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文档简介

核酸的组成与结构第一页,共一百四十八页,2022年,8月28日青山衬托之下,是一片金灿灿的中国水稻梯田。4月5日以中国梯田为封面的«Science»杂志以14页篇幅率先发表了一个重大成果—中国人独立完成的论文《水稻基因组的工作框架序列》,显示对中国科学家成就充分肯定。第二页,共一百四十八页,2022年,8月28日核酸(nucleicacid)

是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子,携带和传递遗传信息。第三页,共一百四十八页,2022年,8月28日1868年FridrichMiescher从脓细胞中提取“核素”1944年Avery等人证实DNA是遗传物质1953年Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构1968年Nirenberg发现遗传密码1975年Temin和Baltimore发现逆转录酶1981年Gilbert和Sanger建立DNA测序方法1985年Mullis发明PCR技术1990年美国启动人类基因组计划(HGP)1994年中国人类基因组计划启动2001年美、英等国完成人类基因组计划基本框架核酸的发现和研究工作进展第四页,共一百四十八页,2022年,8月28日核酸的分类及分布90%以上分布于细胞核,其余分布于核外如线粒体,叶绿体,质粒等。分布于胞核、胞液。(deoxyribonucleicacid,DNA)(ribonucleicacid,RNA)脱氧核糖核酸核糖核酸携带遗传信息,决定细胞和个体的基因型(genotype)。参与细胞内DNA遗传信息的表达。某些病毒RNA也可作为遗传信息的载体。第五页,共一百四十八页,2022年,8月28日核酸的化学组成1.元素组成C、H、O、N、P(9~10%)2.分子组成——碱基(base):嘌呤碱,嘧啶碱——戊糖(ribose):核糖,脱氧核糖——磷酸(phosphate)第六页,共一百四十八页,2022年,8月28日

§1

核酸的组成单位核酸的基本组成单位——

核苷酸核酸的一级结构第七页,共一百四十八页,2022年,8月28日核酸

水解水解水解单核苷酸(B-R-P)磷酸(P)戊糖(R,dR)

碱基(B)核苷(B-R)

图3-1核酸分子的组成知识点1第八页,共一百四十八页,2022年,8月28日戊糖碱基核苷:核糖或脱氧核糖与碱基生成的糖苷核苷酸:核苷与磷酸形成的磷酸酯核酸的基本组成单位——

核苷酸第九页,共一百四十八页,2022年,8月28日戊糖(构成RNA)1´2´3´4´5´核糖(ribose)(构成DNA)脱氧核糖(deoxyribose)第十页,共一百四十八页,2022年,8月28日嘌呤(purine)腺嘌呤(adenine,A)鸟嘌呤(guanine,G)碱基NNNHN123456789知识点2第十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日嘧啶(pyrimidine)胞嘧啶(cytosine,C)尿嘧啶(uracil,U)胸腺嘧啶(thymine,T)NNH132456知识点3第十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日

O

OH-P-OH=H3PO4OH-=-H2PO3P磷酸第十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日戊糖碱基核苷:核糖或脱氧核糖与碱基生成的糖苷核苷酸:核苷与磷酸形成的磷酸酯核酸的基本组成单位——

核苷酸第十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日核苷:核糖或脱氧核糖与碱基生成的糖苷1´1第十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日戊糖碱基核苷:核糖或脱氧核糖与碱基生成的糖苷核苷酸:核苷与磷酸形成的磷酸酯核酸的基本组成单位——

核苷酸第十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日核苷酸:AMP,GMP,UMP,CMP脱氧核苷酸:dAMP,dGMP,dTMP,dCMP

