结果与试剂厂家给定的LOB比较，不超过3个结果大于LOB验证通过。验证空白限（LOB）定量检出限（LOQ）选择浓度≥LOD的样本，测定25次（多样本，多天，重复完成），每个样本测定结果与参考值的偏差和TEa（实验室总误差）相比较。计算小于TEa所占比例是否符合（β=0.05）的要求。符合要求，验证通过；不符合，联系厂家。定性检出限（LOQ）系列浓度样本制备（有证，康彻斯坦标准品稀释）标准曲线的制作临界值附近浓度样本制备样本的检测：对临界值附近浓度样本进行连续20次测定当实验结果阳性率≥95%的最低浓度确认为检出限，表明被测物在该浓度及以上样本，实验方法将给出稳定的结果。定性精密度（只报告阴性、阳性、无反应性）不宜用阴性或强阳性标本衡量定性试验的重复性选择分析物浓度应接近医学决定水平（临界值）评价指标：临界值验证以COI(cut-off)或以s/co值报告结果的精密度评价。定性-重复性（精密度）-EP12A临界值：作为判断特定疾病、状态或被测量存在或不存在的界限的量值。也就是指试验结果处于（阴性、阳性）分界点时的样品中分析物的浓度。对纯粹的定性检测来说，临界值就是（唯一）医学决定水平。临界值(cut-offvalue)临界点:对阳性样本进行系列稀释，然后对系列稀释样本进行重复检测（20-40次），能获得50%阳性和50%阴性结果的浓度。20次（+20%与-20%浓度各10次），30%-70%40次（+20%与-20%浓度各20次）,35%-65%临界点接近临界值浓度的分析物（临界值+20%与-20%）对接近临界值浓度分析物的重复性检测（各20次）10天（每日测定2次）或20天（每日单次测定）阴性、阳性质控监测数据是否有效（10天，失效≤1次；20天失控≤2次），失控后该该批数据舍弃，在当日或其他补充新一批检测。计算阴阳性率数据分析（C50或临界值95%区间是否正确）定性-重复性（精密度）-EP12A临界值+20%与临界值-20%浓度分别进行20次检测。+20%浓度的样本产生的阳性率≥95%-20%浓度的样本产生的阴性率≥95%。意味着与临界值相差20%以上的样本就可预期用这种方法得到一致的结果。临界值的95%区间验证定性：以临床诊断、金标准方法比较、血清盘检测或参加卫计委能力验证的来评价。评价指标：符合率定性：符合率≥80%正确度证实分析测量范围有效时：需5-7个样品，每个样品重复测定2次。验证声明范围或改良方法：需7-9个样品，每个样品重复测定2-3次。样品：可比预期的分析测量范围宽20-30%，以期检测到“拐点”。线性范围评价可用计算浓度或标定浓度作为X值，仪器测量结果或仪器输出值（均值）作为Y值。也可用相对浓度作为X值，如果浓度间为等间隔，可用样品编号（如1、2、3、4、5等）代表X值。如所制备的样品系列非等间隔，其浓度间的关系应明确，在测定时可以这些间隔间的相对比值做为X值，此时的样品编号可以不为整数。曲线制作做一次、二次和三次多项式回归分析。SPS统计软件+统计学知识确定线性范围界别回归方