methuosis是一种新的蛋白酶独立细胞死亡的形式

对吲哚类查耳酮作为新型非细胞凋亡形式——Methuosis的诱导剂的合成和评价methuosis是一种新的蛋白酶独立细胞死亡的形式，从胞吞胞吐派生的空泡的大量积累，最终导致细胞脱离底层和破裂。最近，我们描述了1查耳酮化合物，3-（2-甲基-1H-吲哚-3-基）-1-（4-吡啶基）-2-丙烯-1-（即，MIPP），它可以诱导methuosis在神经母细胞瘤和其他类型的癌细胞发生。在此，我们描述了直接相关化合物库的合成及构效关系，提供了深入了解两个芳环系统的贡献，并强调了一个强有力的衍生物，3-（5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基）-1-（4-吡啶基）-2-丙烯-1-（即，MOMIPP）在微摩尔浓度这样低的浓度下可诱导methuosis。我们也分析了叠氮衍生物的生物活性，可能有助于旨在用光亲和标记技术鉴定蛋白质目标MOMIPP的未来研究。这些研究的潜在意义通过发现MOMIPP有效地降低了替莫唑胺耐药性胶质母细胞瘤和阿霉素耐药乳腺癌细胞的生长活性而不断被重视。因此，它可能可以作为一种能够在癌症中通过methuosis形式来促进细胞凋零的药物原型，这种原理与传统细胞死亡（如细胞凋亡）的机理不同。介绍