核苷酸:核苷与磷酸形成的磷酸酯知识点4第十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日体内重要的游离核苷酸及其衍生物多磷酸核苷酸:NMP、NDP、NTPAMPADPATP第十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日ATP的性质ATP分子的最显著特点是含有两个高能磷酸键。ATP水解时,可以释放出大量自由能。ATP是生物体内最重要的能量转换中间体。ATP水解释放出来的能量用于推动生物体内各种需能的生化反应。第十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日体内重要的游离核苷酸及其衍生物含核苷酸的生物活性物质:NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD等都含有AMP多磷酸核苷酸:NMP,NDP,NTP环化核苷酸:cAMP,cGMPcAMPNADP+NAD+第二十页,共一百四十八页,2022年,8月28日

§1

核酸的组成单位核酸的基本组成单位——

核苷酸核酸的一级结构第二十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日核酸的一级结构

1.

定义:硷基的排列顺序

⑴骨架链:糖-磷酸链(R-P)⑵连接键:3’,5’—磷酸二酯键⑶侧链:碱基⑷方向:5’P末端→3’-OH末端

2.核苷酸的连接3.核酸分子结构表示法

知识点5第二十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日单核苷酸的连接第二十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日5´端3´端CGA核苷酸之间以磷酸二酯键连接形成多核苷酸链,即核酸。第二十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日AGP5PTPGPCPTPOH3书写方法5pApCpTpGpCpT-OH

35

ACTGCT

3第二十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日§2DNA的空间结构

一、DNA的二级结构-双螺旋结构模型

二、DNA的三级结构

第二十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日

一、DNA的二级结构-双螺旋结构模型

1.双螺旋结构的主要依据2.结构要点3.DNA结构的多样性

第二十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日ErwinChargaff(1905-1995)

Chargaff规则

(20世纪40-50年代)不同物种的DNA碱基组成不同;同一生物体的不同组织的DNA的碱基组成相同;[A]=[T],[G]=[C],[A]+[G]=[T]+[C]第二十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日RosalindFranklin

第二十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日

Wilkins和Franklin发现不同来源的DNA纤维具有相似的X-射线衍射图谱。DNA分子X射线衍射照片

第三十页,共一百四十八页,2022年,8月28日

Pauling和Corey发现A与T生成2个氢键、C与G生成3个氢键。第三十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日英国的《自然》杂志刊登了J.Watson(1928-).H.C.Crick(1916)在剑桥合作的成果——DNA双螺旋结构的分子模型,这一成就被誉为是20世纪以来生物学方面最伟大的发现,是分子生物学诞生的标志。JamesWatson&Francisrick第三十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日

一、DNA的二级结构-双螺旋结构模型

1.双螺旋结构的主要依据2.结构要点3.DNA结构的多样性

第三十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日先分析结构图第三十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日碱基之间形成的氢键及互补配对

第三十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日第三十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日要点小结:第三十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日第三十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日第三十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日第四十页,共一百四十八页,2022年,8月28日

一、DNA的二级结构-双螺旋结构模型

1.双螺旋结构的主要依据2.结构要点3.DNA结构的多样性

第四十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日DNA结构的多样性右手双螺旋(B-DNA):生理条件下最稳定的结构A-DNA:右手双螺旋、螺旋直径2.6nm、螺距2.5nm,11个碱基/周Z-DNA:左手螺旋、螺旋直径1.8nm、螺距4.5nm、12碱基/周、核酸链骨架显Z字型走行。第四十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日不同类型的DNA结构第四十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日某些DNA具有更复杂的螺旋结构1.Hoogsteen碱基配对形成三股螺旋DNAH-DNA的结构第四十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日2.4条多聚鸟嘌呤核苷酸链形成四螺旋DNA第四十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日§2DNA的空间结构

一、DNA的二级结构-双螺旋结构模型

二、DNA的三级结构

第四十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日原核生物DNA的超螺旋结构DNA在真核生物细胞核内的组装

二、DNA的三级结构第四十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日DNA的超螺旋结构超螺旋结构(superhelix或supercoil)DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构

第四十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日环状DNA结构示意图第四十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日原核生物DNA的高级结构:

