• 现行
  • 正在执行有效
  • 2018-02-06 颁布
  • 2018-09-01 实施
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GB/T 35912-2018猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测方法_第1页
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文档简介

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T35912—2018

猪繁殖与呼吸综合征病毒

荧光RT-PCR检测方法

Real-timeRT-PCRmethodfordetectionofporcinereproductive

andrespiratorysyndromevirus

2018-02-06发布2018-09-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T35912—2018

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中华人民共和国上海出入境检验检疫局中国农业科学院上海兽医研究所中华

:、、

人民共和国深圳出入境检验检疫局湖南圣湘生物科技有限公司中国检验检疫科学研究院

、、。

本标准主要起草人张强李健熊炜童光志赵和平李树清花群义杨忠苹李国新王巧全

:、、、、、、、、、、

王艳林颖峥蔡开妹喻正军林祥梅吴绍强

、、、、、。

Ⅰ

GB/T35912—2018

猪繁殖与呼吸综合征病毒

荧光RT-PCR检测方法

1范围

本标准规定了猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光检测的操作方法

RT-PCR。

本标准适用于猪繁殖与呼吸道综合征病毒美洲型毒株核酸检测

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

猪常温精液生产与保存技术规范

GB/T25172

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

荧光反转录聚合酶链式反应

Real-timeRT-PCR:(real-timereversetranscriptpolymerasechainre-

action)

Ct值每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环数

:(cyclethreshold)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

Taq酶Taq聚合酶Taq

:DNA(DNApolymerase)

缓冲液缓冲液

TE:Tris-EDTA(Tris-EDTAbuffer)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(diethylpyrocarbonate)

猪繁殖与呼吸综合征病毒

PRRSV:(porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus)

磷酸盐缓冲液

PBS:(phosphatebufferedsolution)

4仪器

41荧光检测仪

.PCR。

42高速台式冷冻离心机可控温至离心速度可达以上

.:4℃、12000r/min。

43组织研磨器或者研钵

.。

44普通冰箱

.:2℃~8℃。

45超低温冰箱可控温至以下

.:-70℃。

46微量移液器并

.:0.2μL~2μL、1μL~10μL、

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