尽管在发展中国家针对特有的某些类型的癌症细胞的调控途径的治疗药物有了最新进展，许多肿瘤术后辅助治疗的重要支柱仍然是辐射和DNA烷化剂。一个例子是高度恶性脑肿瘤，胶质母细胞瘤（GBM），在现行标准的护理是手术，在可能的情况下，也会有辐射和口服替莫唑胺（TMZ网站）的辅助治疗。（1）后者方法的一个限制是，他们以通过破坏DNA而引发内在的凋亡途径的形式工作。（2）由于GBM细胞通常在海港抑癌基因的突变（例如，PTEN，P53，PRB），他们是相对不敏感的凋亡刺激。（3，4）此外，胶质母细胞瘤细胞通过提高他们修复DNA损伤的能力而获得对烷化剂的抗药性。（5）我们相信，有可能开发新的方法通过诱导可替代的非细胞凋亡的细胞死亡形式来治疗这类有抗药性的癌症，这种细胞死亡形式不以DNA损伤作为触发。为此，我们定义了一个独特的细胞死亡的形式称为“methuosis”（6,7）methuosis的特点是大部分细胞的细胞质空间以从macropinosomes派生空泡形式产生位移。（6）后者当膜皱褶（伪足）附上许多口袋状细胞外液，并内化时形成。在methuosis（8，9），回收的减值和溶酶体导向贩运macropinocytotic囊泡的作用把他们锁定在中间阶段，在此他们融合而逐步形成较大的液泡。这最终导致代谢活动减少，细胞膜破裂。（6）这种死亡被认为是非细胞凋亡形式，因为其并非伴随着核染色质浓缩，细胞出泡，或核小体DNA片段。methuosis也是caspase独立的，因为它不能被广谱蛋白酶抑制剂如ZVAD-FMK阻止。Methuosis本质特点在于GBM细胞，它是被激活的Ras和RacGTP酶异位表达而触发这种形式的细胞死亡的场所。然而，利用这种非常规的细胞死亡途径杀死那些不易细胞凋亡的癌细胞的潜力取决于分子是否可以诱导methuosisdruglike属性识别。最近，我们描述了一个原型查耳酮相关化合物，它能在抗TMZ和非抗GBM细胞以及来自乳腺癌，结肠癌，胰腺的其他癌症细胞系以带有methuosis的特征形式来诱导细胞死亡（10）。在此，我们报告了相关化合物库合成及构效关系（SAR）的研究从而导出（1）定义的主要特点，为诱导methuosis活动，（2）确定改进生物活性的衍生物以及发展一个可能适合在未来目标识别工作中用作光亲探测器的叠状类似物做准备。结果SARs由于我们开始寻求可能引发methuosis的druglike小分子，我们注意到Kirchhausen和同事（11）写的一个报告，他们描述了被称为vacuolin-1的分子及一些其他三嗪类化合物，这些化合物能够抑制Ca2+依赖溶酶体胞吐。虽然这些化合物能诱导标记的细胞空泡化，他们并没有引起细胞死亡。然而，在本报告中包含的信息中，一种结构独特的诱导液泡的化合物我们的注意，因为它相似的一类分子称为查耳酮。这种化合物的结构被描绘在图1（化合物1）。查耳酮由一个1,3-二苯基-2-丙烯-1框架组成，这种框架是黄酮类天然产物的前体组成。然而，查耳酮已长期被广泛应用于描述许多在此框架内建立的合成衍生物。几种查耳酮（12）已发现有显着的抗癌活性，但尚未被报道能诱导细胞空泡化。（12-14）这促使我们怀疑化合物1可能代表了一种新型的查耳酮，它可以通过诱导methuosis杀死癌细胞。我们发现，化合物1几个小时内在胶质瘤细胞引起广泛空泡，48小时内造成细胞活力的重大损失。（10）化学数据库的检索发现了相似性>75％的其他化合物。其中，化合物2（图1）被选定做进一步研究。它引起的空泡比化合物1引起的更大、更多。化合物2被分配的缩写是MIPP，即3-（2-甲基-1H-吲哚-3-基）-1-（4-吡啶基）-2-丙烯1。MIPP的生物效应的详细评价表明，这种化合物诱导细胞死亡的形式与methuosis的数据图表相匹配。（10）此外，MIPP在抑制对TMZ有高抗的GBM细胞的生长和活力方面也非常有效。（10）\o"OpenFigureViewer"Figure1.Structuresofcompounds1and2,initiallyfoundtobeactiveinducersofmethuosis(10)ascomparedwithcommerciallyavailableanalogues3–8,whichfailedtoinducethehallmarksofmethuosisincultureU251GBMcells.因为需要MIPP的浓度≥10μM才能有效诱导methuosis，所以我们开始组装MIPP相关化合物库，并与经效能提高的确定的目标类似物进行初步特区的比较。我们首先从比较MIPP和市售的几个相关化合物（图1化合物3-8）诱导methuosis的活性开始。当在U251GBM细胞中添加浓度为10μm时，后者没有触发细胞空泡化。1-8化合物（图1）的检验表明，吲哚和吡啶环之间的特有关系很可能在一些特定活动中起到重要作用。具体来说，化合物1（有效）与化合物7（无效）的比较表明吡啶环的重要性，因为当用段-甲氧基苯基环化合物来代替它时呈现无效。因此，一种类似物的初始构成被合成，以用来研究调查吡啶氮的位置对生物活性的影响。α，β-不饱和酮的核心基础类似物可以由吲哚-3-carboxaldehydes和芳酮的Claisen-Schmidt缩合制备。（15）苯乙酮或各种乙酰吡啶，吲哚-3-甲醛的缩合反应产生化合物9-12（图1A）。这些化合物按照三个标准与浓度为10μM的MIPP进行了活性比较：（1）在24和48h借助相差显微镜进行活细胞的形态空泡评估;（2）48小时时结束用3-（4,5-二甲基-2-基）-2,5-二苯基溴化四唑（MTT）法对细胞存活率评估，并在第一个24小时;后添加新鲜化合物。（3）48小时暴露在这些化合物中的细胞上显示细胞集落形成方式（2周为限）。这一分析结果（见表1）表明，第一个吡啶环的氮取向是其是否具有活性的一个关键特征。元和正射类似物10和11，以及苯乙酮类似物9，均在诱导methuosis方面与MIPP相比相对无效。