缬沙坦研究方案

缬沙坦胶囊BE研究计划与试验方案临床批件号2012L00759PAGE23PAGE20/19SFDA临床研究批件号：2012L00759注册分类：化学药品第6类第四部分临床试验资料缬沙坦胶囊健康人体生物等效性试验临床研究计划和试验方案研究机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院新药临床试验机构研究机构地址：武汉市解放大道1277号（邮政编码：430022）研究机构电话究机构主要研究者姓名：黎维勇签名：版本号：TJXH－VALS20120515v1申办单位：江苏云阳集团药业有限公司联系电话系地址：江苏省丹阳市经济开发区银杏路8号（邮政编码：212300）目录TOC\o"1-2"\h\z\u目录 1试验概述 4伦理学 5缩略语 61.引言 72.试验目的 83.试验管理 83.1管理机构和实施GCP的情况 83.2监查制度 83.3研究中发生的问题及其处理措施 93.4试验药品的管理 93.5资料保存 94.试验设计 95.受试者选择 105.1入选标准 105.2排除标准 105.3退出标准 115.4剔除标准 115.5选择受试者的步骤 115.6受试者筛选 116.受试制剂 117.参比制剂 128.给药途径、剂量及确定依据 129.试验方法 1210.对受试者要求 1210.1受试者在治疗或评价中的退出 1210.1.3伴随用药和治疗 1310.2禁忌与限制 1311.生物标本采集 1311.1样本名称 1311.2采集时间和处置方法 1312.生物样本药物测定方法及认证 1412.1特异性 1412.2标准曲线与线性范围 1412.3精密度与准确度 1412.4定量下限 1512.5提取回收率 1512.6方法学质控 1512.7样本稳定性考察 1512.8基质效应 1613.研究数据 1613.1数据处理 1613.2统计方法 1613.3药动学参数 1614.生物等效性评价 1615.AE的记录和报告 1715.1AE的记录 1716.声明及签字 1816.1申办者声明 1816.2研究者声明 1917.主要参考文献 19保密声明本文所含信息均属机密，并为江苏云阳集团药业有限公司所有。本方案提供有关信息的目的在于为江苏云阳集团药业有限公司进行一项临床试验，研究者可以本着同样的目的在符合下列条件的基础上将方案中的内容透露给试验的参加人员或研究者机构审查委员、伦理委员会或药事管理委员会。本方案的内容不能用在其他临床试验中，也不能在事先未经江苏云阳集团药业有限公司书面许可的情况下擅自将本方案内容透露给其他任何个人或集体。尽管该条件不适用于政府法规所要求的公开，但研究者必须及时将其通知给江苏云阳集团药业有限公司。另外，对本方案进行增补的任何信息也属机密，并为江苏云阳集团药业有限公司所有，其机密原则同方案内容。保密并仅用于经江苏云阳集团药业有限公司授权的事项，未经事先书面许可不得向任何他人公开。若事先未获得授权而持有本方案，请及时与江苏云阳集团药业有限公司联系，并将方案和其复印件交还该公司。

试验概述本研究将采用开放、随机、交叉的试验设计，评估国产甲磺酸多沙唑嗪片空腹口服的生物等效性。20位健康志愿受试者随机分成2组，每组10人，分别口服试验药或对照药各80mg，1周后交叉给药。受试者在试验前1天晚餐后禁食。第二天早8：00空腹分别口服试验药物或参比药物(80mg/人)，用250ml温水送服，服药2小时后才能自由进水，服药4小时后进统一低脂肪餐，实验期间禁烟、酒和茶，并禁服任何其它药物。在每次服药前和给药后24小时内将采血13次，采静脉血3ml于含肝素钠的洁净试管中，离心取血浆，以反相高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中药物浓度。试验期间由医生负责临床观察，填写体检表，记录临床症状，由护士采血供试验测定用。在筛选期受试者临床实验室检查、心电图检查和全面体格检查。试验流程图筛选入选和随机分组第一次给药受试者空腹后口服受试制剂T或参比制剂R至少间隔7天第二次给药受试者空腹后交叉口服另一制剂受试者体检，试验结束