在共价闭环双螺旋基础上进一步扭转盘曲,形成超螺旋(supercoil)体积进一步压缩.知识点7第五十页,共一百四十八页,2022年,8月28日意义DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。第五十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日原核生物DNA的超螺旋结构DNA在真核生物细胞核内的组装

二、DNA的三级结构第五十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日DNA在真核生物细胞核内的组装真核生物染色体由DNA和蛋白质构成,其基本单位是核小体(nucleosome)。核小体的组成DNA:约200bp组蛋白:H1H2A,H2BH3H4知识点8第五十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日组蛋白是小分子量的碱性蛋白质组蛋白分子质量在11kD到21kD之间,组蛋白中富含精氨酸和赖氨酸。各种真核细胞都有5种组蛋白,但分子质量和氨基酸的顺序有些差异。在所有真核生物中H3,H4组蛋白氨基酸序列高度保守,提示功能是相同的。但是各种生物的H1、H2A、H2B的相似性很少。第五十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日核小体的折叠及染色体组装—2nm11nm30nm300nm1400nm700nm逐级盘曲折叠第五十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日DNA在真核生物细胞核内的组装

(动画)第五十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日§3RNA的空间结构与分类信使RNA(mRNA)转运RNA(tRNA)

核蛋白体RNA(rRNA)

RNA与DNA分子组成及结构差异第五十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日RNA与DNA分子组成及结构差异基本成分的差异。结构差异:单链、局部双螺旋、碱基不严格配对。种类较多。较多稀有碱基知识点9第五十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日

两类核酸的基本成分第五十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日RNA与DNA分子组成及结构差异基本成分的差异。结构差异:单链、局部双螺旋、碱基不严格配对。第六十页,共一百四十八页,2022年,8月28日RNA的结构特点

RNA是单链分子,因此,在RNA分子中,并不遵守碱基种类的数量比例关系,即分子中的嘌呤碱基总数不一定等于嘧啶碱基的总数。

RNA分子中,部分区域也能形成双螺旋结构,不能形成双螺旋的部分,则形成突环。这种结构可以形象地称为“发夹型”结构。第六十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日RNA的发夹结构(突环)第六十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日第六十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日RNA的结构特点

RNA是单链分子,因此,在RNA分子中,并不遵守碱基种类的数量比例关系,即分子中的嘌呤碱基总数不一定等于嘧啶碱基的总数。

RNA分子中,部分区域也能形成双螺旋结构,不能形成双螺旋的部分,则形成突环。这种结构可以形象地称为“发夹型”结构。第六十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日RNA的结构特点在RNA的双螺旋结构中,碱基的配对情况不象DNA中严格。G

除了可以和C

配对外,也可以和U

配对。G-U配对形成的氢键较弱。第六十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日RNA与DNA分子组成及结构差异基本成分的差异。结构差异:单链、局部双螺旋、碱基配对种类较多较多稀有碱基第六十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日

真核细胞内主要RNA的种类与功能

细胞核和胞液线粒体功能核蛋白体RNArRNAmtrRNA核蛋白体的组分信使RNAmRNAmtmRNA蛋白质合成膜板转运RNAtRNAmttRNA转运氨基酸不均一核RNAHnRNAmRNA的前体核内小RNASnRNA参与HnRNA的剪接、转运核仁小RNASnoRNArRNA的加工,修饰小胞质RNAscRNA/7SL-RNA蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组分第六十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日§3RNA的空间结构与分类信使RNA(mRNA)转运RNA(tRNA)

核蛋白体RNA(rRNA)

RNA与DNA分子组成及结构差异第六十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日

mRNA(信使RNA)