相比之下，去除MIPP吲哚环（化合物12）2-甲基，虽减少但并未消除活性。\o"OpenFigureViewer"Scheme1.SynthesisofAnaloguesofMIPP(Compound2)aaThespecificsubstituentsatR1,R2,R3,andArforeachnumberedcompoundarelistedinthechart.ForA–D,thespecificconditionsandreagentswereasfollows:(A)piperidine,CH3OH,reflux,19–89%.(B)BBr3,CH2Cl2,−78°C,61and95%for15and21,respectively.(C)POCl3,DMF,0°C,90%;piperidine,CH3OH,reflux,89%.(D)NaH,CH3I,DMF,RT,82%.Table1.SummaryofSARStudiesPerformedonMIPP(Compound2)andRelatedCompoundsGeneratedinSchemes1and2Table*Resultsareexpressedaspercentofcontrolsthatreceivedvehiclealone(DMSO).Valuesarethemean±SDofquadruplicate(MTT)ortriplicate(colonyformation)determinations.接下来，我们分别用市售5-甲氧基和5-苄氧基吲哚-3–甲醛准备化合物13和14来探索吲哚环的5位上基团的官能团作用。5-甲氧基化合物13，反过来用BBr3甲基化形成5-OH的化合物15（图1B）。如表1所示，尽管他们在短期的增长/可行性实验中细胞毒性不一致。但当在集落形成实验和细胞形态方面比较时,化合物13和14的活性类似MIPP。相比之下，5-羟基取代化合物15在所有的检测中表现出的生物活性却大大降低。为了确认吡啶氮的位置仍然是5-甲氧基取代的化合物活性的关键，类似物16和17被分析。若其失去活性则证实吡啶氮（见表1）的必要性。因为比较化合物12-15与MIPP表明吲哚环5位和2位的改变都会影响活性，我们从市售2-甲基-5-甲氧基吲哚出发合成了2-甲基-5-甲氧基类似物。我们通过Vilsmeier-哈克甲酰化2-甲基-5-甲氧基吲哚合成了关键中间体18，接着与4-乙酰吡啶耦合出化合物19（图1C）。无论是在MTT法的可行性分析还是在克隆形成实验中，这种化合物的抑制活性超过MIPP（见表1）。此外，甲基吲哚氮的化合物13与NaH/CH3I在二甲基甲酰胺（DMF）（计划1D）制造20时产生了一种化合物，它能诱发一些胞质空泡化，但只有温和影响细胞活力（见表1）。因此，比较化合物13，19和20后，我们明白当吲哚1、2位分别被H和甲基占用时，其取得最佳的活性。5-OH的化合物21，由BBr3去甲基化的19（1B计划）形成，与5-甲氧基化合物19（见表1）相比，其表现出在活性上的显着降低与先前观察到的5-OH在化合物15的不利效果一致。在生理条件下使用MIPP的局限性之一是其在水溶液中始终有一定溶解度。因此，我们做了一组在生理PH时增加极性的实验，用来探讨改变过的吲哚5位基团所带来的影响。因为我们以前的SAR研究表明，吲哚环的5位基团有一定随机性（比较化合物13和14），所以我们设计了一个14的类似物，增加了电荷和吲哚2位上的一个甲基。我们设想，OH类似物21可被甲基4-（溴甲基）苯甲酸烷基化，然后被其酸水解，从而产生一种在pH=7.4时的高水溶性类似物。然而，我们有些诧异，没有明显的产品，可以由21直接烷基化生产。我们在不同pKa值的多个基地进行了筛选，从K2CO3到Cs2CO3，以及乙胺，tetramethylguanidine，1,8-二氮杂双环[5.4.0]-螺-7烯（DBU），氢化钠。我们在所有的反应中对在吡啶氮发生的烷基化反应进行了观察。强如TMG和NaH的，即使使用1当量，也产生可观的吲哚的N-烷基化以及吡啶，吲哚羟基烷基化等反应。单被烷基化产品的产量在5-吲哚的地位是微不足道的。因此，一个新的路线即在引入吡啶基团（计划2）前官能化吡啶就产生了。市售的2-甲基-5-甲氧基吲哚被BBr3甲基化产生22。4-甲基-（溴甲基）苯甲酸烷基化产物在相转移条件下用于合成单-O-被烷基化产品23。（16）经过POCl3/DMF的甲酰化处理，中间体24和25被独立制备。相关反应在温和条件基础下（碳酸氢钠）生产了酯24，而在5N的氢氧化钠条件下产生酸25。4-乙酰吡啶的缩合产生了相应的产物26、27。然而，在神经母细胞瘤的实验测试发现，既不是26也不是27诱导methuosis（见表1）。\o"OpenFigureViewer"Scheme2.Analogueswith5′ModificationsoftheIndoleRingGeneratedbyFunctionalizingtheIndolePriortoIntroductionofthePyridineMoietyaaConditionsandreagents:Compound22:BBr3,CH2Cl2,−78°C,93%.Compound23:methyl-4-(bromomethyl)benzoate,NaOH,TBAB,CH2Cl2,RT,63%.Compound24:(1)POCl3,DMF,0°C;(2)NaHCO3,90%.Compound25:(1)POCl3,DMF,0°C;(2)5NNaOH,99%.Compound26:4-acetyl-pyridine,piperidine,MeOH,reflux,34%.Compound27:4-acetyl-pyridine,piperidine,MeOH,reflux,21%.化合物19（MOMIPP）与化合物2（MIPP）生物活性比较

