饮食行业益生菌制品的质量控制与审批程序

益生菌制品的

质量控制与审批程序

中国疾病预防控制中心营养与食品安全所益生菌ProbioticsPRO-BIOTICS

meansForlife

益生菌意味着“为了生命”FAO/WHO益生菌的定义

益生菌是活的微生物，通过摄入足够数量，对宿主起有益健康的作用。FAO/WHO—Probioticsare:“

Livemicroorganismswhichwhenadministeredinadequateamountsconferahealthbenefitonthehost

”益生菌－益生菌是活的微生物，通过摄入足够数量，对宿主产生一种或多种特殊且经论证的功能性健康益处。（欧洲食品与饲料菌种协会2002）PROBIOTICS－Probioticsarelivingmicroorganisms,whichwheningestedorlocallyappliedsufficientnumbers,haveoneormorespecifieddemonstratedfunctionalhealthbenefits

forthehost(EFFCA2002)我国有关益生菌的定义：益生菌是指对人和动植物有益的菌。由益生菌生产的产品称为益生菌制品，包括活菌体、死菌体、菌体成分及代谢产物。益生菌的应用食品、功能性食品、膳食补充剂药品、饲料、化妆品益生菌制品作为膳食补充剂（foodsupplements）有粉剂、胶囊或片剂乳酸菌Lacticacidbacteria是指能发酵糖和其它碳水化合物，产生大量乳酸的细菌的通称。美国功能性食品市场每年以15~20%的速度增长,产值达33亿美元。日本保健食品销售额20世纪90年代初达4000亿日元。（Berner&O’Donnell,1998）美国主主要的的功能能食（Berner&O’Donnell,1998）添加植物成成分或植物物提取物抗氧化、降降低心血管管疾病的危危险、降低低癌症发发生的危险险、降低高高血压的危危险添加生物活活性肽提高免疫系系统的功能能、提高矿矿物质的活活性等添加膳食纤纤维预防便秘、、降低肠癌癌发生的危危险、降低低血中胆固固醇添加ω-3多不饱饱和脂肪酸酸降低心脏病病发作的危危险、降低低某些癌症症发生的危危险、提高高免疫系统统功能等；；添加益生菌菌(probiotics)改善胃肠道道功能、提提高免疫系系统功能、、降低肠癌癌发生的危危险添加益生原原（prebiotics））改善胃肠道道功能、提提高免疫系系统功能、、降低肠癌癌发生的危危险常用的益生生菌双歧杆菌（（Bifidobacterium）乳杆菌（Lactobacillus）世界上有70多种含含双歧杆菌菌和乳杆菌菌的产品，，包括酸奶奶、奶粉和和冷冻甜点点等。日本有50多种含有有益生菌的的不同形式式的奶制品品欧洲酸奶对益生菌菌菌种的基本本要求1首先先而且最重重要的是安安全性必须来自人人体或食品品有长期安全全使用历史史2生产产菌种的质质量控制3有实实验证明具具有声称的的功能中国的益生生菌类保健健食品调节肠道菌菌群增强免疫力力从1997年至2004年一一共做了28个产品品，16个个含双歧歧杆菌、9个含乳杆杆菌。剂型型包括粉剂剂、胶囊、、片剂、口口服液。大大部分产品品声称菌数数可达108~1011cfu/g(ml)，经检测测菌数可以以达到108cfu/g(ml)，液体体产品也可可达到106cfu/g(ml)。