GB/T 41689-2022土壤质量土壤样品直接提取DNA的方法

ICS1308001

CCSB.10.

中华人民共和国国家标准

GB/T41689—2022/ISO110632020

:

土壤质量土壤样品直接提取DNA的方法

Soilquality—DirectextractionofsoilDNA

ISO110632020IDT

(:,)

2022-10-12发布2023-05-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T41689—2022/ISO110632020

:

目次

前言

…………………………Ⅲ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

原理

4………………………1

测试材料

5…………………2

土壤样品

5.1……………2

化学品

5.2………………2

缓冲液及试剂

5.3………………………3

仪器

6………………………3

提取步骤

7DNA……………4

土壤样品的准备

7.1……………………4

机械与化学裂解

7.2……………………4

蛋白质沉淀

7.3…………………………4

核酸沉淀与洗涤

7.4……………………4

核酸储存

7.5……………4

土壤的质量和含量评估

8DNA…………4

土壤的质量与纯度

8.1DNA…………4

土壤的含量

8.2DNA…………………5

提取程序的验证

9…………………………5

测试报告

10…………………5

附录资料性本文件与中土壤样品直接提取方法之间的差异

A()ISO11063:2012DNA…………6

附录资料性纯化土壤提取物的可用方法

B()DNA……………………7

参考文献

………………………8

Ⅰ

GB/T41689—2022/ISO110632020

:

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件等同采用土壤质量土壤样品直接提取的方法

ISO11063:2020《DNA》。

本文件做了下列最小限度的编辑性改动

:

的中乙酸钾的质量计算错误数值由修正为

———ISO11063:20205.3.7,176.5294.4。

请注意本文件的内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国土壤质量标准化技术委员会归口

(SAC/TC404)。

本文件起草单位中国科学院南京土壤研究所中国科学院亚热带农业生态研究所江苏省质量和

:、、

标准化研究院等

。

本文件主要起草人潘贤章郭志英林先贵魏文学肖婷婷

:、、、、。

Ⅲ

GB/T41689—2022/ISO110632020

:

土壤质量土壤样品直接提取DNA的方法

1范围

本文件描述了一种从土壤样品直接提取的方法这些提取的被用来开展基于各种分子

DNA,DNA

生物学技术包括实时定量的土壤细菌群落丰度和组成分析该方法主要适用于农业及

[PCR(qPCR)]。

森林土壤该方法可能不适用于富含有机质的土壤如泥炭土有机污染物或重金属严重污染的土壤

。()、。

土壤样品直接提取为研究微生物群落多样性和多样性提供了独特视角通过土壤

DNAαβ。DNA

扩增获得扩增子的下一代测序将有助于开发土壤环境中微生物群落监测的常规工具

PCR,。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

土壤质量采样第部分实验室测定微生物过程生物量与多样性用土壤

ISO18400-206206:、

的好氧采集处理及贮存指南

、(Soilquality—Sampling—Part206:Collection,handlingandstorageof

soilunderaerobicconditionsfortheassessmentofmicrobiologicalprocesses,biomassanddiversityin

thelaboratory)

注实验室测定微生物过程生物量与多样性用土壤的好氧采集处理及贮存指南

:GB/T32725—2016、、(ISO10381-6:

1)

2009,IDT)

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

和在以下地址维护用于标准化的术语数据库

ISOIEC:

在线浏览平台

———ISO:/obp;

电子百科

———IEC:/。

31

.

土壤DNAsoilDNA

从土壤活体微生物提取的和死亡微生物的残留

DNADNA。

4原理

按以下提取步骤从土壤样品等量干重直接提取将添加了提取缓冲液和玻璃珠的土

,1g()DNA。

壤样品进行机械与化学裂解