伦理学机构审查委员会和伦理委员会试验开始前，研究者需将本研究方案、知情同意书、有关当局的批件和药检报告以及任何征召受试者的广告等递呈机构审查委员会、伦理委员会或具有同等权力的组织审批，书面批件应由研究者递交江苏云阳集团药业有限公司。知情同意书知情同意书需递交有关的伦理委员会审批，每份知情同意书必须包括所有的有关内容，包括一项声明，即江苏云阳集团药业有限公司有权根据当局要求或政策规定查阅受试者试验记录。在每位可能的受试者参加任何与该试验有关的活动之前，必须将试验的益处和风险全部向他们解释清楚。在解释了有关试验的基本内容，并且研究者已确信每位将参加试验的受试者理解试验的目的后，应要求每位将参加试验的受试者在知情同意书上签上姓名和日期，研究者必须向受试者提供一份知情同意书的复印件。

缩略语短语和专门术语 解释ALT/SGPT 丙氨酸转氨酶/谷丙转氨酶AST/SGOT 天冬氨酸转氨酶/谷草转氨酶AE 不良事件AUC0t从零到最后可测浓度的血药浓度-时间曲线下面积AUC0从零到无穷大时间内血药浓度-时间曲线下面积CRF 病例报告表Cmax观察到的最高血药浓度CL/f 表观清除率ECG 心电图EC 伦理委员会F相对生物利用度GCP 药物临床试验质量管理规范LLOQ 定量下限MRT 平均滞留时间QA质量保证QC质量控制SAE 严重不良事件SFDA 国家食品药品监督管理局SOP标准操作规程Tmax观察到的达峰浓度的时间t1/2末端消除半衰期Vd表观分布体积1.引言缬沙坦为血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂，能选择性地阻断AngⅡ与AT1受体的结合（其特异性拮抗AT1受体的作用大于AT2约20,000倍），从而抑制血管收缩和醛固酮的释放，产生降压作用。本品不作用于血管紧张素转换酶（ACE）、肾素及其他受体；不抑制与血压调节和钠平衡有关的离子通道；不影响体内缓激肽水平，因而导致咳嗽的副作用少于血管紧张素转换酶抑制剂。临床上主要用于治疗原发性高血压。毒理：大鼠每日灌服缬沙坦，连续3个月，剂量分别为60、200、600mg/kg，结果大剂量组动物水摄入量和血尿量稍增加，雄性大鼠轻度肾小球增生和嗜碱细胞增加，雌性大鼠肾小球输入小动脉肥大，恢复期结束后未见异常。大鼠灌服缬沙坦最高剂量达200mg/kg/日(部分动物6个月)，连续12个月，猴口服缬沙坦最高剂量120mg/kg/日，连续12个月，均未出现不良反应。试验表明缬沙坦无遗传毒性且无致癌作用。生殖毒性试验表明本品在大剂量时可能有轻微的生殖毒性，因此妊娠与哺乳期妇女禁用。本品不良反应发生率约为7.1%，与安慰剂相似。常见的不良反应为头痛和水肿，一般程度轻微且呈一过性，多数患者可以耐受。其他不良反应包括腹泻、偏头痛，偶尔可导致转氨酶增加、白细胞及血小板减少、高血钾等，极少有荨麻疹及血管神经性水肿发生。在高血压患者的临床试验中还观察到以下不良事件（无论是否与研究药物有关）：关节痛、无力，背痛、腹泻，头晕，头痛、失眠、性欲降低、恶心、水肿、咽炎，鼻炎，窦炎，上呼吸道感染、病毒感染。药代动力学：缬沙坦口服后吸收迅速，绝对生物利用度为25%，进食后服药吸收率降低46%，但临床疗效无明显降低，因此饭前饭后服用均可。血浆达峰时间为2～3小时，消除半衰期为6～7小时，血浆蛋白结合率为94%～97%。