- 现行
- 正在执行有效
- 2012-12-31 颁布
- 2013-03-01 实施
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文档简介
ICS6502001
B16..
中华人民共和国国家标准
GB/T29393—2012
柑桔黄龙病菌的检疫检测与鉴定
DetectionandidentificationofCandidatusliberobacterasiaticum
2012-12-31发布2013-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T29393—2012
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC271)。
本标准起草单位全国农业技术推广服务中心浙江省植物保护检疫局
:、。
本标准主要起草人吴立峰严铁林云彪项宇朱景全朱莉
:、、、、、。
Ⅰ
GB/T29393—2012
柑桔黄龙病菌的检疫检测与鉴定
1范围
本标准规定了柑桔黄龙病菌亚洲种Candidatusliberobacterasiaticum的检测与鉴
jagoueixetal.
定方法
。
本标准适用于植物检疫过程中对柑桔黄龙病菌亚洲种的检测与鉴定
。
2病菌基本信息
中文名柑桔黄龙病菌
:。
学名Candidatusliberobacterasiaticum
:jagoueixetal.
病害英文名
:CitrusHuanglongbingHLB。
属薄壁菌门韧皮部杆菌属Liberobacter
Gracilicutes、。
3方法原理
根据柑桔黄龙病菌侵染柑桔植株发病典型症状进行田间鉴定经嫁接或经柑桔木虱Diahorina
;(p
citri传病后可根据木本指示植物发病症状鉴定聚合酶链反应检
),;(PolymeraseChainReaction,PCR)
测技术对柑桔黄龙病菌进行体外扩增可得到快速有效的鉴定结果
DNA,、。
4仪器及用具
紫外线透射仪或凝胶成像系统离心机核酸电泳仪计移液器
,,,pH,:10μL、20μL、100μL、
仪水浴器超纯水系统电子天平
1000μL,PCR,、,。
5试剂与材料
缓冲液三羟甲基氨基甲烷盐酸乙二胺四乙酸十二烷基硫酸钠
TAE,()-(Tris-HCl),(EDTA),
乙酸钠Taq酶缓冲液镁离子2+脱氧核苷三
(SDS),(NaAc),,10×PCR,25mmol/L(Mg),20mmol/L
磷酸荧光染料琼脂糖溴酚蓝高锰酸钾三氯甲烷氯仿异戊醇异丙醇
(dNTP),5μLDNA(GV),,,,(),,,
乙醇
。
6症状识别法
柑桔黄龙病主要鉴定依据是田间出现的叶片斑驳型黄化和黄梢叶片斑驳型黄化即叶片转绿
“”“”。
后从主侧脉附近和叶片基部开始黄化黄化部分扩展形成黄绿相间分布不均的斑驳后来可以全叶黄
、,,
化黄梢即在发病初期绿色树冠上少部分新梢枝叶片黄化有些柑桔结果树果实呈红鼻子果在
。,。“”。
柑桔黄龙病区符合上述典型症状的病苗病树可直接鉴定为柑桔黄龙病
、。
对难以下结论的疑似病苗病树可根
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