标准解读

《GB/T 29393-2012 柑桔黄龙病菌的检疫检测与鉴定》是一项国家标准，旨在为柑桔黄龙病菌（Candidatus Liberibacter asiaticus）的检疫检测提供科学依据和技术指导。该标准适用于进出境植物及其产品的检疫以及国内植物检疫过程中对柑桔黄龙病菌的检测和鉴定。

根据此标准，明确了柑桔黄龙病菌检测的方法选择原则，包括但不限于分子生物学方法如PCR技术的应用、血清学方法等，并且规定了不同检测方法的具体操作步骤。对于样品采集，给出了详细的采样要求，确保所采集样本能够真实反映待检植株或果实的状态。此外，还涵盖了实验室安全操作规范，以防止实验过程中可能发生的污染或交叉感染问题。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2012-12-31 颁布
  • 2013-03-01 实施
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GB/T 29393-2012柑桔黄龙病菌的检疫检测与鉴定_第1页
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T29393—2012

柑桔黄龙病菌的检疫检测与鉴定

DetectionandidentificationofCandidatusliberobacterasiaticum

2012-12-31发布2013-03-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T29393—2012

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位全国农业技术推广服务中心浙江省植物保护检疫局

:、。

本标准主要起草人吴立峰严铁林云彪项宇朱景全朱莉

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T29393—2012

柑桔黄龙病菌的检疫检测与鉴定

1范围

本标准规定了柑桔黄龙病菌亚洲种Candidatusliberobacterasiaticum的检测与鉴

jagoueixetal.

定方法

。

本标准适用于植物检疫过程中对柑桔黄龙病菌亚洲种的检测与鉴定

。

2病菌基本信息

中文名柑桔黄龙病菌

:。

学名Candidatusliberobacterasiaticum

:jagoueixetal.

病害英文名

:CitrusHuanglongbingHLB。

属薄壁菌门韧皮部杆菌属Liberobacter

Gracilicutes、。

3方法原理

根据柑桔黄龙病菌侵染柑桔植株发病典型症状进行田间鉴定经嫁接或经柑桔木虱Diahorina

;(p

citri传病后可根据木本指示植物发病症状鉴定聚合酶链反应检

),;(PolymeraseChainReaction,PCR)

测技术对柑桔黄龙病菌进行体外扩增可得到快速有效的鉴定结果

DNA,、。

4仪器及用具

紫外线透射仪或凝胶成像系统离心机核酸电泳仪计移液器

,,,pH,:10μL、20μL、100μL、

仪水浴器超纯水系统电子天平

1000μL,PCR,、,。

5试剂与材料

缓冲液三羟甲基氨基甲烷盐酸乙二胺四乙酸十二烷基硫酸钠

TAE,()-(Tris-HCl),(EDTA),

乙酸钠Taq酶缓冲液镁离子2+脱氧核苷三

(SDS),(NaAc),,10×PCR,25mmol/L(Mg),20mmol/L

磷酸荧光染料琼脂糖溴酚蓝高锰酸钾三氯甲烷氯仿异戊醇异丙醇

(dNTP),5μLDNA(GV),,,,(),,,

乙醇

。

6症状识别法

柑桔黄龙病主要鉴定依据是田间出现的叶片斑驳型黄化和黄梢叶片斑驳型黄化即叶片转绿

“”“”。

后从主侧脉附近和叶片基部开始黄化黄化部分扩展形成黄绿相间分布不均的斑驳后来可以全叶黄

、,,

化黄梢即在发病初期绿色树冠上少部分新梢枝叶片黄化有些柑桔结果树果实呈红鼻子果在

。,。“”。

柑桔黄龙病区符合上述典型症状的病苗病树可直接鉴定为柑桔黄龙病

、。

对难以下结论的疑似病苗病树可根

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