每日服药1次，三天后血药浓度达稳态。缬沙坦以原型药物代谢，主要(70%)经胆道排泄，其余通过肾脏排泄。根据国家食品药品监督管理局（SFDA）“药品注册管理办法”规定，若需申请缬沙坦胶囊《仿制药生产许可证》，要考核其人体生物等效性，故特制定本研究方案以评价缬沙坦胶囊的人体生物等效性。2.试验目的本试验目的是评价健康中国男性受试者空腹口服缬沙坦胶囊（受试制剂T）和北京诺华制药有限公司生产的缬沙坦胶囊（代文，参比制剂）后的药代动力学特点和生物等效性。3.试验管理3.1管理机构和实施GCP的情况3.1.1申办者和研究者均应采用标准操作程序执行临床试验的QC和QA系统。3.1.2原始资料必须符合中国GCP要求。3.1.3实验室检查结果必须准确可靠。3.1.4所用观察结果和发现都应加以核实，以保证数据的可靠性。3.1.5建立完整的试验组织机构，明确各级人员职责。3.1.6由主要研究者负责全面质量控制，执行各级人员职责。3.1.7由主要研究者负责设计试验方案、CRF，并经申办者同意后使用。试验结束后写出试验的总结报告。3.1.8由指定研究者负责制定试验实施细则和SOP，在试验中使用。3.1.9试验前由试验小组组织全体参加者学习方案，试验参加人员均经过GCP培训并获相应证书。3.1.10参加试验的医师、护士要严格遵守方案的规定，按程序进行，不得随意更改。3.1.11由指定统计人员负责数据的全面统计学处理。3.1.12由专人负责CRF的保管，试验结束后统一上交机构办公室归档。3.2监查制度3.2.1由申办者派监查员对本试验进行监督，确保试验按方案规定进行，确保CRF所记录数据与原始数据相同。3.3研究中发生的问题及其处理措施3.3.1方案的修订：本方案经EC会批准后，若要修改，需制定“方案修改说明书”，并由主要研究者签字，经申办者同意后方可修改方案。3.3.2方案修改后，需报EC审查后方可执行。3.3.3任何参加试验的人员不得违背方案。若发生违背方案事件，需写出说明并通知申办者，后者有权决定试验是否继续。3.3.4试验过程中发生任何AE或SAE，将按照该方案“153.4试验药品的管理3.4.1申办者需携带药品合格证书复印件、主要研究者申请书及试验药品到研究机构办理登记手续，药品存放在专门地点。3.4.2药品由专人管理，严格按照已有的SOP，并符合相应的药品管理规定。3.4.3试验药品仅供试验使用，不可用于其他任何情况。3.4.4使用药品情况均需详细记录在原始病历上，发药者签名并注明日期和时间。3.4.5试验结束后，剩余药品由申办者清点后收回。3.5资料保存3.5.1试验记录保存：原始记录随CRF在机构保存。3.5.2CRF（1）按GCP原则进行CRF填写，保证数据的准确性。（2）由专人按原始记录填写CRF。（3）最后由主要研究者审核后在CRF上签字。4.试验设计采用随机交叉对照实验设计，将20位健康志愿受试者随机分成2组，每组10人，分别口服试验药或对照药各80mg，1周后交叉。受试者在试验前1天晚餐后禁食（约10h）。第二天早8：00空腹分别口服试验药物或参比药物(80mg/人)，统一用250ml温水送下，服药2小时后才能自由进水，服药4小时后进统一低脂肪餐，实验期间禁烟、酒和茶，并禁服任何其它药物。服药前取空白血，服药后0.5、1.0、1.5、2、2.5、3、3.5、4、6、8、12、24、30小时取前臂静脉血3ml于含肝素钠的洁净试管中，立即离心取血浆，置－70℃冰箱中保存至测定，以液质联用分析方法测定血浆中药物浓度。试验期间由医生负责临床观察，填写体检表，记录临床症状，由护士采血供试验测定用。5.