抗gbm肾小球肾炎发病机制研究进展

抗GBM肾小球肾炎

发病机制研究进展梁倩浙江大学医学院附属一院肾脏病中心主要内容定义与历史回顾病因与检测方法发病机制及研究进展抗GBM肾小球肾炎定义：抗GBM抗体在脏器中沉积所引起的一组自身免疫性疾病，病变局限于肾脏表现：新月体性肾炎特点：血清中存在抗GBM抗体，并在肾小球基底膜上线样沉积历史回顾由ErnestGoodpasture于1919年首次报道，并以此命名为Goodpasture综合症1967年首次发现抗肾小球基底膜（抗GBM）抗体，同时在哺乳动物的肾小球基底膜上发现了Good-pasture抗原的表达LernerRA,etal.JExpMed,1967,126:989-1013病因与检测方法病因环境因素上呼吸道感染吸入碳氢化合物吸烟肾脏疾病原有肾小球肾炎尿路感染肾结石检测方法目前敏感性和特异性更高的固相分析法，如放免分析法、ELISA及免疫印染法早期间接免疫荧光法对肾脏切片进行抗GBM抗体筛查ELISA检测抗GBMIgG抗体体外定量或半定量检测人血清或血浆中抗GBMIgG抗体。适应证：肾肺综合症。在未累及肺的病例中抗GBM抗体阳性率为60%,而在累及肺的病例中抗GBM抗体的阳性率为80-90%。已温育的抗GBM抗体ELISA微孔板条发病机制及研究进展HLA环境因素GBM靶抗原暴露抗GBM抗体与抗原结合补体激活淋巴细胞、单核巨噬细胞浸润肾小球损伤免疫发病机制研究进展抗GBM肾炎遗传易感性抗GBM抗体靶抗原的研究抗GBM抗体的免疫学特性细胞免疫在疾病发生发展中的作用遗传易感性

与HLA-DR2关系密切

ReesAJ,etal.Lancet,1998,6:966-968与HLA-DRB11501关系最密切（易感基因）

高加索人、日本人及中国人抗GBM肾炎发病与之明显相关PhelpsRG,etal.JBioChem,1998,273:11440-11447WataruKitagawa,etal.NephrolDialTransplant,2008,23:3126-3129YangR,etal.ClinImmunol,2009,133(2):245-50

HLA-DRB10701和0101为保护性等位基因SalamaAD,etal.CurrOpinNephrolHypertens,2002,11:279-286PhelpsRG,etal.IntImmunol,2000,12:1135-1143抗GBM抗体靶抗原的研究抗GBM抗体靶抗原又称Goodpasture抗原主要靶抗原位于IV型胶原α3链非胶原区1【

α3（IV）NC1】进一步确定为α3链氨基端的两个主要抗原决定簇EpisodeA(EA)和EpisodeB（EB）WieslanderJ,etal.ProcNatlAcadSciUSA,1984,81:1544-1548HellmarkT,etal.NephrolDialTransplant,1997,12:646-648NetzerKO,etal.JBiolChem,1999,274:11267-274BorzaDB,etal.al.JBiolChem,2000,275:6030-6037肾小球基底膜IV型胶原结构DavidJ,etal.NEngIJMed.2010Oct28;363(18):1770-1771α3（IV）NC1是抗GBM抗体靶抗原图A：66例患者中，18例患者血清仅识别α3（IV）NC1；图B：12例患者血清可同时识别α3和α5链；图C：33例患者血清可同时识别α1、α3、α4和α5图D：14例患者肾组织洗脱液可识别α3、α4和α5PedchenkoV,etal.NEngIJMed.2010Jul22;363(4):343-54ABCDEA和EB是α3（IV）NC1主要抗原决定簇StephenR,etal.JAutoimmun.2008Nov;31(3):295-300.EA和EB是α3（IV）NC1主要抗原决定簇α3（IV）NC1分子氨基端具有2个主要抗原决定簇：EA（第17~31位氨基酸）和EB（第127~141位氨基酸）研究证实绝大多数抗GBM病患者血清可识别EA和EBEA和EB在空间构象上紧密相连，在六聚体中处于隐蔽位置，不能与抗体结合α3（IV）NC1分子氨基端JeongSukKang,etal.JBiolChem,2007,282:10670-677Xu-PingWang,etal.JAmSocNephrol,2005,16:3567-3571α345三聚体α5（IV）NC1为天然暴露的抗原表位PedchenkoV,etal.NEngIJMed.2010Jul22;363(4):343-54四个同源区：

α3（IV）NC1的EA与EB，α5（IV）NC1的EA与EBα3（IV）NC1的EA与EB，α5（IV）NC1的EA是自身抗体结合的关键部位α5NC1EA区中的Ala19、Gln24、Gln28、Leu27和Val29是六聚体天然暴露的抗原表位抗GBM抗体靶抗原Xu-PingWang,etal.JAmSocNephrol16:3563–3571抗GBM抗原决定簇差异决定肾脏损害程度肾脏损害重者,其抗原决定族位于α3(Ⅳ)NC1区的氨基末端肾脏损害轻者,其主要抗原决定族有可能位于α3(Ⅳ)链氨基端以外的区域或者是其它的α(Ⅳ)链识别a5(IV)NC1的抗体水平与患者肾脏病理中细胞性新月体的比例呈正相关SadoY，etal.JPathol,1997;182:225~232HellmarkT,etal.KidneyInt,1999,55:936-944

YangR,etal.

