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文档简介
尿液分析的标准化及其尿沉渣定量检测技术新进展1尿液分析的发展回顾1590年荷兰人詹森发明了世界上第一台复合显微镜1673年,FrederickDekkers用加热醋酸酸化尿液的方法检测蛋白1896年,Daiber出版了他的尿沉渣图谱1911年,Benedict提出了稳定方便的尿糖检测方法JohnsHopkinsHospital的CharlesEmerson发表名著《临床诊断》1956年AlfredFree发明的CLINISTIX,尿液分析史上第一个“浸入即读”的测试方法
2国内尿液分析方法回顾50~60 手工化学分析70~80 手工化学分析 尿沉渣镜检80~90 尿液干化学分析2K~2K1 尿液干化学分析 尿沉渣镜检2K2 完整的尿液分析=干化学+尿流式+镜检确认3目前尿液分析所存在的问题更准?过分依赖尿液干化学分析尿沉渣镜检的方法学不精密性样品处理过程所带来的干扰人工镜检主观因素的影响更快?单个样品:9.75分钟*批量处理:5.25分钟*更多?*尿液分析最佳方法,FrankBailey,ASCP5尿液干化学检测方法的局限性例如:白细胞:肾移植病人淋巴尿不表现脂酶尿糖:受其它还原物质的影响造成假阴性细菌:只能检测革兰氏阴性杆菌……定性结果,不能用于疗效的监测结论:不能代替镜检6尿沉渣分析的重要性红细胞:泌尿系出血、泌尿系恶变、出血性疾病白细胞:泌尿系感染、急性肾小球肾炎、肾移植排异上皮细胞:肾小管病变管型红细胞管型:急性肾小球肾炎、肾梗塞白细胞管型:急性肾小球肾炎、肾综合症、肾盂肾炎上皮细胞管型:肾小管病变,如肾脏疾病、多种中毒透明管型:肾小球毛细管损害颗粒管型:肾盂肾炎、慢性肾疾病细菌:泌尿道感染7显微镜检查的不精密度UF-100、CD-3500、计数板三种方法对比检测104份脑脊液在低白细胞数的检测中,UF-100的CV为4.9%CD-3500的CV为28%镜检法的CV为40%8显微镜检查的影响因素标本在分析前形态改变标本混合不当离心的尿量不同离心速度和时间不同尿沉渣重悬的液量不同尿沉渣重悬的方法不同镜检一滴沉渣的液量不同盖片或计数板的差异视野数目和位置的差异成份识别上的人员差异显微镜视野大小的差异10尿沉渣检查标准化的建议标本的收集及运送2.2标本的运送按上述要求留取尿液应在2小时内完成检验。尿沉渣检验的操作步骤3.2镜检计数细胞数或管型,按××/µl报告。材料与器械1.5自动化设备有条件的实验室也可使用各类自动、半自动的尿沉渣分析仪作为尿沉渣分析,或用作过筛,但此类仪器必须经权威机构认可。12DiaSysR/S2000系统14国联在线UD-S自动染色工作站15普利生AMP2000自动扫描式尿沉渣工作站16DiaSysR/S2000系统主要部件为一个玻璃的光学计数板计数板固定在显微镜上并连接一个加样泵尿液标本首先按照常规步骤进行处理将加样管插入离心管的底部,启动加样泵吸取180微升的沉渣并利用涡流混合重悬在加样泵作用下尿沉渣流入检测区,分布在光学计数板上计数后,系统自动用700微升的盐水冲洗管路和计数板以防止交叉污染17为什么要使用全自动尿沉渣分析仪?18为什么要使用全自动尿沉渣分析仪?彻底排除样品处理过程的干扰因素以及人工镜检主观因素的影响,提高分析中质量控制提高筛选效率,保证样品的质量,强化分析前质量控制20全自动尿沉渣分析仪UF-100/UF-5021结果准确、重复性好UF-100和人工镜检法精密度比较(n=10)239-氮杂菲(Phenanthridine)染色DNA和RNA发射荧光为:橙色对死细胞胞膜穿透性强羰花青(Carbocyanine)细胞膜、核膜以及线粒体等膜性物质被染色发射荧光为:绿色特异的荧光染色技术24彩色打印报告-科研报告26质量控制27临床应用
血尿来源的鉴别诊断28UF-100对血尿来源的判断ToruHyodo,KazuoKumanoetal.Detectionofglomerularandnon-glomerularredbloodcellbyautomatedurinarysedimentanalyzer.JpnJNephrol37:35-43,1995.
UF-100:敏感性100%,特异性92.54%*镜检法:敏感性95.83%,特异性93.33%马骏龙,丛玉隆等。全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞鉴别血尿来源的探讨。中华医学检验杂志V20(5),1997。
UF-100:敏感性100%,特异性78.2%*Hyodo所选非肾小球病变对象排除了血尿同时伴菌尿病人30临床应用
药物治疗疗效的观察31临床应用-急性肾盂肾炎32临床应用-输尿管结石,肾盂肾炎33临床应用-肾病综合症34临床应用
用于检测脑脊液中的白细胞35尿流式细胞仪检查脑脊液中白细胞UF-100、CD-3500、计数板三种方法对比检测104份脑脊液在低白细胞数的检测中,UF-100的CV为4.9%CD-3500的CV为28%镜检法的CV为40%ReinhardZiebig,AndreasLun,PranavSinHA.LeukocyteCountsinCerebrospinalFluidwiththeAutomatedHematologyAnalyzerCellDyn3500andtheUrineFlowCytometerUF-100.ClinicalChemistry46:2242~247(2000)36流式细胞仪分析脑脊液标本UF-100及显微镜检测红细胞有好的相关性,r=0.919UF-100与白细胞的相关性为r=0.886UF-100与细菌的相关性为r=0.605,CSF出血标本细菌计数不可信颅咽管瘤病人的CSF中新形隐球菌、酵母菌及胆固醇结晶可检测出JosT.VanAcker,JorisR.Delangheetal.AutomatedFlowCytometricAnalysisofCerebrospinalFluid.ClinicalChemistry47:3556-560(2001)37UF在常规工作中的作用UF的快速筛选功能大大降低人工镜检的工作量解决阳性样品的漏检问题,避免了医疗纠纷定量的标准化报告方式大大提高结果的准确性适用于临床治疗监测提供新的临床信息RBC形态信息,用于血尿来源的鉴别诊断38简化工作流程没有UF有了UF报告报告报告39试纸条筛选、沉渣分析、化学定量、微生物检查等是尿液分析不可缺少的内容。采用自动化仪器对这些颗粒进行分析是减少手工操作,满足临床尿也分析所需要的检验方法。Kouri博士(欧洲尿分析组主席)
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