上述研究确定化合物19是最有力诱导methuosis的化合物。此后，我们将3-（5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基）-1-（4-吡啶基）-2-丙烯-1这种化合物缩写为“MOMIPP”。MOMIPP与化合物2（MIPP）高生物活性在研究U251胶质瘤细胞中被证实，研究中我们采用MTT法的可行性分析，细胞生长实验，形态评估，和集落形成实验来比较MOMIPP和MIPP。图2A显示的是药物对细胞活力的影响的剂量反应曲线。分别添加每个化合物到指定的浓度，保持2天，并且在第一天后要补充原料。MOMIPP与MIPP的IC50分别为1.9微米与4.8微米。为了获得对每个化合物的活性持续比较的方法，我们通过连续三天对在2.5，5，或10μM的化合物处理下培养的细胞数量（图2B）进行计数的方法来评估它们对细胞的生长和生存的影响。与可行性研究不同的是，在这些实验中，该化合物在研究开始时被添加，并没有持续的补充。在这些条件下，MOMIPP显​​然在减少细胞的生长和降低细胞活性方面比MIPP更有效。在用MOMIPP处理的组中细胞数量的减少以大规模早期细胞空泡的出现和底层非活性细胞的损伤的形式表现。与此相反，用MIPP处理的细胞最初在第1天和第2天经历过空泡阶段，却表现出恢复趋势，尤其是在2.5μM浓度下（图3A）。这些研究表明，单独作用时，MOMIPP比MIPP对细胞形态和细胞活力的影响更持久。当用集落形成实验来评估细胞增殖能力和长期活力时，MOMIPP和MIPP的区别就表现非常明显（图4）。当细胞处理2天时，MOMIPP显​​然在减少细胞集落形成方面比MIPP有效（图4A）。如果处理被缩短到4小时，MOMIPP还是较MIPP有效，但都需要更高的浓度以减少集落形成（图4B）。\o"OpenFigureViewer"Figure2.ComparisonoftheeffectsofMOMIPP(compound19)andMIPP(compound2)ongrowthandviabilityofU251GBMcells.(A).Onedayafterplatingthecellsin96-welldishes,MOMIPP(●)orMIPP(■)wasaddedattheindicatedconcentrations.Controlsconsistedofcellsinparallelwellstreatedwithanequivalentvolumeofvehicle(DMSO).Mediumcontainingfreshcompoundwasaddedafter24h,andMTTassayswereperformedafteratotal48hoftreatment.Eachpointrepresentsthemean(±SD)fromfourseparatewells,withtheresultsexpressedaspercentofthemeanoftheparallelcontrolwells.(B)U251cellsseededinparallel35mmdishesweretreatedwithMOMIPP(●),MIPP(■),oranequivalentvolumeofDMSO(▲),andcellswereharvestedforcountingoneachofthreeconsecutivedays.Eachpointisamean±SDfromthreeseparatecultures.\o"OpenFigureViewer"Figure3.ComparisonoftheabilitiesofMOMIPPandMIPPtoinducethemorphologicalhallmarksofmethuosis.Onedayafterplating,U251GBMcellsweretreatedwithMOMIPPorMIPPatfinalconcentrationsof2.5(A)or10μM(B).Controlsreceivedanequivalentvolumeofvehicle(DMSO).Cellswereobservedbyphasecontrastmicroscopyonthreesequentialdaysafteradditionofthecompounds,withoutchangingthemediumorreplenishingthecompounds.Methuosisischaracterizedbyextensiveaccumulationofphase-lucentcytoplasmicvacuoles,witheventualcellroundinganddetachmentfromthesubstratumasviability\o"OpenFigureViewer"Figure4.ComparisonoftheabilitiesofMOMIPPandMIPPtoinhibitsurvivalofU251GBMcellsincolony-formingassays.(A)Cellswereplatedforcolony-formingassaysasdescribedintheExperimentalSection.Onedayafterplatingthecells,MOMIPP(●)orMIPP(■)wasaddedtothemediumattheindicatedconcentrations,andcellsweremaintainedinthepresenceofthecompoundsfor48h.Thereafter,thecompoundswereremoved,andcolonies>50cellswerecountedafter2weeks.Eachpointrepresentsthemean(±SD)fromthreeseparatedishes,withtheresultsexpressedaspercentofthemeanoftheparallelcontroldishescontainingDMSO.(B)TheeffectsMOMIPP(●)andMIPP(■)oncolonyformationwerecomparedasinpanelA,exceptthatcellswereexposedtothecompoundsforonly4hinsteadof48h.为了确定诱导methuosis的化合物针对抗TMZ的神经母细胞瘤是否有效，我们使用以前生成的基本上不受浓度高达100微米TMZ影响的抗TMZ胶质瘤细胞系（10）（图5A）如图5b所示，MIPP和MOMIPP能够诱导methuosis和降低抗TMZ细胞的细胞活性，但MOMIPP的效能明显优于MIPP。MOMIPP通过methuosis形式杀死有抗药性的肿瘤细胞的能力并不仅仅局限于胶质母细胞瘤。例如，我们观察到类似情况，MOMIPP在亲代和抗阿霉素的MCF-7乳腺癌细胞（图5C，D）引起空泡并导致其集落形成能力的降低。为了确定对肿瘤细胞造成最大限度毒性作用的浓度的MOMIPP是否也会对正常细胞产生毒性，我们用10μMMOMIPP处理人类乳腺上皮细胞（HMEC）。图5E所示，在加入MOMIPP后24小时内HMECs进行大范围的细胞质空泡化。到48小时，细胞活力减少约40％，而在类似的细胞密度下同期处理的MCF7乳腺癌细胞减少了70％（图5F）。为了进一步评估MOMIPP对正常细胞的影响，我们把化合物应用到人体皮肤成纤维细胞。在所有其他细胞测试实验中，到24小时10μMMOMIPP明显诱导成纤维细胞空泡化（图5G）。与HMECs类似，接种在合适密度来保持指数增长的正常成纤维细胞在接触到MOMIPP48小时时，表现出生存能力下降40％的特点。然而，当纤维母细胞接种在一个较高的初始密度，使他们在MOMIPP加入时以形成固定相，那么细胞活性基本上不受影响（图5H），即使细胞发生空泡（未显示）。这些观察表明，虽然MOMIPP会对正常细胞产生毒性，但与癌症细胞系，如U251和MCF7相比，正常细胞对这类化合物相对不太敏感。MOMIPP对亚融合与融合的成纤维细胞的影响差别提供了一个可能的解释，这意味着，以空泡为典型的内体贩运的中断可能在不分裂的细胞中比在正常增殖的细胞中具有相对较好的耐受性。\o"OpenFigureViewer"Figure5.MOMIPPeffectivelyinhibitstheviabilityofdrug-resistantGBMandbreastcancercells.(A)TMZ-resistantU251glioblastomacells(U251-TR)werederivedasdescribedpreviously.(10)Thegraph,reprintedfromref10withpermission,showsthatincontrasttotheparentalU251cells,theviabilityofU251-TRcellsisnotreducedbytreatmentwithTMZ.