MessengerRNA约占总RNA的3%。不同细胞的mRNA的链长和分子量差异很大。半衰期最短知识点10第六十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日结构特点:原核生物的mRNA是多顺反子,真核生物的mRNA是单顺反子(hnRNAmRNA)真核细胞mRNA的3‘-末端有一段长达200个核苷酸左右的聚腺苷酸(polyA),称为“尾结构”,5’-末端有一个甲基化的鸟苷酸,称为“帽结构”。第七十页,共一百四十八页,2022年,8月28日真核生物

mRNA的结构AAAA……Anm7GpppAUGGUGUAA………………5´3´5´帽子结构密码子3´多聚A尾

5´非编码区编码区

3´非编码区:第七十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日帽子结构动画第七十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日mRNA核内向胞质的转位mRNA的稳定性维系翻译起始的调控帽子结构和多聚A尾的功能第七十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日结构特点:原核生物的mRNA是多顺反子,真核生物的mRNA是单顺反子(hnRNAmRNA)真核细胞mRNA的3‘-末端有一段长达200个核苷酸左右的聚腺苷酸(polyA),称为“尾结构”,5’-末端有一个甲基化的鸟苷酸,称为“帽结构”。它的功能是将DNA的遗传信息传递到蛋白质合成基地–核糖核蛋白体。第七十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日

mRNA的功能把DNA所携带的遗传信息,按碱基互补配对原则,抄录并传送至核糖体,用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。DNAmRNA蛋白转录翻译原核细胞细胞质细胞核DNA内含子外显子转录转录后剪接转运mRNAhnRNA翻译蛋白知识点11真核细胞第七十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日§3RNA的空间结构与分类信使RNA(mRNA)转运RNA(tRNA)

核蛋白体RNA(rRNA)

RNA与DNA分子组成及结构差异第七十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日

tRNA(转移RNA)

TransferRNA

约占总RNA的10-15%。是细胞里分子量较小的一类核酸,链长一般在70-90个核苷酸之间。含有较多的稀有碱基和稀有核苷,DHU、T、、mG和mA、次黄嘌呤等。知识点12第七十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日N,N二甲基鸟嘌呤N6-异戊烯腺嘌呤双氢尿嘧啶4-巯尿嘧啶

稀有碱基

第七十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日

tRNA(转移RNA)

TransferRNA

它们的3,末端都是-CCA-OH序列,已知每一个氨基酸至少有一个相应的tRNA。它们的二级结构总是三叶草型,三级结构是到“L”型。知识点13第七十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日tRNA的二级结构都呈”三叶草”形状,在结构上具有某些共同之处,一般可将其分为五臂四环:包括氨基酸接受区、反密码区、二氢尿嘧啶区、TC区和可变区。在三叶草型二级结构的基础上,突环上未配对的碱基由于整个分子的扭曲而配成对,目前已知的tRNA的三级结构均为倒L型。第八十页,共一百四十八页,2022年,8月28日tRNA的二级结构第八十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日

TψC环氨基酸臂DHU环反密码环反密码子tRNA三级结构及氢键的位置第八十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日动画第八十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日

tRNA的功能活化、搬运氨基酸到核糖体,参与蛋白质的翻译。知识点14第八十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日§3RNA的空间结构与分类信使RNA(mRNA)转运RNA(tRNA)

核蛋白体RNA(rRNA)

RNA与DNA分子组成及结构差异第八十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日rRNA(核糖体RNA)

RibosomeRNA约占全部RNA的80%是核糖核蛋白体的主要组成部分。rRNA

和蛋白质结合形成的核蛋白体是蛋白质的合成场所。知识点15第八十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日核糖体RNA的结构第八十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日

70S

80S50S30S60S40S31proteins23SRNA5SRNA21proteins16SRNA49proteins28SRNA5.8SRNA33proteins18SRNA原核生物核蛋白体真核生物核蛋白体第八十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日核蛋白体构象第八十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日局部双链tRNArRNAmRNA三叶草形、倒L形含稀有碱基多反密码子CCA-OH3'呈花状5'