受试者选择5.1入选标准（1）健康志愿者；（2）年龄：18～40岁，同批受试者年龄相差小于10岁；（3）性别：男性；（4）体重：不低于50kg，体重指数[＝体重kg/(身高m)2]在19～24之间；（5）体格检查无异常发现者；一般体格检查，血压、心率、心电图、肝肾功能、血常规、血生化、尿常规及胸透检查无异常；（6）收缩压≥90mmHg，舒张压≥60mmHg者；（7）自愿参加试验并签署知情同意书。5.2排除标准（1）体检不符合上述受试者健康标准者；（2）有药物滥用史、有明显烟酒嗜好者；（3）3个月内参加过其他药物试验者；（4）近2周内用过已知对某脏器有损害药物，或目前正在应用其他预防或治疗药物者；（5）有慢性或复发性心血管、肝、肾、消化道、内分泌、免疫系统及呼吸系统疾病史者；（6）已知对研究药物同类有过敏史者；（7）最近3月内献血者。5.3退出标准（1）受试者依从性差，不能按时按量用药；（2）受试者不愿意继续进行临床试验，向主管医生提出退出者。5.4剔除标准（1）不符合入选标准者；（2）符合排除标准者；（3）一次药未用者；（4）无任何记录者。5.5选择受试者的步骤（1）经伦理委员会批准，征集志愿者自愿报名；（2）在向志愿者告知本试验各方面情况后，志愿者签署知情同意书；（3）经研究者按筛选表问讯，进行体格检查和实验室检查，符合入选标准，不属排除标准所列任何情况者，并能按时参加试验者则纳为正式志愿受试者。5.6受试者筛选生命体征包括血压、心率、呼吸、脉搏检查，体格检查，ECG和临床实验室检查在筛选进行。实验室检查项目如下：（1）血液学：白细胞计数和分类、血红蛋白、血球压积、血小板计数和红细胞计数。（2）血液生化：总胆红素、直接胆红素、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮、肌酐、尿酸、葡萄糖；Na＋、K＋、Ca2＋。（3）尿液分析：pH值、蛋白、葡萄糖、酮体、比重、红细胞、白细胞。6.受试制剂T：缬沙坦胶囊，规格：80mg，江苏云阳集团药业有限公司研制，批号：20120415，保存条件：遮光、密闭，阴凉处保存；有效期：暂定24个月。7.参比制剂R：缬沙坦胶囊，规格：80mg，北京诺华制药有限公司生产，批号：待定，保存条件：遮光，密封，在30℃以下保存；有效期：36个月。8.给药途径、剂量及确定依据由于受试制剂为胶囊，通过口腔口服给药。本试验根据文献报道的剂量范围和参比制剂的临床常用剂量，确定该试验的剂量为受试制剂缬沙坦胶囊1粒（80mg）或参比制剂1粒（80mg）。9.试验方法受试者一旦入选，采用DAS2.0软件进行分组。受试者禁食10小时后，次日晨空腹给予受试制剂缬沙坦胶囊1粒、或给予参比制剂北京诺华制药有限公司生产的缬沙坦胶囊1粒。用250ml温水送服。受试者服药后2小时内禁水，并在4小时后给予统一标准午餐。在每次服药前和给药后24小时内将采血13次，血样用于测定缬沙坦的血药浓度以评估国产缬沙坦胶囊与参比制剂的生物等效性，并在24小时内以一定的间隔观察生命体征以评估其安全性。经过至少7天的清洗期后，受试者于第二阶段服用另一种药物。在筛选期和最后一次采血结束后，所有受试者将分别作全面体格检查、12导联心电图和临床实验室检查。10.对受试者要求10.1受试者在治疗或评价中的退出10在研究者的观察下，受试者可以在任何时间退出，退出的原因列举如下：（1）在任何时间，受试者都有权决定撤回知情同意而退出研究并不会影响其今后的治疗和观察；（2）申办者江苏云阳集团药业有限公司认为由于安全原因，中止研究；（3）任何SAE的发生；（4）试验方案的顺应性很差；（5）不符合入选（剔除标准）而入选的试验对象或非正确随机化的试验对象；（6）在研究期间（包括服药期和清洗期）服用除研究药物以外的其他药物；（7）失随访；（8）违反试验方案，尤其是漏服试验用药。