(B)TheU251-TRcellsweretreatedwiththeindicatedconcentrationsofMIPPorMOMIPPfor48handthensubjectedtocolony-formingassaysasdescribedintheExperimentalSection.Eachpointisbasedoncolonycountsfromthreedishes(mean±SD),withtheresultsexpressedaspercentofthemeanfromparallelcontroldishestreatedwithanequivalentvolumeofvehiclealone(DMSO).(C)Parentalanddoxorubicin-resistant(DoxR)MCF-7breastcancercells(56)weretreatedwith10μMMOMIPPfor24handthenexaminedbyphase-contrastmicroscopy.(D)Long-termviabilityofparentalorDoxRMCF-7cellswasassessedbycolony-formingassayaftera48hoftreatmentwiththeindicatedconcentrationsofMOMIPP.Theresultsarethemean±SDofdeterminationsperformedonthreeparalleldishes.(E)NormalHMECsweretreatedwith10μMMOMIPPoranequivalentvolumeofDMSO(control)andexaminedbyphase-contrastmicroscopyafter24h.(F)MCF-7cellsorHMECswereplatedin96-wellplates.After48h,whilethecellswerestillsubconfluent,freshmediumcontaining10μMMOMIPPoranequalvolumeofvehicle(DMSO)wasadded.MTTviabilityassayswereperformedata48hendpoint.Valuesarethemeans(±SD)fromfourseparatewells.(G)Normalhumanskinfibroblastsweretreatedwith10μMMOMIPPoranequivalentvolumeofDMSO(control)andexaminedbyphase-contrastmicroscopyafter24h.(H)Normalhumanfibroblastswereseededin96-wellplatesatsubconfluentdensity(1000cells/well)orconfluentdensity(10000cells/well).After24h,freshmediumcontaining10μMMOMIPPoranequalvolumeofvehicle(DMSO)wasadded.MTTviabilityassayswereperformedata48hendpoint.Valuesarethemeans(±SD)fromfourseparatewells.潜在的光亲探针的合成及生物活性我们SAR的研究表明，MIPP或MOMIPP（例如，修改吡啶环）结构的非常微小的变化可以消除他们诱导methuosis的能力。虽然查耳酮被普遍认可为亲电试剂，诱导methuosis所需的结构特异性的严格要求表明，MIPP和MOMIPP的直接影响最有可能源于它们与一个或多个不同的靶分子之间的相互作用。几个关于通过亲电化合物进行特定蛋白质修改的例子已有报道（见讨论）。因此，今后的一个重要目标是确定能诱导methuosis的查耳酮的靶目标。确定药物靶点的一个常用的方法是亲和层析。然而，在这一点上，我们的SAR研究还没有发现任何非本质的数据库，可以链接到一个庞大的亲和标签库（例如，生物素）或拴了没有失去活性的坚实基体。因此，我们致力于制备用活性基团微小改良的具有生物活性的类似物，这可能对亲光性的药物靶标发现工作有一定意义。（18）最初，我们设计了一个MIPP的苯甲类似物作为潜在的光亲和探针。苯甲酮是常常被纳入靶目标识别研究的活跃分子。在化合物14的结构的基础上，我们假定5苯甲酰类似物可能保留了作为光亲和探针的活性和功能。二苯甲酮类似物（化合物，苯甲酰MIPP30）用两个步骤制备，首先从2-甲基吲哚的Vilsmeier–Haack中间体（图3A）酰化开始。该系统已被证明能用甲基化的吲哚直接酰化5-6位。在我们的实验中，2-甲基吲哚的Vilsmeier–Haack中间体经酰化后产生比例分别为1:3的5-和6-苯甲酰基2-甲基吲哚-3-甲醛混合物（28和29）。这个区域选择性的特点是一维的Overhauser核效应（NOE），这在试验阶段也有陈述。该计划的第二个步骤，最后30和31两个化合物，由4-乙酰吡啶在哌啶条件下耦合醛形成。随后的形态和可行性研究显示，与苄衍生物（化合物14）不同的是，当在U251细胞（数据未显示）测试时，没有一个苯甲酮类似物（30日和31日）能诱导methuosis。\o"OpenFigureViewer"Scheme3.Synthesisof5′and6′AzidoDerivativesofMIPPaa(A)Conditionsandreagents:Compounds28and29:(1)COCl2,DMF,1,2-DCE,0°C;(2)AlCl3,benzoylchloride,0°CRT,13and41%for28and29,respectively.Compound30:4-acetyl-pyridine,piperidine,MeOH,reflux,13%.Compound31:4-acetyl-pyridine,piperidine,MeOH,reflux,74%.(B)Conditionsandreagents:Compound32:NaNO3,H2SO4,0°C,95%.Compound33:H2,10%Pd/C,EtOH,RT,97%.Compound34:(1)NaNO2;(2)NaN3,75%AcOH,0°C,66%.Compound35:POCl3,DMF,0°C,88%.Compound36:4-acetyl-pyridine,piperidine,MeOH,reflux,39%.Compound37:NaNO3,H2SO4,0°C,62%.Compound38:H2,10%Pd/C,EtOH,RT,99%.Compound39:(1)NaNO2;(2)NaN3,75%AcOH,0°C,53%.Compound40:POCl3,DMF,0°C,69%.Compound41:4-acetyl-pyridine,piperidine,MeOH,reflux,39%.芳香叠氮化合物含有常被用在光亲和标记的另一种光活性基团。因此在MOMIPP的叠氮部位的结构变化较苯甲酰组化合物30叠氮部位的要小前提下，我们接下来探索叠氮化合物是否可以被添加到吲哚环的5-或6位而没有失去诱导methuosis活性。化合物36（5-叠氮MIPP）的合成基于2-烷基吲哚5位的直接硝化和进一步的叠氮结构重氮化转换（26）（见计划3B）。2-甲基吲哚在浓硫酸条件下被选择性硝化生成产物32（见试验阶段验证regiospecificity的细节），然后加氢生成胺33。温和重氮化条件下，氨基吲哚转化为芳香叠氮化合物34。叠氮化物通过甲酰化得到35，35与4-乙酰吡啶的浓缩产生36——5叠氮MIPP。此外，对2-甲基-5-甲氧基吲哚进行相同反应步骤，其中硝化反应主要生成6-硝化产品37。按照相同的序列完成以上所述的反应步骤就得到41——6叠氮MOMIPP。36（5-叠氮MIPP）和41（6-叠氮MOMIPP）的生物活性评价表明通过判别U251细胞中细胞空泡（图6a）形成和集落形成的抑制作用（图6B，C），这两种化合物保留了诱导methuosis的活性。虽然比不上MOMIPP，5-叠氮化合物在其生物活性方面明显优于6叠氮化合物。\o"OpenFigureViewer"Figure6.ComparisonoftheeffectsofMOMIPP(compound19),5-azido-MIPP(compound36),and6-azido-MOMIPP(compound41)onmorphologyandviabilityofU251glioblastomacells.(A)Theindicatedcompoundswereaddedtothecellsatconcentrationsof2.5or10μM,andthecellswereobservedbyphase-contrastmicroscopyafter48h.(BandC)U251cellsweretreatedwithvaryingconcentrationsoftheindicatedcompoundsfor48h,andlong-termcellviabilitywasassessedbycolony-formingassays.Eachrepresentsthecountsfromthreedishes(mean±SD),withtheresultsexpressedaspercentofthemeanfromparallelcontroldishestreatedwithanequivalentvolumeofvehiclealone(DMSO).讨论