-m7GpppNm3'-polyA编码序列单链局部双链结构蛋白质合成的模板搬运活化的aa到核糖体组成核蛋白体分子大小不一量<10%,代谢快分子量小120碱基稳定分子大120碱基量>80%,稳定三种RNA内容小结功能第九十页,共一百四十八页,2022年,8月28日§4核酸的理化性质一、核酸的一般理化性质二、DNA的变性(denaturation)三、DNA的复性与分子杂交第九十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日核酸是酸性较强的多元酸DNA分子的长度与直径之比达到107,极易在机械力的作用下发生断裂紫外吸收特性----260nm特征性吸收峰核酸的一般理化性质第九十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日核酸的紫外吸收

嘌呤和嘧啶碱基具有共轭双键,这使核苷、核苷酸及核酸可以吸收紫外光,最大吸收峰位于波长260nm附近,因此经常用A260(在260nm处的吸光度)或OD260(260nm处的光密度值)表示核酸的浓度。利用核酸的紫外吸收特性,可以用紫外分光光度法对DNA和RNA进行定性和定量分析。第九十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日481216消光系数8×10-3AGTCU220240260280300320nm波长各种碱基的紫外吸收光谱第九十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日§4核酸的理化性质一、核酸的一般理化性质二、DNA的变性(denaturation)三、DNA的复性与分子杂交第九十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日DNA的变性(denaturation)定义:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。方法:过量酸,碱,加热,变性试剂如尿素、以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮、甲醛等。变性后其它理化性质变化:OD260增高 ,生物活性丧失知识点18第九十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日DNA变性的本质是双链间氢键断裂,变成单链。加热变性氢键断裂缓慢冷却复性天然双链DNA变性DNADNA的变性和复性第九十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日

DNA热变性:特点—骤然、突发式融解温度Tm(meltingtemperature)Tm与G+C含量成正比第九十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日DNA解链曲线8084889296100℃0.700.650.600.550.50A260Tm第九十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日Tm:变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度,又称融解温度(meltingtemperature,Tm)。其大小与G+C含量成正比。用途:粗略推算DNA的碱基组成及长度。第一百页,共一百四十八页,2022年,8月28日DNA的解链曲线和Tm值第一百零一页,共一百四十八页,2022年,8月28日

DNA热变性:增(高)色效应:

DNA变性时其溶液OD260增高的现象知识点17第一百零二页,共一百四十八页,2022年,8月28日变性引起紫外吸收值的改变第一百零三页,共一百四十八页,2022年,8月28日§4核酸的理化性质一、核酸的一般理化性质二、DNA的变性(denaturation)三、DNA的复性与分子杂交第一百零四页,共一百四十八页,2022年,8月28日三、DNA的复性与分子杂交DNA复性(renaturation)在适当条件下,变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。减色效应DNA复性时,其溶液OD260降低。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程称为退火(annealing)。知识点18第一百零五页,共一百四十八页,2022年,8月28日DNA复性(renaturation)复性的条件:只有温度缓慢下降才可以复性一般认为,比Tm低25℃是复性的最佳条件。第一百零六页,共一百四十八页,2022年,8月28日在DNA变性后的复性过程中,如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件下,就可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。核酸分子杂交(hybridization)第一百零七页,共一百四十八页,2022年,8月28日这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成,也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。第一百零八页,共一百四十八页,2022年,8月28日第一百零九页,共一百四十八页,2022年,8月28日第一百一十页,共一百四十八页,2022年,8月28日研究DNA分子中某一种基因的位置定两种核酸分子间的序列相似性检测某些专一序列在待检样品中存在与否是基因芯片技术的基础核酸分子杂交的应用:第一百一十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日将不同种生物的DNA分子进行杂交,可以说明生物之间亲缘关系的远近把人、黑猩猩和长臂猿的某些DNA进行杂交,发现人的DNA和黑猩猩的DNA杂交后形成的杂交DNA杂合双链区多于人的DNA与长臂猿杂交形成的杂合双链区,即人与黑猩猩的DNA更相似,这就说明人与黑猩猩的亲缘关系要近于人与长臂猿的亲缘关系。DNA杂交技术是人们从分子生物学角度为生物进化提供的一个非常可靠的证据。DNA分子杂交的应用第一百一十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日将同种生物的DNA杂交,可用于亲子鉴定