常用的益生生菌菌种（Berner&O’Donnel1998）菌种种菌菌株株嗜酸乳杆菌菌LactobacillusacidophilusLa1等保加利亚乳乳杆菌LactobacillusbulgaricusLb12乳乳杆菌LactobacilluslactisLa1植物乳杆菌菌Lactobacillusplatarum299v,LpO1鼠李李糖糖乳乳杆杆菌菌LactobacillusrhamnosusGG,GR-1罗伊伊氏氏乳乳杆杆菌菌LactobacillusreuteriSD2112干酪酪乳乳杆杆菌菌LactobacilluscaseiShirota,744类干酪乳杆菌菌LactobacillusparacaseiCRL431发酵乳杆菌LactobacillusfermentumRC-IRC瑞士乳杆菌LactobacillushelvertiucsBO2菌种菌菌株株青春双歧杆菌菌-Bifidobacteriumadolescents长双歧杆菌B.longumB536,SBT-2928短双歧杆菌B.breveYakult两双歧杆菌B.bifidusBb-11乳双歧杆菌B.lactisBb-02婴儿双歧杆菌菌B.infantisShirotaImmunitassB.EssensisDanone,(BioActivia)B.LaterosporusCRL431枯草芽孢杆菌菌Bacillussubtilis-双歧杆菌和乳乳杆菌的安全全性问题认为是安全的的理由健康人体的肠肠道和泌尿-生殖道粘膜膜中数量相当当高极罕见与疾病病有关认为有安全性性问题的理由由除干酪乳杆菌菌（LactobacillusceseiShirota）和嗜酸酸乳杆菌（L.acidophilusNCFM）有几百年年的安全使用用历史外，大大部分益生菌菌没有安全使使用历史。2001年10月1日-10月4日日FAO/WHO专家委员员会在阿根廷廷科尔多瓦就就评价食品中中含活的益生生菌有关健康康及营养问题题召开会议。。会议认为有必必要建立评价价食品用益生生菌的系统方方法指南，以以确定其健康康声称。为建立益生菌菌的评价指南南、推荐指标标和方法成立FAO/WHO联合合专家工作组组规定了确定健健康声称应提提供的资料目的是制定对对益生菌的最最低要求主要指食品用用益生菌，排排除治疗用生生物制剂和基基因修饰的生生物2002年4月30日-5月1日日在加拿大安安大略省伦敦敦市FAO/WHO联合合专家工作组组起草了《食品中益生菌菌的评价指南南GuidelinesfortheEvaluationofProbioticinFood》1确定益益生菌的属/种/株用表型和基因因分型方法进进行株的鉴别益生菌的有益益作用有株的的特异性按国际菌种保保藏法保存菌菌株2功能能学特征体外试试验胃酸耐耐受试试验、、胆汁耐耐受性性、粘膜粘粘附性性和／／或人人上皮皮细胞胞粘附附性对条件件致病病菌的的抗菌菌活性性降低致致病菌菌表面面粘附附能力力胆盐水水解酶酶活性性动物试试验益生菌菌的安安全性性问题题全身感感染有毒代代谢活活性易感人人群过过度的的免疫疫刺激激基因转转移FAO/WHO专家家工作作组对对益生生菌进进行安安全性性评价价的建建议抗菌素素耐药药性类类型的的测定定某些代代谢活活性（（D-乳酸酸盐的产生生、胆胆盐非非共价价键结结合）的的评价价对人体体副作作用的的评价价售后消消费者者不良良反应应的流行病病学调调查如待评评价的的菌株株属于于已知知对哺哺乳动动物物有毒毒性的的产毒毒菌种种，必必须测测定其其产毒毒能力力待评价价的菌菌株属属于已已知具具有溶溶血性性，必必须测测定其其溶血血活性性我国益益生菌菌产品品安全性性评价价与质质量控控制益生菌菌作为为一类类生物物活性性制品品，必须安安全、、有效效、稳稳定，，益生生菌类保健健食品品的生生产加加工有有其自自身的特殊殊性，，如为为了使使终产产品中中存在一定定数量量的益益生菌菌活菌菌体，，产品不能能进行行消毒毒灭菌菌。因因此加加强其质质量量管管理理确确保保产产品品质质量量尤尤为为重重要。。菌种种安安全全性性要要求求生物物学学、、遗遗传传学学、、功功效效学学特特性性明明确和和稳稳定定。。菌种种及及其其代代谢谢产产物物必必须须无无毒毒无无害害。。来源源及及国国内内外外安安全全食食用用资资料料。。安全全性性评评价价资资料料（（包包括括毒毒力力试试验验））。。