--------------------------------------------------------------------------------methuosis是一种新发现的非细胞凋亡的形式，由胞吞胞吐贩运形式的改变引发，进而导致大量细胞空泡化和细胞代谢的完整性破坏。这里，我们描述了类似查耳酮的小分子MIPP，它能够在GBM和其他肿瘤细胞株中诱导methuosis。在这里，我们呈现了旨在对被称为MOMIPP的5-甲氧基类似物鉴定的SAR研究，这种化合物在细胞培养系统展示了更好的效能和稳定性。我们也制造了有活性的叠氮化合物，可能有助于未来旨在识别MOMIPP的蛋白质受体方面的研究。在为SAR研究服务的化合物库形成过程中，我们进行了各种indole-3-carboxaldehydes和芳香酮在哌啶催化下的Claisen-Schmidt缩合反应，从而能有效提供吲哚查耳酮。由于哌啶作为一种催化剂，我们起初在具有催化作用的大量哌啶的条件下进行了醛缩合。然而，当过量使用哌啶时，我们通常观察到更高的产量。在几乎所有情况中，产品从溶液中析出，然后用简单冲洗的方法很容易的从多余的催化剂（或起始原料）中纯化出来。我们的SAR研究在探求这一类具有诱导methuosis活性的化合物需要什么分子特征方面提供了一些有益的启示。首先，关于吲哚环，氮的甲基化（化合物20）或去除2-甲基（化合物13）降低但并未消除活性。在5位，不同的修改有相反的结果。5-甲氧基化合物（19岁，MOMIPP的）活性大大提高，而5-苄（化合物14）与经取代的MIPP类似。相反，用OH（化合物21），P-甲基苄氧基酯（化合物26）和P-羧基苄氧基（化合物27）修改5位都造成活性的重大损失。总之，这些研究结果表明，未来尝试进一步提高效能，创造更多的水溶性衍生物，或将这些化合物附在亲和基质，吲哚环上的这些位置存在的灵活性是用的。关于第二个芳基查耳酮架构系统，我们了解到，吡啶环的对位氮定位对活性是至关重要的。像2-吡啶（化合物10），3-吡啶（化合物11和16），吡嗪（化合物17），或苯基类似物（化合物9）这些类似物是无效的。在对MOMIPP以methuosis诱导细胞死亡的潜在机制的思考中，一种可能性是，它可以作为亲电试剂（即迈克尔受体）。亲电基团使具有亲电基团的内在基质变为细胞亲核试剂，他们在药物设计上不常使用，因为他们可以随意修改许多生物大分子。这可能会导致脱靶效应，包括阳性半抗原的形成。在表1总结的SAR研究显示，虽然在我们的系列中的许多化合物具有α，β-不饱和酮支架，也公认能作为迈克尔受体，但只有MOMIPP和其他一些化合物能在微摩尔浓度下成为methuosis有效诱导剂。因此，MOMIPP不大可能通过蛋白质的亲电改造诱导细胞死亡。它仍然是有可能的，MOMIPP可作为一个特定目标的迈克尔受体运作，并带有与特定的蛋白质构成的中介结合体分子的某些功能，并且在这里，邻近的α，β-不饱和酮的亲核残基（如半胱氨酸）可能促进共价性改造。这种特定蛋白质修改的例子已有过报道，化合物在革兰氏阳性菌中结合到受体蛋白ERBB2，（29）TRPA1离子通道，核蛋白质KSRP/FUBP2，（31）（30）和sortase酶中。这些类型的观测促使了人们对那些通过对其特定受体的共价性改造而起效的药物的兴趣的普遍高涨。被广泛归类为查耳酮的化合物已被证明通过多种机制表现出抗癌活性，包括中断p53与MDM2蛋白或HDM2的相互作用，抑制P-糖蛋白（13，34），（35-37）和中断微管聚合。后者的化合物被设计成许多秋水仙碱的和能结合β-微管蛋白的天然产品combretastatins的类似物。许多出版物已都出版证实查尔酮及相关分子可以作为抗有丝分裂剂，并且在认识他们的SAR方面已取得实质性进展。虽然我们的能诱导methuosis的活性化合物（例如，MOMIPP）可划分为查耳酮类化合物，但其特定的特点与先前所描述的大多数抗有丝分裂的查耳酮类化合物完全不同。，methuosis诱导剂的严格的结构特异性和吲哚和吡啶基团特定取代模式的依赖性，区别了以前报道为抗有丝分裂剂的查耳酮类化合物和MOMIPP。我们观察到有丝分裂阻滞前用这些化合物处理的细胞没有丧失活力（未公布的观察）。相反，大量类似于我们用MOMIPP处理时观察到的胞内空泡在用抗有丝分裂的查耳酮类化合物处理时并没有出现。在文献中描述的所有具有细胞毒性的查耳酮类化合物中，与MOMIPP最相似的那个化合物含有一个连接到3,4,5-三甲氧基苯基基取代的取代吲哚环。然而，我们发现用3,4,5-三甲氧基苯基团更换MOMIPP的4-吡啶时产生一种化合物。在10μM浓度下，我们用这种化合物处理U251细胞48小时，但没有引起明显的细胞空泡化或死亡。这与缺乏足够容纳量来改造4-吡啶-基效果一致，同时也表明先前发现的三甲吲哚查尔酮的细胞毒性作用（14）可能不源于methuosis。在一般情况下，由抗有丝分裂的查耳酮类化合物诱导的细胞死亡被认为是经典细胞凋亡，而不是methuosis。一个可能的例外在一份报告中被指出，报告称一个被称为“C2的”查尔酮的衍生物可诱导胶质瘤细胞以非凋亡的死亡机制死亡，其中涉及自噬泡的积累。然而，我们先前发现，methuosis诱导产生的空泡由胞吞胞吐物和胞内体引起，这与自噬不同。现在排除MOMIPP以与秋水仙碱和相关的查耳酮类似的方式结合微管蛋白的可能性还为时过早，但到目前为止，证据指向表明在研究中所描述的该化合物以不同的机制来触发异常胞吞胞吐，内小体舱溶胀，和非细胞凋亡的细胞死亡。归根结底，这一机制的澄清将取决于MOMIPP及相关化合物（S）的特定的分子靶点的鉴定。MOMIPP的特定受体（S）在未来的进一步鉴定将是十分重要的，主要有以下几个原因：（1）确定的受体（S）的表达水平或活性可能有确定肿瘤的哪种类型对这种化合物最敏感的预测价值，（2）理解MOMIPP针对的蛋白质的功能（S）可能有助于评估对正常细胞的潜在毒性，（3）对受体蛋白（S）的了解将有助于药物结合位点的分析，借此可以提出修改意见，以提高药效或特异性。在这方面，MIPP吲哚环的5位引入光活性叠氮化合物后产生了一种保留了良好的methuosis诱导活性（图6）的衍生物，我们的这项发现提供了几种按照确定的步骤鉴定蛋白质受体的途径。除光活性叠氮化合物36，MOMIPP的核心结构包含两个其他的功能，可能会使其适合用于受体识别研究，从而有可能避开引入一个光活性叠氮化合物的需要。首先，MOMIPP本身可能是光活性的，并能表现出与活跃的苯甲酮相似的作用。MOMIPP的核心支架是伪芳酮的（由于一方包含双乙烯基取代酰胺，而另一个包含一个4-吡啶），并可能会表现出与二苯甲酮类似的光激发化学性质。目前，我们正在寻求实验来表征MOMIPP的内在光反应活性和其插入到其他分子的能力。第二个可能使其适合受体识别MOMIPP的核心结构特征是其亲电的α，β-不饱和酮基，其可能对亲核受体残基的共价改造（如半胱氨酸）也有作用。因此，如果MOMIPP是以共价键结合到靶蛋白（S），有可能光起始剂反应中间体的形成是没有必要的。这种可能性也正在进一步研究。在抗TMZ的GBM细胞以及耐阿霉素药乳腺癌细胞中MOMIPP有效地诱导methuosis。这个关键的发现提出了一种可能性，这种化合物的进一步发展可能会产生有用的治疗药物，它能用于治疗那些对通过诱导细胞凋亡起效的药物有抗药性的癌症。最终，MOMIPP或相关化合物作为抗癌药物的调配将面临一些挑战。初步研究表明，MOMIPP诱发空泡的能力并不仅限于癌细胞（图5E-H的）。然而，对正常HMECs和皮肤成纤维细胞的研究表明，在细胞活性方面，空泡化对迅速分裂的癌细胞造成的后果比正常细胞更严重，尤其当正常细胞进入高密度固定相（图5H）。这就产生了可能性：一个用于对癌细胞选择性影响的治疗窗可能被建立。第二个挑战涉及到MOMIPP和其活性类似物的弱水溶性。然而，类似溶解度问题已经在其他疏水性抗癌药物（如紫杉醇，喜树碱）遇到过，并已通过使用适当的辅料（44）或新型纳米颗粒（45，46）或脂质体（47，48）的方法解决。后者可能提供额外的好处：通过对肿瘤特异性肽或抗体运载工具的表面改性允许非特异性药物有选择性地选择受体。因此，当MOMIPP对抗药性癌细胞的细胞毒性影响及其在体内传递的可用途径的范围呈现时，我们认为MOMIPP可以作为宝贵的原型用于进一步临床前测试。内容总结