ClinImmuno,l2007,124(2):207-211抗GBM抗体抗GBM抗体

其致病性在动物实验和临床研究中已得到充分证明——患者抗GBM抗体可诱发猴的急进性肾炎LernerRA,etal.JExpMed,1967,126:989-1013——抗GBM抗体水平与病情严重程度和预后有高度的相关性SalamaAD,etal.Lancet,2001,358:917-920CouserWG,etal.AmJKidneyDis,1988,11:449-464——抗体未转阴情况下行肾移植，移植肾会再次发生抗GBM肾炎WilsonCB,etal.KidneyInt,1973,3:74-89天然抗GBM抗体正常人血清中存在天然抗GBM抗体，占血清总IgG的0.5%均为IgG2和IgG4亚型天然抗GBM抗体所识别的靶抗原仅限于α3（IV）NC1，不能识别其他α链CuiZ,etal.KidneyInt,2006,69(15):894-898YangR,etal.ClinImmunol,2007,124(2):207-211抗GBM抗体的免疫学特性均为IgG型，4种亚型均有分布，且以IgG1和IgG4（女性多见）为主IgG亚型的类别转换对疾病的发生可能起到了至关重要的作用高滴度、高亲和力，其亲和力与肾脏病理表现严重程度密切相关（天然抗GBM抗体：致病性抗体滴度1:60vs1:1000,P<0.0001；亲和力9.09×10-7mol-1

：6.5×10-11mol-1）识别不同靶抗原的抗GBM抗体与临床表型相关CuiZ,etal.BeijingDaXueXueBao,2004,36(5):501-505研究热点抗原决定簇扩散活性VitDIgG亚型类别转换仅存在于学者的推测中，并没有相关文献报道细胞免疫在抗GBM肾炎

发生发展中的作用细胞免疫概述两种辅助性T淋巴细胞当受到刺激时，静止T细胞分泌几乎所有T细胞来源的细胞因子，但浓度较低，这通常称为THO细胞，激活的APC产生IL-12，刺激进一步分化，诱导T细胞转成THI表达型。TH1产生IFN-γ和IL-2，介导细胞免疫。嗜硷或肥大细胞产生的IL-4诱导T细胞变成TH2表达型，分泌IL-4，IL-5和IL-10负责诱导B细胞产生抗体，体液免疫。T细胞在抗GBM肾炎中起到重要作用HLA-II类分子与抗GBM肾炎易感性有密切关系抗GBM抗体存在IgG亚型的类别转换肾活检病理中存在CD4+和CD8+T细胞浸润细胞免疫参与抗GBM肾炎的发生和发展HopferH,etal.FASEBJ,2003May;17(8):860-8

DBA/1小鼠C57BL/6小鼠AKR小鼠NOD小鼠DBA/1小鼠DBA/1小鼠DBA/1小鼠对照组DBA/1小鼠DBA/1小鼠CD4+T细胞被动转移可以诱导抗GBM肾病的产生WuJ,etal.JClinInvest,2002,109(4):517-24以人α3（IV）NC1刺激后CD4+T细胞免疫小鼠，可导致无免疫复合物沉积的新月体肾炎。IgM（+）IgG（-）P38/JNKMAPK通路参与发病

肾小球内皮细胞、巨噬细胞、T细胞、成肌纤维细胞上均有该通路存在StambeC,etal.KidneyInt,2003Dec;64(6):2121-32

在急性抗GBM肾炎模型中，上述细胞均存在该通路的激活FlancRS,etal.KidneyInt,

2007Sep;72(6):698-708使用该通路特异性阻断剂可减少新月体形成，并延缓抗GBM肾炎进展MaFY,etal.LabInvest.2009Apr;89(4):470-84.Epub2009Feb2

抗肾小球基底膜肾炎

动物模型抗GBM肾炎动物模型实验性自身免疫性肾炎模型：

给宿主注入GBM或α3（IV）NC1来诱导自身免疫反应肾毒血清肾炎模型：

给宿主注入异种抗GBM抗体来诱导免疫反应实验性自身免疫性肾炎模型Sado等应用α3（IV）NC1蛋白主动免疫法，成功制备抗GBM肾炎模型Yoshikazu

Sado,

etal.

KidneyInternational(1998)53,664–671

α3（IV）NC1α4（IV）NC1α5（IV）NC1α3（IV）NC1α4（IV）NC1肾毒血清肾炎模型异种期：注射后24h内发生，异种抗GBM抗体直接沉积在宿主GBM上而产生的一过性损伤同种期：宿主将沉积在GBM上的异种免疫球蛋白视为植