10.1.2退出程序受试者可在任何时间自由退出试验，其以后的治疗及随访不会因此受影响。研究者应询问退出的原因，是否发生任何AE。如有可能，受试者应完成最后一次随访，进行实验室检查和AE记录，并需追踪其AE。10.1.3伴随用药和治疗除非试验方案中有说明，否则在试验期间受试者不得服用任何其他药物(包括中草药制剂)。10.2禁忌与限制（1）受试者在服药前至少禁食10小时和服药后4小时内禁食，2小时内禁水；（2）受试者在试验前至少12小时及试验中不得吸烟和饮用含咖啡因或酒精的饮料；（3）受试者每次服药都必须留在研究场所一天一夜；（4）受试者在整个研究过程中必须避免剧烈的体力活动，亦不得长时间卧床。11.生物标本采集11.1样本名称血浆。11.2采集时间和处置方法给药前在受试者肘静脉处安放一留置针，每次采血前抽0.3ml弃去，分别于给药前和给药后0.5、1.0、1.5、2、2.5、3、3.5、4、6、8、12、24、30小时（共14点）抽血3.0ml，置于事先已经贴好标签的试管内，3000rpm离心10min，血浆转移至塑料试管中置7012.生物样本药物测定方法及认证按照参考文献的方法并加以改进，采用反相高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中缬沙坦的浓度。生物样本的测定、药动学参数计算及数据统计学处理由华中科技大学同济医学院附属协和医院新药临床试验机构具体负责。12.1特异性本实验建立的方法用于测定血浆中缬沙坦的含量，结果应证明无内源性物质或代谢物干扰本品的测定。12.2标准曲线与线性范围使用与待测样品相同的生物介质，不同生物样品应配制标准样品制备各自的标准曲线，用于建立标准曲线的标准浓度个数取决于分析物可能的浓度范围和分析物/响应值关系的性质。必须至少用6个浓度建立标准曲线，对于非线性相关可能需要更多浓度点。定量范围要能覆盖全部待测的生物样品浓度范围，不得用定量范围外推的方法求算未知样品的浓度。建立标准曲线时应随行空白生物样品，但计算时不包括该点，仅用于评价干扰。当线性范围较宽的时候，推荐采用加权的方法对标准曲线进行计算，以使低浓度点计算得比较准确。用回归分析方法计算的回归方程，相关系数应大于0.95。12.3精密度与准确度精密度是指在确定的分析条件下，相同介质中相同浓度样品的一系列测量值的分散程度。通常用质控样品的批内和批间相对标准差(RSD)来考察方法的精密度。一般RSD应小于15%，在LLOQ附近RSD应小于20%。准确度是指在确定的分析条件下，测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度（即质控样品的实测浓度与真实浓度的偏差），重复测定已知浓度分析物样品可获得准确度。一般应在85%～115%范围内，在LLOQ附近应在80%～120%范围内。一般要求选择3个浓度的质控样品同时进行方法的精密度和准确度考察。低浓度选择在LLOQ的3倍以内；高浓度接近于标准曲线的上限；中间选一个浓度。每一浓度至少制备并测定5个样品，为获得批间精密度应至少在不同天连续制备并测定3个合格的分析批。12.4定量下限是标准曲线上的最低浓度点，表示测定样品中符合准确度与精密度要求的最低药物浓度。LLOQ应能满足测定3~5个半衰期时样品中的药物浓度或能检测出Cmax的1/10~1/20时药物浓度，其准确度应在真实浓度的80%～120%范围内，RSD应小于20%。应由至少5个标准样品测试结果证明。12.5提取回收率从生物样本基质中回收得到分析物质的响应值与纯标准品产生的响应值的比值即为分析物的提取回收率。也可以说是将供试生物样品中分析物提取出来供分析的比例。应考察各种药物的高、中、低3个浓度的提取回收率，其结果应当一致、精密和可重现。