（1）对吲哚类查耳酮作为新型非细胞凋亡形式——Methuosis的诱导剂的合成和评价

methuosis是一种新的蛋白酶独立细胞死亡的形式，从胞吞胞吐派生的空泡的大量积累，最终导致细胞脱离底层和破裂

（2）化合物2被分配的缩写是MIPP，即3-（2-甲基-1H-吲哚-3-基）-1-（4-吡啶基）-2-丙烯1

附录资料:不需要的可以自行删除中西药养护技术与方法药品养护-药品养护的概念

药品养护是运用现代科学技术与方法，研究药品储存养护技术和储存药品质量变化规律，防止药品变质，保证药品质量，确保用药安全、有效的一门实用性技术科学。

药品养护-药品养护的基本要求

各种药品的功能是由药物本身性质所决定的，每种药物的内在成分与其他物质一样，时刻在不断运动和变化，这就构成了它在贮藏期间引起变化的内在因素，加上自然条件的影响，必然发生物理、化学以及生物学等变化。而这些相互影响又互为关联的变化，要求人们不仅要了解掌握药品内在质变的形式。同时还需要了解自然条件（如温度、湿度、空气等）变化的规律。

药品养护的各项工作内容都应围绕保证药品储存质量为目标。其主要工作内容有：检查控制在库药品的储存条件，对药品进行定期质量检查，对发现的问题及时采取有效的处理措施。

药品养护是一项涉及到质量管理、仓储保管、业务经营等方面的综合性工作，按照工作性质及岗位职责的不同，要求各相关岗位必须相互协调与配合，保证药品养护工作的有效开展。

质量管理人员负责对药品养护人员进行业务指导，审定药品养护工作计划，确定重点养护品种，对药品养护人员上报的质量问题进行分析并确定处理措施，对养护工作的开展情况实施监督考核。

养护人员负责指导保管人员对药品进行合理储存，定期检查在库药品储存条件及库存药品质量，针对药品的储存特性采取科学有效的养护方法，定期汇总、分析和上报药品养护质量信息，负责验收养护储存仪器设备的管理工作，建立药品养护档案。

药品的储存质量是受储存环境和药品性状的制约和影响。在实际工作中，应根据经营药品的品种结构、药品储存条件的要求、自然环境的变化、监督管理的要求，在确保日常养护工作有效开展的基础上，将部分药品确定为重点养护品种，采取有针对性的养护方法。

重点养护品种范围一般包括：主营品种、首营品种、质量性状不稳定的品种、有特殊储存要求的品种、储存时间较长的品种、近期内发生过质量问题的品种及药监部门重点监控的品种。

养护员按照“三三四”原则，每月对在库药品质量（药店陈列药品）进行巡回检查，并做好养护检查记录。

（三三四原则全称应该叫做：三三四药品质量循环检查法。方法是将在库药品分为A、B、C3类，每类分别占总库存的30%、30%、40%左右，然后每个月检查一类，3个月就可将在库药品检查完一遍，总计1年检查4遍。）

中药的采购与贮藏与养护

第一节中药饮片的采购和验收

验收药品应当做好验收记录，包括药品的通用名称、剂型、规格、批准文号、批号、生产日期、有效期、生产厂商、供货单位、到货数量、到货日期、验收合格数量、验收结果等内容。验收人员应当在验收记录上签署姓名和验收日期。

中药材验收记录应当包括品名、产地、供货单位、到货数量、验收合格数量等内容。中药饮片验收记录应当包括品名、规格、批号、产地、生产日期、生产厂商、供货单位、到货数量、验收合格数量等内容，实施批准文号管理的中药饮片还应当记录批准文号。

