抑胶素对大鼠脑胶质瘤增殖细胞核抗原表达的影响

DOC格式论文，方便您的复制修改删减DOC格式论文，方便您的复制修改删减抑胶素对大鼠脑胶质瘤增殖细胞核抗原表达的影响（作者: 单: 邮: ）作者：姜慧轶林卫红马涤辉刘仕成崔俐方法采用鼠脑立体定向的方法建立大鼠脑胶质瘤动物模型并进行分组：抑胶素不同浓度实验组(Ⅰ：8μ;Ⅱ：6μ;Ⅲ：2μμg/kg14d(PCNA)的表达，观察瘤细胞增殖变化情C6脑胶质瘤细胞有显著抑制作用，(P0.05，P0.01);抑胶PCNAPCNA照组相比较有统计学差异(P0.05，P0.01)。结论抑胶素能够抑制大鼠脑胶质瘤体内生长。其机制之一可能与胶质瘤内PCNA表达，使肿瘤细胞增殖水平下降有关。【关键词】抑胶素;脑胶质瘤;增殖细胞核抗原神经胶质瘤是发生于神经外胚层的肿瘤，是颅内肿瘤中最常见的一(antigliomatin)作为一种特异性氯离子通道阻滞剂，是一材料与方法C6生理教研室提供。动物选用雄性、健康Wistar506～8w200～250g，由高新技术开发区动物中心提供。2C625cm2C610%灭活小牛血清的IMDM置于含5%CO23720.25%胰酶溶Ca2+、Mg2+的磷酸盐缓冲液中消化细胞，在显微镜下观察105minC6(SABC)GFAPC6细胞，细胞浓度为0μ，经MTT法检测细胞存活率达以上。以2.0×106/只鼠的量接种，所有的大鼠均采用立体定向方法进Barker1.2mm，10μl的微量注射器针头锐性刺破硬膜在立体6.0mm，1.0mm5.0mm10μl1μl/min510U5d7dWistar51014d，具体如下：(1)空白)(8μ6μ2μ4μ。4%多聚甲醛固定肿瘤标本，沿脑表接种穿刺点做冠状切口，测量肿=a2×b×π/6(a为肿瘤的短径，为肿瘤的长径)。抑瘤率=(对照组肿瘤的平均体积-实验组肿瘤的平均体积)/对照组肿瘤的平均体积抑制率≥30%为肿瘤对药物敏感。免疫组化染色检测增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白采用SABC1010min。60min。倾去血清，加0稀释的，置湿盒内S冲洗5min×360min。PBS振洗5mi3C0miS振洗5min×4DAB3min。自来水冲洗，酒精水核或(和)胞质中出现棕黄色颗粒为阳性，高倍视野下(400PCNA标记指数(LI)。SPSSst检验。2结果实验大鼠的肿瘤体积和抑瘤率的变化活体灌注4%多聚甲醛固定肿瘤标本，沿脑表接种穿刺点做冠状切口，测量肿瘤大小，算出各实验组的抑制率并与对照组做比较用完全随机设计两总体均数比较的t检验对所测得的肿瘤体积大小进行统计学处理、分析。由表1可以看出：实验组Ⅰ肿瘤体积与对照组相比无统计学意义(t=0.86，P0.05);实验组Ⅱ～Ⅳ与对照组相比有显著差异 (P0.05，P0.01)，并且随抑胶素浓度增大，瘤体积缩小越明显，抑瘤率也随抑胶素浓度增高而增加实验组Ⅰ组与Ⅱ组比较无统计学差其余各组两两比较有显著性差(P0.05)。见表1。PCNA免疫组化结果分析PCNA棕黄色，镜下计数肿瘤内5个视野的阳性细胞。对照组肿瘤细胞中PCNA蛋白阳性表达率平均为72.18%，表现为阳性细胞密度高，胞核呈强阳性，数量多。经抑胶素治疗后即可见肿瘤内PCNA阳性细胞密度下降，核PCNA阳性强度减弱，随浓度增加阳性率呈下降趋势。实验组Ⅱ～ⅣPCNA(P0.05，P0.01PCNA(P0.0511PCNA指数变化与对照组比较：1)P0.05，2)P0.013讨论(chlorotoxin)，有研究表明Cl3;19984〕报125I131IGCC在人体神经胶质瘤细胞中选择性产生，且产生量与肿瘤的恶化程度呈正相关。Sontheimer〔〕将放射性的碘和一种植物毒素连接在氯毒素上，借C6Ⅱ～Ⅳ组与对照组相比有显著差异，并且随抑胶素浓度增大，瘤体积缩小越明显，抑瘤率也随抑胶素浓度增高而增加，提示抑胶素具有抑制肿瘤生长作用。PCNA36kD的多肽，仅在增殖细胞中合成与表达，在细胞周期S期合成最高，是存在于细胞核内的酸性蛋白，S期细胞的标志物。PCNAPCNA,意味着处于S6PCNA,它对肿瘤的治疗及预后的判断有重要意义。PCNA阳性细胞密度下降，核PCNA阳性强度减弱，随浓度增加阳性率呈下降趋Ⅱ～ⅣPCNA组PCNA蛋白表达比较无统计学意义。推测抑胶素抑制肿瘤增殖的PCNA合成与表达，从而也就抑制了DNA此阻止肿瘤细胞质和细胞核的复制，抑制细胞有丝分裂。本研究明确了抑胶素对脑胶质瘤细胞的抑制、杀伤作用，并且其作用机制之一可能与抑制PCNA发应用提供了实验依据。【参考文献】1崔俐，林卫红，姜慧轶，等.抑胶素对大鼠胶质瘤的抑瘤效应及对神经细胞黏附分子的影响〔J〕.中风与神经疾病杂志，2005;22(2)：12830.2.C6胶质瘤细胞P16J.2.3UllrichN,SontheimerH.Biophysicalandpharmacologycalcharacterizationofchloridecurrentsinhumanastrocytomacells〔J〕.AmJPhysiol，1996;270:C151121.SoroceanuL,GillespieGY，KhazaeliMB,etal.Useofchlorotoxinfortargetingofprimarybrain〔J〕.CancerRes，1998;58：48719.UllrichN,SontheimerH.Expressionofvoltageactivatedchloridecurrentsinacuteslicesofhumangliomas〔J〕.Neuroscience，1998;83(4):13613.KorkolopoulouP,ChristodoulouP,Lekk