标准解读

《GB/T 17778-1999 预混料中D-生物素的测定 分光光度法》是一项由中国发布的国家标准，旨在规定一种通过分光光度法来测定预混合饲料中D-生物素（也称为维生素H或生物素）含量的方法。该标准详细说明了检测流程、所需试剂、仪器设备、操作步骤以及计算方法，确保测试结果的准确性和可重复性。以下是该标准的主要内容概述：

标准适用范围

本标准适用于预混料中D-生物素含量的测定，预混料指的是为了补充动物饲料中营养成分而预先配制的、含有微量营养元素的混合物。

测定原理

测定基于D-生物素与某种显色剂反应后形成的化合物在特定波长下的吸光度变化。通过建立D-生物素标准溶液的吸光度与其浓度之间的线性关系，可以计算出样品中未知浓度的D-生物素含量。

试剂与材料

  • D-生物素标准品：用于制备标准曲线。
  • 显色剂：与D-生物素反应产生有色化合物的化学试剂。
  • 提取溶剂：用于从预混料中提取D-生物素。
  • 缓冲液和其他辅助试剂，确保反应条件稳定。

仪器设备

  • 分光光度计：用于测量溶液的吸光度。
  • 精确称量设备：用于称取样品和标准品。
  • 振荡器/搅拌器：用于样品的均匀处理。
  • 容量瓶、移液管等实验室玻璃器皿：用于溶液的准确配制和转移。

操作步骤

  1. 样品准备：准确称取适量预混料样品，使用提取溶剂进行处理，以释放出D-生物素。
  2. 标准曲线制作：制备一系列已知浓度的D-生物素标准溶液，分别加入相同量的显色剂后，测定各标准溶液的吸光度。
  3. 样品测定：将处理后的样品溶液同样加入显色剂，测定其吸光度。
  4. 计算：根据样品的吸光度及标准曲线，计算出样品中D-生物素的含量。

结果计算与表示

利用标准曲线得到的线性回归方程，将样品的吸光度值转换为D-生物素的浓度，再根据样品的处理体积和原始重量，计算出预混料中D-生物素的实际含量，通常结果以mg/kg（每千克预混料中的毫克数）表示。

注意事项

  • 实验过程中需严格控制实验条件，如温度、反应时间等，以保证结果的准确性。
  • 所有试剂应为分析纯或以上级别，确保实验无污染。
  • 详细记录实验数据，包括空白试验和重复试验的结果，以评估实验的精度和重复性。


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  • 被代替
  • 已被新标准代替，建议下载现行标准GB/T 17778-2005
  • 1999-06-14 颁布
  • 2000-02-01 实施
©正版授权
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ICS65.120B46中华人民共和国国家标准GB/T17778-1999预混料中d-生物素的测定分光光度法Methodfordeterminationofd-biotininpremix-Spectrophotometry1999-06-14发布2000-02-01实施国家质量技术监督局布

GB/T17778-1999本标准等效采用日本农牧水产畜牧局发布并实施的饲料添加剂规格《d-生物素制剂》中的测定标准第1法。在技术内容上对日本饲料漆加剂规格《d-生物素制剂》的测定方法作了部分改动,即添加了标准曲线的绘制。同时，按GB/T6379—1986《测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性》的规定及4个质量控制良好的实验室协同实验的结果，增设了“重复性”。本标准根据“质技监标函19997178号关于标准GB/T17778—1999复合预混料中d-生物素的测定第一号修改单的函"进行修改。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。本标准由国家饲料质量监督检验测试中心(武汉)负责起草。本标准主要起草人：钱方、钱沁、杨先奎。

中华人民共和国国家标准预混料中d-生物素的测定分光光；度法GB/T17778-1999Methodfordeterminationofd-biotininpremix-Spectrophotometry范围本标准规定了用-二甲氨基肉桂醛分光光度法测定饲料添加剂d生物素和预混料(维生素预混料和复合预混料)中d生物素的方法。本标准适用于饲料添加剂生物素、维生素预混料和复合预混料中生物素的测定。2方法原理将试样中d生物素用无水乙醇提取出来.在硫酸乙醇溶波中d-生物素和力-二甲氨基肉桂醛生成橙红色化合物，在一定范围内颜色深浅与d-生物素含量成正比。3试剂和溶液本标准所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯。3.1无水乙醇(GB/T678-1990)。3.2硫酸无水乙醇溶液(2+98):量取2mL硫酸和98mL无水乙醇，混勺。3.3-二甲氨基肉桂醛无水乙醇溶波(2g/L):称取0.28→-二甲氮基肉桂醛溶于无水乙醇，用无水乙醇稀释至100mL,混勾。3.4d-生物素标准溶液3.4.1d-生物素标准储备溶液：准确称取0.1000gd-生物素溶解于无水乙醇,定量转入100mL棕色溶量瓶中,用无水乙酵稀释至刻度,混勺。此液1.00mL含d-生物素1.00mg.3.4.2d-生物素标准工作溶液：准确量取d-生物素标准储备溶液1.00mL于100mL容量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,混勾。此液1.00mL含d-生物素10.00g。4仪器、设备4.1分光光度计：1.0cm比色血，可在530nm处测定吸光度。4.2磨口平底烧瓶：200ml.。5试样制备取具有代表性样品至少2kg,用四分法缩分至250g,粉

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