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文档简介
Histology
Introduction
YuXiangmin(于向民)DepartmentofHistologyandEmbryologyDefinition:
Ascience:studynormalmicro-structure(微细结构)&itsrelatedfunctionofhumanbody.
4structurallevels:
Cell:thesmalleststructural&functionalunit.
Tissue(组织):
groupsof
cells(similarinmorphologyorrelatedinfunction)+intercellularmaterials
4typesoffundamentaltissue
epithelium上皮组织
connectivetissue结缔组织
musculartissue肌组织
nervoustissue神经组织
Organs:器官organizationsof
variouskindsoftissuesinparticularways&performaspecific
function.
System:系统formedbyseveralfunction-relatedorganswhichtogetherperformacontinuousphysiologicalfunction.Forexample:digestivesystem
Whydowestudyhistology?Tocompletetheknowledgeofhumanbody’sstructures----fromgrosstomicroscopicBeabletounderstandhowthedifferenttissuesfunction----thebasisofphysiologyCanfindthediseasesonlyafterthenormalisknown----thebasisofpathologyItisalsoafoundationofclinicsciences—foragooddoctorneededinfutureInvestigativemethodsofhistologyI.Lightmicroscopy
l
1.Tissuepreparation
A.paraffinsectionpreparation石蜡切片术
Specimen取材:
asfreshaspossible
Fixation固定:fixative:formalinsolution;purpose:topreservethestructuralorganization
Dehydration脱水:replacethewaterinthetissuebyalcohol
Clearing透明:replacethealcoholbyxylene
Embedding包埋:replacethexylenewithmeltedparaffin
Sectioning&mounting切片B.
Frozensection:
Betterforpreservingchemicalcomponents(e.g.enzymes)Freezing→cryostat→stainingC.theothers:Smearpreparations:forbloodetc;Grindpreparations:forbone
2.Staining染色
Purpose:Tomaketissuesectionforobservation.
H-EStaining:
Hematoxylin:苏木精basic
dye,
bluishcolor
Eosin:伊红aciddye,pinkcolor
Basophilic:嗜碱性componentsstainedwithbasicdye(H);bluish(nuclearchromatin)
Acidophilic:嗜酸性componentswithanaffinityforacidicdye(E);pink(cytoplasm&collagenfiber)
Neutrophilic:中性donotstainwithbothbasicandaciddyesArgyrophilia:嗜银性
thosewithanaffinityforsilver,dark-browncolor
Fluorescentstaining
showstheapoptosisinhumanHL-60cellsSilverstainingoftheneuronandthebilecanaliculiTransmissionElectronMicroscope(TEM)透射电镜Usingabeamofelectrons(shortwave-lengths)insteadofvisiblelight.Section
preparation:similartothoseforL.Mmainly,plasticinsteadofparaffin,50-70nmthick,heavymetalsaltsinsteadofHE.
Resolution:0.1-0.5nm
Ultrastructrue:超微结构ThestructureinEM
Electron-dense电子密度高
electron-lucent电子密度低ElectronMicroscopy
TransmissionElectronMicroscope
DiagramsofTEM2.ScanningElectronMicroscope(SEM)扫描电镜Sowingthe3dimensionalsurfaceArchitectureofcellsandtissues
Resolution:5nmJEOL扫描电子显微镜III.
Histochemistry&Cytochemistry
组织化学术
Revealthechemicalcompositioninsitu(teins,a.a.,nucleicacid,lipids,enzymesetc.)withchemical,biochemicalmethods.Theproductofchemicalreactionshouldbeinsoluble/colored/electron-scattering,&beseeninLMorEM
polysaccharide+HIO4
(hydroxylgroup)(oxidise)Aldehydegroup+Shiff’sreagent
(colorless)
PurplishreddepositorForinstance:PAS(PeriodicAcidSchiff)reaction:
formanifestingpolysaccharide多糖(糖原)PASreactioninthegobletcellIV.Immunocytochemistry免疫组织化学Basedonantigenbindstospecificantibody.
TissuesectionwithAntigen+
labelled
antibodylabelledAg-AbcomplexFluoresceinlabellingenzymelabellingcolloidalgold
labellingV.tissueculture组织培养VI.insitu
hybridization(ISH)
—nucleicacidmolecularhybridization原位杂交术UsenucleotideprobetochecktargetfragmentofintracellularDNA
ormRNAinsitu,inordertostudythegeneexpression.ExpressionofPSAandPSAmRNAinhumanprostate(histochemistry&ISH)The
methodinlearning
histologyCombinationofthe2dimentionalstructurewith3diment
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