12.6方法学质控应在生物样本分析方法确证完成以后开始测定未知样品。在测定生物样品中的药物浓度时进行质量控制，以保证所建立的方法在实际应用中的可靠性。推荐由独立的人员配制不同浓度的质控样品对分析方法进行考核。每个未知样品一般测定一次，必要时可进行复测。每个分析批生物样品测定时应建立新的标准曲线，并随行测定各成分的高、中、低三个浓度的质控样品。每个浓度至少双样本，并应均匀分布在未知样品测试顺序中。当一个分析批中未知样品数目较多时，应增加各浓度质控样品数，使质控样品数大于未知样品总数的5%。质控样品测定结果的偏差一般应小于15%，低浓度点偏差一般应小于20%，最多允许1/3不在同一浓度的质控样品超限。浓度高于定量上限的样品，应采用相应的空白介质稀释后重新测定。对于定量下限的样品，在进行药动学分析时，在达到Cmax以前取样的样品以零值计算，在达到Cmax以后取样的样品以无法定量（ND）计算。12.7样本稳定性考察对含药生物样品在室温、冰冻（－70℃）和冻融（3次）条件下以及不同存放时间进行稳定性考察，以确定生物样品的存放条件和时间。同时考察储备液（4℃）的稳定性以及样品处理后溶液中分析物的稳定性（室温和进样器中放置若干小时），以保证检测结果的准确性和重现性。12.8基质效应从生物样本基质中回收得到分析物质的响应值与有基质存在时分析物产生的响应值的比值即为分析物的基质效应。应考察各种药物的高、中、低3个浓度的基质效应，其结果应当一致、精密和可重现。13.研究数据13.1数据处理分别计算缬沙坦的血药浓度和药动学参数。本实验所测得的血药浓度数据用非房室模型进行计算，Cmax和Tmax用实测值表示；AUC0-t用梯形法计算，AUC0-=AUC0-t+Ctn/λz，tn是最后一次可实测浓度的取样时间；Ctn是末次可测定样本药物浓度；λz是系对数血药浓度-时间曲线末端直线部分求得的末端消除速率常数，可用对数血药浓度-时间曲线末端直线部分的斜率求得；t1/2用公式t1/2＝0.693/λz计算。并根据以下公式计算试验药的相对生物利用度(F值)：F=(AUCT)/(AUCR)100％AUCT：受试制剂T的药-时曲线下面积，AUCR：参比制剂R的药-时曲线下面积，13.2统计方法试验数据均用均数±标准差（X±SD）和相对标准差（RSD）表示，药动学参数用SPSS16.0软件包进行方差分析（ANOV），显著差异的标准为P<0.05。13.3药动学参数主要药动学参数包括：AUC0-t、AUC0-、Cmax、Tmax、MRT和t1/2等，经对数转换后的受试制剂的AUC0-t的90%可信限在参比制剂的80125%之间，受试制剂的Cmax在参比制剂的75133%之间，则可认为两种制剂等效。14.生物等效性评价将受试制剂与参比制剂的AUC0-t、和Cmax经对数转换后用双单侧t检验和置信区间法确定是否符合生物等效性要求，Tmax经非参数法检验应无显著差异，则认为两种制剂生物等效。15.AE的记录和报告15.1AE的记录AE受试者在试验过程中发生的任何AE必须记录在相应的CRF中。此外在每次检测受试者的生命体征和采血时，参加试验的护士或医师均需用间接提问的方式询问AE的发生情况。及时和完整的AE报告可帮助申办者确定其是否可能为药物相关性事件，从而更多地了解药物毒性；找出药物的剂量相关毒性；修正研究方案；遵守法规以保护受试者、处方医师和申办者。“研究药物”定义为所研究的制剂及用于研究的参比制剂。本试验的研究药物为江苏云阳集团药业有限公司研制生产的缬沙坦胶囊和北京诺华制药有限公司的参比制剂缬沙坦胶囊（代文）。“临床AE”是指在研究过程中出现的或恶化的疾病、体征或症状。通过研究者对受试者的询问和体检，所有的临床AE，不管其是否被研究者