生产产菌菌种种的的质质量量控控制制建立立种种子子库库一旦旦确确定定某某一一菌菌种种作作为为生生产产用用菌菌种种，，应应建建立菌菌种种库库以以确确保保为为每每次次生生产产提提供供充充足足的的、、性状状稳稳定定的的菌菌种种，，以以避避免免或或减减少少菌菌种种的的污污染及及因因菌菌种种传传代代过过多多而而导导致致遗遗传传变变异异。。一一般需需要要建建立立三三级级菌菌种种库库，，即即原原代代（（原原始始））种子子库库、、主主代代（（主主））种种子子库库和和生生产产（（工工作作））种子子库库。。原代代种种子子库库—指经经研研究究、、筛筛选选、、鉴鉴定定后后确定定为为食食品品用用益益生生菌菌制制品品生生产产用用菌菌种种，，经经扩大大一一代代后后冷冷冻冻干干燥燥一一定定数数量量的的单单支支菌菌种种作为为种种子子，，2～～8℃保存存，，一一般般定定0代代。。主代代种种子子库库—原代代种种子子经经扩扩大大培培养养得得到到均匀匀的的，，冷冷冻冻干干燥燥制制成成一一定定数数量量的的单单支支菌菌种，，作作为为制制备备生生产产种种子子库库的的菌菌种种，，2～～8℃保存存。。主主代代种种子子一一般般采采用用1～～3代代。。生产产种种子子库库—主代代种种子子经经扩扩大大培培养养得得到的的均均匀匀培培养养物物，，冷冷冻冻干干燥燥制制成成一一定定数量量的的单单支支菌菌种种，，2～～8℃保存，或或悬浮于特定定培养液液（保护护液），，分装安安培置–70℃以下保存存。每生生产一批批产品用一只菌菌种，用用于生产产之前要要进行部部分项目的的检定，，合格后后方可使使用，生生产种子一一般采用用3～5代。《益生菌类类保健食食品审评评规定（试试行）》第二条益益生菌类类保健食食品系指指能够促促进肠内内菌群生生态平衡衡，对人人体起有有益作用用的微生生态产品品。第三条益益生菌菌菌种必须须是人体体正常菌菌群的成成员，可可利用其其活菌、、死菌及及其代谢谢产物。。益生菌类类保健食食品必须须安全可可靠，即即食用安安全，无无不良反反应；生生产用菌菌种的生生物学、、遗传学学、功效效学特性性明确和和稳定。。第四条可可用于保保健食品品的益生生菌菌种种名单由国国家食品品药品监监督管理理局公布布。第五条国国家食品品药品监监督管理理局对保保健食品的的益生菌菌菌种鉴鉴定单位位进行认认定或认可，菌菌种鉴定定单位的的名单由由国家食食品药品监督管管理局公公布。益生菌类类保健食食品的菌菌种鉴定定工作应应在国家食品品药品监监督管理理局认定定或认可可的鉴定单位进进行。第六条申申请益生生菌类保保健食品品，除按按保健食品品有关规规定提交交申报资资料外，，还应提供以下下资料：：1、产品品配方及及配方依依据中应应包括确确定的菌菌种属名名、种名名及菌株株号。菌菌种的属属名、种种名应有有对应的的拉丁学学名。举例：长双双歧杆菌Bifidobacterium.longumB5362、菌种的的培养条件件（培养基基、培养温温度等）。。3、菌种来来源及国内内外安全食食用资料4、国家食食品药品监监督管理局局认定或认认可的鉴定定机构出具具的菌种鉴鉴定报告。。5、菌种的的安全性评评价资料（（包括毒力力试验）。。6、菌种的的保藏方法法7、对经过过驯化、诱诱变的菌种种，应提供供驯化、诱诱变的方法法及驯化剂剂、诱变剂剂等资料。。8、以死菌菌和／或其其代谢产物物为主要功功能因子的的保健食品品应提供功功能因子或或特征成分分的名称和和检验方法法。9、生产企企业的技术术规范和技技术保证。。10、企业业生产条件件符合《保健食品生生产良好规范》的证明文件件。申请注册的的保健食品品，使用《可用于保健健食品的益生菌菌菌种名单单》之外的益生生菌菌种的的，还应提供菌种种具有功效效作用的研研究报告、、相关文献献资料和菌种种及其代谢谢产物不产产生任何有有毒有害作作用的资料。。由国家食食品药品监监督管理局局组织相关关专业的专家家对菌种的的食用安全全性和功能能依据进行行评价后，在在按保健食食品的评审审程序进行行评审。