人与人之间的99.99%的遗传密码都相同,但又存在万分之一的差别,使每个人都具备区别于他人的碱基序列。这就是DNA的遗传多态性。每个人多态性位点的差别就成为个人识别的标志。尽管遗传多态性的存在,但每一个人的染色体也必然来自父母,这就是DNA亲子鉴定的理论基础。第一百一十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日在医学实践中,能准确进行亲子鉴定的是DNA检测,检测方法并非检测出全部碱基顺序,而是进行DNA杂交,即把所要检测的两人的DNA进行杂交,再比较差异大小,从而说明两人的血缘关系,如父子、母女等。第一百一十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日另外,在公安机关的刑事侦察中,也常用DNA杂交技术进行痕迹检验。犯罪分子只要留下一丝一毫的身体细胞遗留物,如血液、皮屑、毛发等,技术人员就可以把犯罪嫌疑人的DNA样本和现场发现的遗留物中提取的DNA样本通过DNA杂交,比较它们是否相同,从而确定现场留下的痕迹是否为犯罪嫌疑人的。这在司法实践中可作为科学的举证。将同种生物的DNA杂交,可用于痕迹检验等第一百一十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日

分子探针(probe):

是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的,能与特定的核酸序列发生特异性互补的已知DNA或RNA片段。第一百一十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日第一百一十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日探针的种类cDNA探针、基因组DNA探针、寡核苷酸探针、RNA探针标记物核素标记物(同位素标记):32P、35S、3H、14C、125I、131I等非核素标记物(非同位素标记):生物素、地高辛、荧光素等第一百一十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日黛玛寻人启示今登报寻找失散多年的妻子玛黛女士及我们的孩子!百万富翁——马可尼滴血认亲第一百一十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日滴血认亲我是您的女儿,我来自曼彻斯特!寻人启示今登报寻找失散多年的妻子玛黛女士及我们的孩子!黛玛我是您的女儿,我来自都柏林!第一百二十页,共一百四十八页,2022年,8月28日滴血认亲寻人启示今登报寻找失散多年的妻子玛黛女士及我们的孩子!黛玛我是您的女儿,我来自利物浦!第一百二十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日告示如有人能为本案提供确凿证据,判明是非,本院将酬谢两万英镑!英国生物化学研究所第一百二十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日利物浦都柏林曼彻斯特第一百二十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日

核酸酶(Nuclease)核酸酶是指所有可以水解核酸的酶依据底物不同分类DNA酶(deoxyribonuclease,DNase):专一降解DNA。RNA酶(ribonuclease,RNase):专一降解RNA。第一百二十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日依据切割部位不同核酸内切酶:分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。核酸外切酶:5´→3´或3´→5´核酸外切酶。第一百二十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日参与DNA的合成与修复及RNA合成后的剪接等重要基因复制和基因表达过程负责清除多余的、结构和功能异常的核酸,同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸在消化液中降解食物中的核酸以利吸收体外重组DNA技术中的重要工具酶生物体内的核酸酶负责细胞内外催化核酸的降解核酸酶的功能第一百二十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日核酸的催化性质长时间以来,人们认为酶都是蛋白质。1981年,美国两位生物化学家T.Cech和S.A.Altman发现了某些核糖核酸(RNA)的催化作用,并提出了核酶(Ribozyme)的概念。第一百二十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日核酸的催化性质催化性RNA(ribozyme)

作为序列特异性的核酸内切酶降解mRNA。催化性DNA(DNAzyme)

人工合成的寡聚脱氧核苷酸片段,也能序列特异性降解RNA。第一百二十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日第一百二十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日典型试题分析A型题