第二节中药的质量变异现象

一、饮片贮存中常见的质量变异现象

1.虫蛀：含淀粉、糖、脂肪、蛋白质

大黄、白芷、桑螵蛸、北沙参、娑罗子、前胡

虫蛀大白纸，桑蛸杀娑湖

2.泛油：含挥发油：当归、丁香

含脂肪油：柏子仁、桃仁、杏仁

含糖：牛膝、麦冬、天冬、熟地、黄精

白（柏）杏归香桃，二冬赎（熟）精牛

3.霉变：陈皮、独活、前胡、佛手

4.变色

由浅变深：泽泻、白芷、山药、天花粉

由深变浅：黄芪、黄柏

由鲜艳变暗淡：红花、菊花、金银花、腊梅花

5.气味散失：肉桂、沉香、豆蔻、砂仁

6.风化：胆矾、硼砂、芒硝

7.潮解：青盐、咸秋石、芒硝

8.粘连：芦荟、没药、乳香、阿魏、鹿角胶、龟甲胶

9.腐烂：鲜类药

二、中成药贮存中常见质量变异现象

虫蛀：蜜丸、水丸、散剂、茶曲剂

霉变：蜜丸、膏滋、片剂

酸败：合剂、酒剂、煎膏剂、糖浆剂、软膏剂

挥发：芳香水剂、酊剂

沉淀：药酒、口服液、针剂

第三节引起中药质量变异的因素

一、自身因素（6个）

1.水分---高：虫蛀、霉烂、潮解、软化、粘连

低：风化、走味、泛油、干裂、脆化

2.淀粉---虫蛀、霉变

3.黏液质---发霉、生虫

4.油脂---产生异味：桃仁、杏仁

引起酸败现象：刺猬皮、狗肾

5.挥发油---气味散失：白芷、当归、荆芥、薄荷、肉桂、樟脑、姜黄、山奈

6.色素---发霉变色：月季花、玫瑰花

二、环境因素（8个）

1.温度---生虫、发霉；水分蒸发；气味散失；成分变化；酸败泛油；黏结成块

2.湿度---贮存仓库的相对湿度最好控制在70%以下

---高：吸潮变质；低：风化

3.日光---变色、气味散失、挥发、风化、泛油

4.空气---泛油、虫蛀、霉变

5.霉菌---霉变、腐烂变质

6.害虫---虫蛀

7.包装容器

8.贮存时间

第四节中药的贮存与养护

一、中药材和饮片的贮藏

■饮片库房室温控制在25℃以下，相对湿度75%以下

■阴凉干燥处：含挥发油类（薄荷、当归、川芎、荆芥）

■凉爽处：矿物类（硼砂、芒硝）

■石灰保存：牛黄、人参

■易燃物品：硫黄、火硝、樟脑

■毒性药品：单独存放

■密封保存：动物类、矿物类

二、中药材和饮片的养护

1.传统养护技术（6个）

清洁养护法、除湿养护法、密封（密闭）养护法、低温养护法、对抗同贮法、高温养护法

■清洁养护法：清洁卫生是防止仓虫入侵的最基本和最有效的方法

■除湿养护法：

1.通风法

2.吸湿防潮法：生石灰块、无水氯化钙

■密封（密闭）养护法：是贮藏的基本方法

■低温养护法：2～10℃，具有防霉、防虫、防变色、防走油，主要用于贵重药材保存，如哈蟆油、银耳、人参、菊花、陈皮、山药、枸杞子（＜-4℃可使害虫致死）

■高温同贮法：可有效防治虫害的侵袭。高于40℃害虫停止发育，高于50℃，害虫将在短时间死亡。含挥发油的饮片烘烤温度不宜超过60℃

对抗同贮法

2.现代养护技术（8个）

干燥养护技术

气调养护技术

60Co-γ射线辐射杀虫灭菌养护技术

包装防霉养护法

气幕防潮养护技术

蒸气加热养护技术

气体灭菌养护技术

中药挥发油熏蒸防霉技术

三、中成药的养护

应密闭贮存：散剂、胶剂、膏药、软膏、鼻用制剂、栓剂、凝胶剂

应密封贮存：丸剂、片剂、煎膏剂、合剂、颗粒剂、胶囊剂、糖浆剂、注射剂、酒剂、露剂

温度低于30℃的剂型：胶囊剂、栓剂

遮光：软膏剂、注射剂、酊剂、流浸膏与浸膏剂、凝胶剂、眼用制剂

四、中国药典凡例

遮光：用不透光的容器包装

密闭：防止尘土及异物进入

密封：防止风化、吸潮、挥发或异物进入

熔封或严封：防止空气和水分侵入，防止污染

阴凉处：不超过20℃

凉暗处：避光并不超过20℃

冷处：2～10℃

常温：10～30℃

检查日期、药品名称、剂型、规格、单位、数量、生产厂家、批号、批准文号、有效期、质量状况、养护措施、处理结果。

养护员：

表格中除：检查日期、质量状况、养护措施、处理结果、养护员栏要手工填写外，其余电脑自动可生成。

检查日期：从打印时间开始填写至下月几号为止，看有多少页平均后连续填写时间也可，但不能填写一样的时间；

质量状况：填写“无异常”；

养护措施：可填写“效期催销”、“翻垛”、“通风”等，视具体需要养护情况而定；

处理结果：“继续销售”；

养护员：要签完整名字。

二）养护工作的具体实施

1、养护储存的合理性

药品养护员在日常管理过程中，应对在库药品的分类储存、货垛码放、垛位间距、色标管理等工作内容进行巡查，及时纠正发现的问题，确保药品按规定的要求合理储存。

2、仓储条件监测与控制

药品仓储条件的监测与控制内容主要包括：库内温湿度、药品储存设备的适宜性，药品避光和防鼠等措施的有效性、安全措施的运行状态。

为保证各类库房的温、湿度符合规定的要求，仓库保管人员要在养护员的指导下，有效地对库房温、湿度条件进行动态监测和管理，发现库房温湿度超出规定范围或接近临界值时，或接近临界值时，应及时采取通风、降温、除湿、保温等措施进行有效调控，并予以记录。对库房的温、湿度条件应定时进行观察记录，一般每日上、下午各一次。

为确保仓库温湿度条件的全天候监控，药品控制企业在节假日也应安排值班人员，对仓库的储存条件进行监控。

3、库存药品质量的循环检查

养护员应按照规定的方法和要求，定期对库存药品的质量状况进行循环检查，循环养护检查一般按季度进行。购进药品应在入库后三个月起进行第一次库存药品检查。养护时应做好养护记录，对养护中的药品质量状况进行准确的记录。

当气候条件出现异常变化，遇高温、严寒、雨季或发现药品有质量变化迹象时，应由质量管理部组织有关人员或全面检查；为避免漏查，应严格规定检查顺序，如：按每个货架、货垛顺时针检查等；主要检查内容包括包装情况、外观性状，对易变质药品、储存期较长、近效期不足一年的药品或其它应检查的药品，应按规定的程序和要求进行有效的管理。

4、养护中发现质量问题的处理

药品养护中发现的问题一般包括技术操作、设施设备、药品质量等方面的内容，养护员应对发现的问题进行认真的分析，及时上报质量管理部核实、处理，按照质量管理部的要求，采取措施对质量管理过程实施改进，从而有效地控制药品储存质量。

养护员对养护过程中发现的药品质量问题，应悬挂醒目的黄色标牌，并暂停发货，上报质量管理机构进行处理。

（三）药品养护档案与信息

为给药品养护工作提供系统、全面的管理依据，不断提高药品养护的技术水平，企业应针对重点养护品种建立药品养护档案，收集、分析、传递养护过程中的信息资料，从而保证药品养护质量系统的有效运行。

1、药品养护档案

企业应结合仓储管理的实际，本着"以保证药品质量为前提，以服务业务经营需要为目标"的原则，针对重点养护品种建立药品重点养护品种建立药品养护档案。药品养护档案是在一定的经营周期内，对药品储存质量的稳定性进行连续观察与监控，总结养护经验，改进养护方法，积累技术资料的管理手段。其内容包括药品的基本质量信息、观察周期内对药品储存质量的追踪记录、有关问题的处理情况等。药品养护档案的品种应根据业务经营活动的变化，及时调整，一般应按年度调整确定。

2、养护质量信息

按照GSP规定，药品养护人员应定期汇总、分析和上报养护检查、近效期或长时间储存的药品的质量信息。以便质量管理部门和业务部门及时、全面地掌握储存药品质量信息，合理调节库存药品的数量，保证经营药品符合质量要求，其报告内容应汇总该经营周期内经营品种的结构、数量、批次等项目，统计并分析储存养护工程中发现的质量问题的相关指标，如质量问题产生的原因、比率，进而提出养护工作改进的措施及目标。

（四）、影响药品质量的因素

1、影响药品质量的内在因素

a、易水解的药品当药品的化学结构中含有酯、酰胺、酰肼、醚、苷键时，易发生水解反应。如青霉素的分子中含有β-内酰胺环，在酸性、中性或碱性溶液中易发生分解反应和分子重排反应，其分解产物与分子重排物均无抗菌作用。故青霉素只能制成粉末，严封于容器中贮藏。

b、易被氧化的药品当药品的化学结构中含有酚羟基、巯基、香胺、不饱和碳键、醇、醚、醛、吡唑酮、吩噻嗪等基团时，易发生氧化反应。如氯丙嗪属于吩噻嗪类化合物，在日光、空气、湿气的作用下易变质失效，故应遮光，密封保存。

2、药品的物理性质与质量的关系

a、挥发性系指液态药品能变为气态扩散到空气中的性质。具有挥发性的药品如果包装不严或贮存时的温度过高，可造成挥发减量，如乙醇、薄荷等在常温下即有强烈的挥发性，还可以引起燃烧和爆炸。

b、吸湿性系指药品自外界空气中不同程度地吸附水蒸气的性质。药品的吸湿性并不限于水溶性药品，某些高分子药品和水不溶性药品同样可以吸湿,但当含有少量的氯化镁等杂质时，则表现出显著的吸湿性。

c、吸附性药品能够吸收空气中的有害气体或特殊臭气的性质被称为药品的吸附性。例如淀粉、药用碳、滑石粉等因表面积大而具有显著的吸附作用