第七条申申请人够买买活菌种冻冻干粉直接接生产保健健食品，生生产加工工工艺只是混混合、灌装装过程，本本规定第六六条第5项项至第10项的资料料可由菌种种冻干粉原原料供应商商提供复印印件（加盖盖原料供应应商公章））并提供购购销凭证。经过长期保保藏的菌种种，由于种种种原因常常易发生变变异、衰退或或死亡。变变异是生物物基本特性性之一，当当菌种处在新新陈代谢水水平最低的的生活环境境之中，生生长繁殖受到到外界抑制制变为停滞滞状态，往往往更容易易发生变异。。因此各类类菌种在保保藏期间必必须定期检检查，采取措措施防止衰衰退、变异异或死亡，，发现变异异或衰退时能能及时恢复复。第八条申申请注注册的用于于益生菌类类保健食品品生产的菌菌种应满足足以下条件件：1、保健食品生生产用菌种种应采用种种子批系统统。原始种种子批应验验明其记录录、历史、、来源和生生物学特性性。从原始始种子批传传代、扩增增后保存的的为主种子子批。从主主种子传代代、扩增后后保存的为为工作种子子批。工作作种子批的的生物学性性状应与原原始种子批批一致，每每批主种子子批和工作作种子批均均应按规程程要求保管管、检定和和使用。在在适宜的培培养基上主主种子传代代不超过10代，工工作种子传传代不超过过5代。2、试制单单位应有专专门的部门门和人员管管理生产菌菌种，建立立菌种档案案资料，内内容包括菌菌种的来源源、历史、、筛选、检检定、保存存方法、数数量、开启启使用、等等完整的记记录。每年年向所在地地省级食品品药品监督督管理部门门书面汇报报管理情况况。3、菌种及及其代谢产产物必须无无毒无害，，不得在生生产用培养养基内加入入有毒有害害物质和致致敏性物质质。4、从活菌菌类益生菌菌保健食品品中应能分分离出与报报批和标识识菌种一致致的活菌。。第九条试试制益益生菌类保保健食品的的场所应具具备以下条条件：1、建立良良好生产规规范（GMP），并并逐步建立立危害分析析关键控制制典（HACCP））质量保证证体系。2、具备中中试生产规规模，即每每日至少可可生产500L3的生产能力力，并以中中试产品报报批。3、必须有有专门的厂厂房或车间间、有专用用的生产设设备和设施施；必须配配备益生菌菌实验室，，菌种必须须有专人管管理，应由由具有中级级以上技术术职称的细细菌专业的的技术人员员负责；制制订相应的的详细技术术规范和技技术保证。。第十条生生产用用菌种及生生产工艺不不得变更。。第十一条不不提提倡以液态态形式生产产益生菌类类保健食品品活菌产品品。第十二二条活活菌菌类益益生菌菌保健健食品品在其其保质质期内内活菌菌数不不得少少于106cfu/mL(g)。第十三三条益益生生菌类类保健健食品品如需需在特特殊条条件下下保存存，应应在标标签和和说明明书中中标示示。第十四四条所所用益益生菌菌菌种种在其其发酵酵过程程中，，除培培养基基外，，不得得加入入具有有功效效成分分的动动植物物及其其它物物质。。第十五五条经经过过基因因修饰饰的菌菌种不不得用用于保保健食食品。。第十十六六条条本本规规定定由由国国家家食食品品药药品品监监督督管管理理局局负负责责解解释释。。第十十七七条条本本规规定定自自发发布布之之日日起起实实施施。。以以往往发发布布的的规规定定，，与与本本规规定定不不符符的的，，以以本本规规定定为为准准。。可用用于于保保健健食食品品的的菌菌种种名名单单两歧歧双双歧歧杆杆菌菌Bifidobacteriumbifidum婴儿儿双双歧歧杆杆菌菌B.infantis长双双歧歧杆杆菌菌B.longum短双双歧歧杆杆菌菌B.breve青春春双双歧歧杆杆菌菌B.adolescentis保加加利利亚亚乳乳杆杆菌菌Lactobacillusbulgaricus嗜酸酸乳乳杆杆菌菌L.acidophilus干酪酪乳乳杆杆菌菌干干酪酪亚亚种种L.caseisubsp.casei嗜热热链链球球菌菌Streptococcusthermophilus罗伊伊氏氏乳乳杆杆菌菌L.reuteri益生生菌菌菌菌种种鉴鉴定定单单位位名