1.核苷酸中碱基(N)、戊糖(R)和磷酸(P)之间的连接关系是:A.N-R-PB.N-P-RC.R-N-PD.P-N-RE.R-P-P-N第一百三十页,共一百四十八页,2022年,8月28日

2.某DNA分子中腺嘌呤的含量为20%,则胞嘧啶的含量为:A.10%B.15%C.20%D.25%E.30%第一百三十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日

3.核酸的各基本组成单位之间的主要连接键是:A.二硫键B.糖苷键C.磷酸二酯键D.肽键E.氢键第一百三十二页,共一百四十八页,2022年,8月28日

4.下列关于B-DNA双螺旋结构模型的叙述中,哪一项是错误的?

A.两条链方向相反

B.两股链通过碱基之间的氢键相连

C.为右手螺旋,每个螺旋包含了10对碱基

D.碱基位于螺旋外侧

E.螺旋的直径为2nm第一百三十三页,共一百四十八页,2022年,8月28日

5.下列关于tRNA的叙述,错误的是:含有密码子环通常由70~90个核苷酸组成参与蛋白质生物合成三级结构呈倒“L”形含有大量的稀有碱基第一百三十四页,共一百四十八页,2022年,8月28日

6.下列几种DNA分子的碱基组成比例不同,哪一种DNA的Tm值最高?A.DNA中A-T占15%B.DNA中G-C占25%C.DNA中G-C占40%D.DNA中A-T占80%E.DNA中G-C占55%第一百三十五页,共一百四十八页,2022年,8月28日

7.下列关于DNA双螺旋结构的叙述,正确的是:磷酸核糖在双螺旋外侧,碱基位于内侧碱基对平面与螺旋轴平行遵循碱基配对原则,但有摆动现象核糖平面与螺旋轴垂直两条链的方向是相同的第一百三十六页,共一百四十八页,2022年,8月28日

8.人们通常用寡聚dT从总RNA中分离出mRNA,这是利用mRNA分子的哪一种特点?A.5'-端帽子结构B.沉降系数为6~25SC.分子大小不均一D.3'-端有多聚AE.分子中有发夹样结构第一百三十七页,共一百四十八页,2022年,8月28日

9.关于RNA的叙述,错误的是:A.主要有mRNA、tRNA、rRNA三大类B.胞质中只有一种RNA,即mRNAC.最小的一种RNA是tRNAD.原核生物没有hnRNAE.原核生物没有snRNA

第一百三十八页,共一百四十八页,2022年,8月28日

10.DNA变性时:溶液粘度增加浮力密度降低

260nm处光吸收增强易被蛋白酶降解分子量降低第一百三十九页,共一百四十八页,2022年,8月28日11.关于核酸分子杂交的叙述,下列那项是错误的?不同来源的两条单链DNA,只要有部分碱基互补,就可杂交

DNA单链可与有几乎相同互补碱基的RNA链杂交以mRNA为模板,在逆转录酶催化下,可合成RNA-DNA杂交链

RNA可与编码的多肽链结合成为杂交分子通过分子杂交技术,可从基因文库中筛选出目的基因第一百四十页,共一百四十八页,2022年,8月28日12.下列关于ribozyme的叙述,哪一个是正确的?即核酸酶本质是蛋白质本质是核糖核酸最早发现的一种酶其辅酶是辅酶A第一百四十一页,共一百四十八页,2022年,8月28日

13.下列关于rRNA的叙述,正确的是:

原核生物的核糖体中有四种rRNA,即23S、16S、5S和5.8S原核生物的核糖体中有三种rRNA,即23S、18S、和5S真核生物的核糖体中有三种rRNA,即28S、18S、和5S真核生物的核糖体中有四种rRNA,即28S、18S、5S和5.8S真核与原核生物的核糖体具有完全相同的rRNA第一百

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